Ganglio simpatico cervicale indotta da etanolo blocco applicazioni per promuovere la rigenerazione del nervo alveolare inferiore canini utilizzando un nervo artificiale
Summary
Abbiamo valutato l’effetto del blocco ganglio simpatico cervicale su uso di guaine nervose artificiali la riparazione del nervo. Cani di razza beagle maschio sono stati ciascuno impiantati con un nervo artificiale attraverso un varco di 10 mm nel nervo alveolare inferiore sinistro; ganglio simpatico cervicale di sinistra è stato bloccato con l’iniezione di etanolo 99,5% via il thoracotomy laterale.
Abstract
Poliglicolico collagene acido (PGA-C) tubi sono nervo bioassorbibile riempito con collagene della struttura multicamera, che consistono in pellicole sottili di collagene. Risultati clinici favorevoli sono stati ottenuti quando usando questi tubi per il trattamento del nervo alveolare inferiore danneggiato (IAN). Un fattore critico per la rigenerazione del nervo successo utilizzando tubi di PGA-C è il rifornimento di sangue al tessuto circostante. Blocco ganglio simpatico cervicale (CSGB) crea un blocco simpatico della regione testa e collo, aumentando così il flusso di sangue nella zona. Per garantire un adeguato effetto, il blocco deve essere somministrato con anestetici locali una o due volte al giorno per diverse settimane consecutive; Questo pone una sfida durante la creazione di modelli animali per lo studio di questa tecnica. Per risolvere questa limitazione, abbiamo sviluppato un CSGB indotta da etanolo in un modello canino di lungo termine aumento del flusso sanguigno nella regione orofacciale. Abbiamo esaminato se la rigenerazione di IAN tramite l’impianto di tubo PGA-C può essere rafforzata da questo modello. Quattordici Beagles ciascuno sono stati impiantati con un tubo di PGA-C attraverso un varco di 10 mm a sinistro IAN. IAN si trova all’interno del canale mandibular intorno all’osso, quindi abbiamo scelto la chirurgia piezoelettrica, costituito da onde ultrasoniche, per la lavorazione dell’osso, al fine di ridurre al minimo il rischio di lesioni del nervo e la nave. Con questo approccio è stato ottenuto un buon risultato chirurgico. Una settimana dopo la chirurgia, sette di questi cani sono stati sottoposti a sinistra CSGB tramite l’iniezione di etanolo. CSGB indotta da etanolo è provocato da rigenerazione migliorata del nervo, suggerendo che il flusso sanguigno aumentato efficacemente promuove la rigenerazione del nervo in difetti di IAN. Questo modello canino può contribuire ad approfondire la ricerca sugli effetti a lungo termine di CSGB.
Introduction
In molti casi, la lesione traumatica del nervo alveolare inferiore (IAN) è iatrogena, spesso causato dall’estrazione del terzo molare o il posizionamento di impianti dentali1,2,3. Lesioni dello IAN possono condurre ai deficit in termica e toccare sensazioni così come parestesia, disestesia, ipoestesia e allodinia. Lesione del nervo è trattato non solo tramite la terapia conservatrice, ma anche di altri metodi, compreso la suturazione e posizionamento dell’autoinnesto. Tuttavia, questi metodi sono inconvenienti, che spesso includono la mancanza di miglioramento di sintomo e difetti neurologici al donatore sito4,5,6.
