Creazione dell'anastomosi colica in topi
Summary
Perdita anastomotic o ripartizione dopo la chirurgia è delle principali cause di mortalità e di morbosità postoperatoria. Il nostro studio per la creazione di un’anastomosi colica è un metodo affidabile e riproducibile per studiare i meccanismi di guarigione delle anastomosi.
Abstract
Anastomosi intestinale vengono comunemente eseguite in operazioni emergenti ed elettive. Anche così, perdite anastomotiche sono un altamente temute complicanze della chirurgia colica e possono accadere in fino a 26% delle anastomosi chirurgiche, con mortalità essendo fino al 39% per i pazienti con una perdita di tale. Attualmente, ci rimane una scarsità dei dati dettagliare i meccanismi cellulari di guarigione anastomotiche. Mettendo a punto strategie preventive e le modalità di trattamento per perdita anastomotic potrebbe essere notevolmente rafforzato da una migliore comprensione di guarigione anastomotic appropriato.
Un modello murino è ideale in quanto gli studi precedenti hanno dimostrato che l’anastomosi murino è il più clinicamente simile al caso umano rispetto ad altri modelli animali. Offriamo un modello murino facilmente riproducibile dell’anastomosi colica in topi che permetterà per ulteriore illustrazione di guarigione anastomotiche.
Introduction
Una complicazione altamente temuta di anastomosi chirurgica dell’intestino è anastomotic guasto o perdita. Perdita anastomotic, che provoca la fuoriuscita del contenuto intraluminale nella cavità addominale, è pericolosa e può rapidamente portare a sepsi intra-addominale; prezzo shock varia dallo 0,3% al 5,5% seguendo le anastomosi dell’intestino tenue e salire a tra 0,5% e 26% per anastomosi colica1,2. Tassi di mortalità dopo perdite possono essere alti come 39% a causa della rapida insorgenza di sepsi e progressione veloce a morte dopo contaminazione intra-addominale3. Strategie preventive e modalità di trattamento sono attualmente basate su patofisiologia che completamente non è capito.
Attualmente, guarigione anastomotic è spesso paragonata alla guarigione della ferita cutanea più ampiamente studiati, che sta dimostrando di essere un facsimile relativamente povero. La guarigione si verifica in una serie di fasi sovrapposte, a partire dalla fase iniziale del ritardo. Durante i giorni 0-4 dopo la creazione dell’anastomosi intestinale, la fase di ritardo è definita da una risposta infiammatoria acuta che cancella la ferita di detriti cellulari. Successivamente, nei giorni 3-4, produzione di collagene e proliferazione fibroblastica caratterizza la fase di fibrophasia. Infine, dopo 10 giorni, un periodo prolungato di rimodellamento del collagene è conosciuto come la fase di maturazione. È importante notare che forza anastomotic è piuttosto bassa e dipende dal sostegno estrinseco delle graffette chirurgicamente posizionati o suturare fino a quando il collagene è depositato4. Comprensione del ruolo e tempistica ogni strato della parete intestinale svolge nella cicatrizzazione anastomotica e il coinvolgimento in tipi di cellule infiammatorie-mediata come macrofagi, nonché illuminante markers surrogati per predire guasto anastomotic o successo potrebbe ridurre notevolmente la morbilità, la mortalità e la spesa sanitaria seguendo colon operazioni5.
Il modello murino è stato indicato negli studi precedenti l’utile in che imita l’anastomosi umano6. Mentre ci sono esempi popolari, provati e ben studiati il modello murino di anastomosi colica, particolarmente il metodo descritto da Komen et al. 7, questi modelli favoriscono ileocecale o ascendente colocolonic anastomotico tecniche8. Gli studi precedenti dei pazienti umani hanno dimostrato significative differenze nei tassi di perdita ileocecal, colocolonic e anastomosi colorettale, evidenziando la necessità di ulteriori modelli sperimentali a diverse posizioni anatomiche. Ulteriori metodi comunemente utilizzati sono finalizzati allo sviluppo di un modello che crea volutamente una perdita anastomotic anziché delucidare i meccanismi cellulari necessari per la normale cicatrizzazione anastomotica di9. Modelli del ratto sono state tentate in passato ma hanno tassi di deiscenza anastomotica e/o segni di perdita (cioè, la formazione di ascesso) significativamente più bassa di esseri umani e topi6,7. Inoltre, sono disponibili in topi che i ratti più geneticamente linee sperimentali. Questo rende meno utile per un modello anastomotic modello del ratto. Inoltre, suini e canini modelli hanno avuto meno clinico indagine rispetto al modello murino6,7.
Vi proponiamo una procedura sicura, tecnicamente semplice e rapidamente e facilmente riproducibile per la creazione di anastomosi coliche in un modello murino che dovrebbero facilitare l’indagine successiva nel meccanismo underreported della ferita anastomotic guarigione10 .
Protocol
Representative Results
Discussion
Ci sono diversi passaggi chiave per garantire il successo di e ridurre al minimo la morbilità/mortalità connessa con questa procedura. In primo luogo, garantire la gestione attenta del tessuto intestinale e fare attenzione a evitare lesioni di trazione durante la rotazione i visceri per esporre i due punti. Indebita tensione dell’intestino o mesentere possibile ferita la necrosi intestinale intestinale o il sistema vascolare e causa lontano dal sito dell’anastomosi. Inoltre, pinze taglienti o forcipe con denti non deve…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Nessuno
Materials
| C57BL6/J mice | Jackson Labs | #00664 | |
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharma Inc | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Chloraprep Shampoo | Medline | APL82287 | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37 °C prior to use |
| 10 ml syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle | Henry Schein | 6546037 | |
| Blue monofilament suture 24” BV-1 needle | Henry Schein | 8305H | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". | Cole- Parmer | EW-10818-06 | |
| Medline Sterile lubricating jelly | Medline | MDS032273H |
References
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