Extraction et analyse des taïwanaise Propolis verte
Summary
Nous présentons un protocole pour l’utilisation de l’éthanol comme solvant d’extraire et de caractériser la propolis verte taïwanaise qui présente une activité antibactérienne.
Abstract
Taïwanaise propolis verte est riche en flavonoïdes prénylés et présente un large éventail d’activités biologiques, comme antioxydant, antibactérien et les anticancéreux. Les composés bioactifs de propolis verte taïwanaise sont propolins, à savoir C, D, F et G. La concentration de propolins dans la propolis verte taïwanaise varie selon la saison et la localisation géographique. Ainsi, il est essentiel d’établir une procédure standard et reproductible pour la détermination de la qualité de la propolis verte taïwanaise. Nous présentons ici un protocole qui utilise l’extraction à base d’éthanol, chromatographie liquide à haute performance et une analyse de l’activité antibactérienne pour caractériser la qualité de la propolis verte taïwanais. Cette méthode indique que 95 % et 99,5 % des extractions de l’éthanol atteignent les rendements en matière sèche maximale de la propolis verte taïwanaise, réduisant ainsi aux plus fortes concentrations de propolins qui ont des propriétés antibactériennes. Selon ces résultats, le présent protocole est réputé fiable et reproductible pour la détermination de la qualité de la propolis verte taïwanaise.
Introduction
La propolis est un mélange de résineux naturel produit par l’espèce d’abeille Apis mellifera. La propolis a été largement utilisée depuis l’antiquité en médecine folklorique. Une étude a récemment rapporté que la propolis est bénéfique pour prévenir les infections microbiennes et inflammation1. De nombreuses études ont démontré que les principaux composés bioactifs dans la propolis sont des flavonoïdes, des esters de l’acide phénoliques, prénylés p-coumarique acides et diterpenic acides2,3. A ce jour, 10 dérivés de flavanone prénylés de propolis verte taïwanaise ont été identifiés par chromatographie liquide à haute performance (HPLC)4,5,6,7. Les plus abondantes parmi ceux-ci sont propolins C, D, F et G5,7. Les effets biologiques considérables de propolis verte taïwanaise sont corrélés avec sa haute teneur de propolins8.
Les concentrations de composés bioactifs dans la propolis varient considérablement selon la saison et l’emplacement géographique d’où provient la propolis. La propolis européenne contient essentiellement des flavonoïdes aglycone et phénoliques acides9. Les principaux composés bioactifs dans la propolis du Brésil sont prénylés p-coumarique acides, tels qu’artepillin C10. Une étude a démontré que la saison est un facteur essentiel pour déterminer la teneur totale propolin taïwanais propolis verte11. Le contenu de propolin en taïwanais propolis verte est plus élevé en été (mai – juillet) et plus faible en hiver11. La propriété antibactérienne de la propolis a été considérée comme un indicateur de l’activité biologique. En général, les échantillons de la propolis provenant de diverses régions ont manifesté une propriété antibactérienne similaire ; par exemple, il est généralement efficace contre presque toutes les bactéries gram-positives et présente un effet antibactérien limité contre les bactéries gram-négatives10,12,13. Ont démontré que des interactions synergiques entre les flavonoïdes contenus dans la propolis ont un effet antibactérien14. De même, la propolis verte taïwanaise aurait ont un effet antimicrobien contre les bactéries gram-positives,15. En outre, une étude a également un effet antimicrobien de l’interaction de propolins en taïwanais propolis verte8.
La caractérisation des composés bioactifs dans la propolis est difficile parce que sa composition chimique peut varier selon sa source d’origine. Par conséquent, il est nécessaire d’établir une méthode faisable et reproductible pour la détermination de la qualité de la propolis verte taïwanaise. Cependant, aucune procédure standard n’a été établi pour l’extraction de la propolis verte taïwanais et analyse fonctionnelle. Plusieurs méthodes s’appliquant indifféremment des solvants organiques et inorganiques ont été proposées pour la propolis extraction16,17,18,19,20. Parce que la propolis est un mélange lipophile, les études ont démontré que l’extraction organique est mieux qu’extraction inorganiques8,18,19. La concentration totale propolin taïwanaise propolis verte et ses propriétés antibactériennes sont des indicateurs clés de la qualité de la propolis verte taïwanaise. Ainsi, le but de cette étude est de présenter un protocole pour l’utilisation d’éthanol comme solvant d’extraire et de caractériser les propriétés antibactériennes de propolis verte taïwanaise.
