小鼠结肠吻合术的建立
Summary
手术后吻合口泄漏或破裂是术后发病和死亡的主要原因。我们的手术创建结肠吻合术是一个可靠和可重复的方法, 研究吻合术的愈合机制。
Abstract
肠道吻合术通常在选择性和急诊手术中进行。即使如此, 吻合口泄漏是结肠手术中非常可怕的并发症, 可发生在多达26% 的手术吻合口, 此类口漏患者的死亡率高达39%。目前, 仍然缺乏详细说明吻合血管愈合细胞机制的数据。通过更好地了解适当的吻合口愈合, 可以大大加强吻合口泄漏的预防策略和治疗方式。
小鼠模型是理想的, 因为此前的研究表明, 与其他动物模型相比, 小鼠吻合术在临床上与人类的情况最相似。我们提供了一个易于重现的小鼠结肠吻合术模型, 这将允许进一步说明吻合口愈合。
Introduction
一个非常可怕的并发症的手术吻合的肠道是吻合破裂或泄漏。吻合口泄漏, 导致腔内物质溢出到腹腔, 有生命危险, 可迅速导致腹腔内败血症;小肠吻合术后的休克率从0.3% 到5.5% 不等, 结肠吻合术的休克率上升到0.5% 至26% 之间。由于败血症迅速发作, 腹部内污染3后迅速上升至死亡, 泄漏后的死亡率可能高达 39%.预防策略和治疗方式目前是建立在病理生理学的基础上的, 而病理生理学并没有得到充分的了解。
目前, 吻合口愈合往往被比作更广泛研究的皮肤伤口愈合, 这被证明是一个相对较差的传真。愈合发生在一系列重叠阶段, 从初始滞后阶段开始。在肠道吻合术产生后的0-4 天, 滞后期的定义是急性炎症反应, 清除细胞碎片的伤口。接下来, 在3-4天的时间里, 成纤维细胞的增殖和胶原蛋白的产生是成纤维相的典型。最后, 在第10天之后, 长时间的胶原蛋白重塑被称为成熟阶段。重要的是要注意, 吻合口的强度是相当低的, 取决于手术放置的订书针或缝合线的外在支持, 直到胶原蛋白沉积4。了解肠壁每一层在吻合伤口愈合和参与炎症介导的细胞类型 (如巨噬细胞) 中的作用和时间, 以及阐明替代标记以预测吻合失败或成功的情况。大幅降低结肠手术后的发病率、死亡率和医疗费用5。
在以前的研究中, 小鼠模型被证明是模拟人类吻合术的有用方法。虽然有流行的、经过验证的和经过充分研究的小鼠结肠吻合模型的例子, 特别是科明等人描述的方法.7、这些模型有利于回肠或上升的结肠吻合术技术 8。以前对人类患者的研究表明, 回肠、结肠结肠和结直肠吻合的泄漏率存在显著差异, 这突出表明需要在不同的解剖位置建立更多的实验模型。另外, 常用的方法旨在开发一个模型, 故意造成吻合口泄漏, 而不是阐明正常吻合伤口愈合所需的细胞机制9。老鼠模型曾尝试过, 但吻合口裂开的比率和/或泄漏的迹象 (即脓肿形成) 明显低于人类和小鼠6,7。此外, 小鼠的转基因实验线比老鼠多。这使得大鼠模型对吻合模型不太有用。此外, 猪和犬模型的临床调查也比6、7 型少。
我们提出了一个安全的, 技术上简单, 容易和快速可重复的程序, 以创建结肠吻合在一个小鼠模型, 这将有助于进一步调查未报告的机制吻合伤口愈合10.
Protocol
Representative Results
Discussion
有几个关键的步骤, 以确保成功, 并最大限度地减少与此程序相关的疾病死亡率。首先, 确保仔细处理肠道组织, 并注意防止牵引损伤时旋转内脏, 以暴露结肠。肠道或肠系膜上的不适当张力会损害肠道或血管, 并导致肠坏死远离吻合部位。此外, 不应使用锋利的钳子或带牙齿的钳子来处理肠道。
与计划吻合部位分开的肠道损伤, 无论是在内脏旋转过程中, 还是通过钝探针穿孔, 都…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
没有
Materials
| C57BL6/J mice | Jackson Labs | #00664 | |
| Fisherbrand Absorbent Underpads, 20" x 24" | Fisher Scientific | 14-206-62 | |
| Polylined Sterile Field, 18" x 24" | Busse Hospital Disposables | 696 | Cut a rectangular hole |
| Isothesia isoflurane | Henry Schein | 50033 | |
| Fisherbrand Sterile cotton gauze pad, 4" x 4" | Fisher Scientific | 22-415-469 | |
| Puralube petrolatum ophthalmic ointment, 1/8 oz. tube | Dechra Veterinary Products | NDC 17033-211-38 | |
| Nair depilatory cream | Church & Dwight Co. | 22339-05 | |
| Buprenex buprenorphine 0.3 mg/ml | Reckitt Benckiser Pharma Inc | NDC 12496-0757-5 | |
| 1 cc insulin syringe, 27 G | Becton Dickinson | 329412 | |
| Chloraprep Shampoo | Medline | APL82287 | |
| Webcol alcohol prep swabs | Covidien | 6818 | |
| BioGel PI surgical gloves | Mölnlycke Health Care | ALA42675Z | |
| Micro Forceps with teeth | Roboz | RS-5150 | |
| Fine scissors- sharp | Fine Science Tools | 14060-09 | |
| Straight serrated forceps | Fine Science Tools | 11050-10 | |
| Castro-Viejo needle driver | Fine Science Tools | 12565-14 | |
| 0.9% Sodium Chloride Irrigation | Baxter | BHL2F7121 | Warm to 37 °C prior to use |
| 10 ml syringe | Becton Dickinson | 309604 | |
| 4-0 Vicryl absorbable braided suture, 18", PS-2 needle | Henry Schein | 6546037 | |
| Blue monofilament suture 24” BV-1 needle | Henry Schein | 8305H | Usually comes double-armed. Cut the suture at the midway point to generate two usable sutures. |
| Cole-Parmer Microscissors, Standard Grade, Straight, 4". | Cole- Parmer | EW-10818-06 | |
| Medline Sterile lubricating jelly | Medline | MDS032273H |
References
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