Méthodes permettant d’évaluer le rôle de c-Fos et Dusp1 dans la dépendance de l’oncogène

Meenu Kesarwani; Zachary Kincaid; Mohammad Azam

doi:10.3791/58194

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Article de méthode

Méthodes permettant d’évaluer le rôle de c-Fos et Dusp1 dans la dépendance de l’oncogène

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DOI :

10.3791/58194

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7 janvier 2019

Meenu Kesarwani¹ , Zachary Kincaid¹ , Mohammad Azam¹

¹Cancer Blood Disease Institute, Divisions of Experimental Hematology and Cancer Pathology, Cincinnati Children's Hospital Medical Center

Dans cet article

Résumé

Nous décrivons ici les protocoles de validation chimique et génétique de c-Fos et Dusp1 comme cible de drogue dans la leucémie à l’aide de modèles de souris in vitro et in vivo de génétique et humanisé. Cette méthode peut être appliquée à n’importe quelle cible pour la validation génétique et développement thérapeutique.

Résumé

La démonstration des inhibiteurs de tyrosine kinase (utilisation) dans le traitement de la leucémie myéloïde chronique (LMC) a annoncé une nouvelle ère dans la thérapeutique anticancéreuse. Cependant, une petite population de cellules ne répond pas au traitement TKI, entraînant la maladie résiduelle minime (MRD) ; même les plus puissants inhibiteurs fail pour éradiquer ces cellules. Ces cellules MRD servent de réservoir à développer une résistance au traitement. Pourquoi le traitement TKI est inefficace contre les cellules MRD ne connaît pas. Signalisation du facteur de croissance est impliquée dans le soutien à la survie des cellules MRD durant le traitement TKI, mais une interprétation mécaniste fait défaut. Des études récentes ont démontré qu’un élevé de c-Fos et d’expression Dusp1 par suite convergente oncogène et facteur de croissance de signalisation dans les cellules MRD médient résistance TKI. L’inhibition génétique et chimique de c-Fos et Dusp1 rend CML extraordinairement sensible aux inhibiteurs et durcit CML dans les deux modèles de souris génétiques et humanisé. Nous avons identifié ces gènes cibles à l’aide de puces multiples des cellules résistantes et - TKI sensibles. Ici, nous fournissent des méthodes pour la validation de cibles à l’aide de modèles de souris in vitro et in vivo. Ces méthodes peuvent facilement être appliquées à n’importe quelle cible pour la validation génétique et développement thérapeutique.

Introduction

L’activité kinase tyrosine constitutive des oncogènes de fusion BCR-ABL1 provoque CML, qui fournit une justification pour cibler l’activité kinasique de petites molécules inhibitrices. Le succès de l’utilisation dans le traitement des patients atteints de LMC a révolutionné le concept de thérapie ciblée¹^,². Par la suite, la thérapie Anti-kinase comme médicament de précision a été développée pour plusieurs autres tumeurs malignes, y compris les tumeurs solides. Jusqu'à présent, plus de trente inhibiteurs de kinase ont été approuvés par la FDA des État Unis pour le traitement de diverses tumeurs malignes. Alors ....