Il nervo artificiale — poliglicolico tubo di acido-collagene (PGA-C) è stato originariamente sviluppato in Giappone. È un tubo bioassorbibile con suo lume interno riempito con un spongiforme collagene7. Negli esperimenti sugli animali, questo tubo è stato usato per migliorare la rigenerazione del nervo in cani di razza beagle con difetto del nervo peroneo ed è stato indicato per promuovere il livello di recupero superiore nervoso autologo trapianto8. L’applicazione clinica del tubo PGA-C ha cominciato nel 2002 in pazienti con lesioni periferiche del nervo. Inoltre, sono stati raggiunti risultati clinici favorevoli nel trattamento della neuropatia del trigeminal (IAN e nervo linguale)9,10,11. Un fattore critico per la rigenerazione del nervo successo utilizzando tubi di PGA-C è il rifornimento di sangue al tessuto circostante8. Blocco ganglio simpatico cervicale (CSGB) crea un blocco simpatico nella regione testa e collo e aumenta il flusso sanguigno ai rispettivi zona innervata12; così, esso è stato utilizzato nel trattamento della sindrome da dolore regionale complesso e insufficienza circolatoria13,14,15. Tuttavia, ci sono stati solo pochi studi sperimentali sull’efficacia di CSGB in crescente sangue flusso16,17. Per garantire un’adeguata efficienza CSGB, il blocco deve essere applicato insieme ad anestetici locali una volta o due volte al giorno per diverse settimane, così che propone una sfida durante la generazione di modelli animali per studiare questa tecnica. Per risolvere questa limitazione, in uno studio precedente, abbiamo sviluppato un modello canino di flusso sanguigno aumentato a lungo termine nella regione orofacciale18. Il modello è stato generato eseguendo un CSGB iniettando etanolo 99,5%. Abbiamo valutato il flusso sanguigno mucoso orale e la temperatura della pelle nasale di flussometria del laser Doppler e termografia ad infrarossi una volta alla settimana per 12 settimane. Abbiamo trovato che il flusso di sangue della regione orofacial è stato aumentato per 7 – 10 settimane in questo modello.
Nello studio presente, abbiamo valutato gli effetti di CSGB indotta da etanolo sulla rigenerazione del nervo.
Il tubo di PGA-C è stato impiantato in cani beagle attraverso un varco di 10 mm a sinistro IAN. Una settimana più tardi, CSGB è stato effettuato iniettando etanolo. Tre mesi dopo la chirurgia, abbiamo effettuato una varietà di studi elettrofisiologici, istologici e morfologici per valutare gli effetti di CSGB sulla rigenerazione del nervo. Forniamo un protocollo dettagliato per la ricostruzione di IAN utilizzando un tubo di PGA-C e CSGB indotta da etanolo.
Protocol
Representative Results
Discussion
Presentiamo un metodo efficiente per la rigenerazione di IAN utilizzando un tubo di nervo bioassorbibile in combinazione con CSGB indotta da etanolo. Per questo studio abbiamo usato i cani, da altri modelli animali, come topi, ratti e conigli, hanno una breve aspettativa di vita e di piccola dimensione corporea e quindi non possono essere utilizzati per eseguire le procedure chirurgiche precise. Come IAN si trova all’interno del canale mandibular intorno all’osso, una tecnica chirurgica è necessaria per evitare danni ai…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Questo lavoro è stato supportato dal dipartimento di organi bioartificiali a Kyoto University Institute per la scienza medica di frontiera. Vorremmo ringraziare il personale veterinario dell’Istituto per la scienza medica di frontiera.
Materials
| NMP Collagen PS | Nippon Meatpackers | 301-84621 | Atelocollagen extracted from young porcine skin by enzyme treatment |
| Surgical clippers | Roboz Surgical Instrument Company | RC-5903 | |
| Disposable scalpel (No.15) | Kai medical | 219ABBZX00073000 | |
| VarioSurg3 | Nakanishi | VS3-LED-HPSC, E1133 | Piezoelectric surgery for bone processing |
| 4-0 nylon sutures | Ethicon | 8881H | |
| 8-0 nylon sutures | Ethicon | 2775G | |
| Isepamicin sulfate | Nichi-Iko | 620005641 | |
| Disposable scalpel (No.10) | Kai medical | 219ABBZX00073000 | |
| 30-gauge needle | Nipro | 1134 | |
| 1-0 absorbable stitches | Ethicon | J347H | |
| 3-0 Nylon stitches | Ethicon | 8872H | |
| Neo Thermo | NEC Avio | TVS-700 | Infrared thermography |
| Neuropack Σ | NIHON KOHDEN | MEB-5504 | Orthodromic recorder for electrophysiological recording |
| Toluidine Blue | Sigma-Aldrich | T3260-5G | |
| Light microscope | Keyence | BZ-9000 | |
| Mouse anti-human neurofilament protein monoclonal antibody | DAKO | N1591 | |
| Polyclonal rabbit anti-S100 antibody | DAKO | Z0311 | |
| Transmission electron microscopy | Hitachi High Technologies | Hitachi H-7000 | |
| Dynamic cell count | Keyence | BZ-H1C | Software for morphological evaluation |
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