Protocol
Representative Results
Discussion
Une étude a rapporté que macération, avec différentes concentrations d’éthanol, pourrait servir pour l’ extraction de la propolis brésilienne17; Toutefois, le processus était long17. Il a fallu au moins 10 jours pour extraire les composés bioactifs, comme la teneur en composés phénoliques, de propolis brésilienne17. Par ailleurs, extraction de l’éthanol en combinaison avec chauffage à 37 ° C, 50 ° C ou 70 ° C pendant 30 min a ét?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Ce manuscrit a été édité par Wallace édition académique.
Materials
| ethanol | Sigma-Aldrich | E7023 | |
| Whatman no. 4 filter paper | Sigma-Aldrich | WHA1004125 | |
| methanol | Sigma-Aldrich | 34860 | |
| reverse phase RP-18 column | Phenomenex Inc. | 00G-0234-E0 | |
| Staphylococcus aureus | ATCC | BCRC 10780 | |
| Escherichia coli | ATCC | BCRC 10675 | |
| tryptic soy broth | Sigma-Aldrich | 22092 | |
| nutrient broth | Sigma-Aldrich | 70122 | |
| dimethyl sulfoxide | Sigma-Aldrich | D2650 | |
| spice grinder | Waring | WSG60K | |
| microplate Reader | Molecular Devices | EMAX PLUS | |
| HPLC system | Agilent | 1200 Series | |
| vacuum evaporation | BÜCHI | Rotavapor R-215 |
References
- Zabaiou, N., et al. Biological properties of propolis extracts: Something new from an ancient product. Chemistry and Physics of Lipids. 207 (Pt B), 214-222 (2017).
- Bankova, V. B., De Castro, S. L., Marcucci, M. C. Propolis: Recent advances in chemistry and plant origin. Apidologie. 31 (1), 3-15 (2000).
- Park, Y. K., Alencar, S. M., Aguiar, C. L. Botanical origin and chemical composition of Brazilian propolis. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50 (9), 2502-2506 (2002).
- Chen, C. N., Wu, C. L., Shy, H. S., Lin, J. K. Cytotoxic prenylflavanones from Taiwanese propolis. Journal of Natural Products. 66 (4), 503-506 (2003).
- Chen, C. N., Weng, M. S., Wu, C. L., Lin, J. K. Comparison of radical scavenging activity, cytotoxic effects and apoptosis induction in human melanoma cells by Taiwanese propolis from different sources. Evidence-Based Complementary and Alternative. 1 (2), 175-185 (2004).
- Chen, C. N., Wu, C. L., Lin, J. K. Apoptosis of human melanoma cells induced by the novel compounds propolin A and propolin B from Taiwanese propolis. Cancer Letters. 24 (1-2), 218-231 (2007).
- Huang, W. J., et al. Propolin G, a prenylflavanone, isolated from Taiwanese propolis, induces caspase-dependent apoptosis in brain cancer cells. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 55 (18), 7366-7376 (2007).
- Chen, Y. W., Ye, S. R., Ting, C., Yu, Y. H. Antibacterial activity of propolins from Taiwanese green propolis. Journal of Food and Drug Analysis. 26 (2), 761-768 (2018).
- Hegazi, A. G., Abd El Hady, F. K., Abd Allah, F. A. M. Chemical composition and antimicrobial activity of European propolis. Zeitschrift für Naturforschung. 55 (1-2), 70-75 (2000).
- Sforcin, J. M., Fernandes, A., Lopes, C. A. M., Bankova, V., Funari, S. R. C. Seasonal effect on Brazilian propolis antibacterial activity. Journal of Ethnopharmacology. 73 (1-2), 243-249 (2000).
- Chen, Y. W., et al. Characterization of Taiwanese propolis collected from different locations and seasons. Journal of the Science of Food and Agriculture. 88 (3), 412-419 (2008).
- Grange, J. M., Davey, R. W. Antibacterial properties of propolis (bee glue). Journal of the Royal Society of Medicine. 83 (3), 159-160 (1990).
- Kujumgiev, A., et al. Antibacterial, antifungal and antiviral activity of propolis from different geographic origins. Journal of Ethnopharmacology. 64 (3), 235-240 (1999).
- Krol, W., Scheller, S., Shani, J., Pietsz, G., Czuba, Z. Synergistic effect of ethanol extract of propolis and antibiotics in the growth of Staphylococcus aureus. Drug Research. 43 (5), 607-609 (1993).
- Lu, L. C., Chen, Y. W., Chou, C. C. Antibacterial and DPPH free radical-scavenging activities of the ethanol extract of propolis collected in Taiwan. Journal of Food and Drug Analysis. 11 (4), 277-282 (2003).
- Tosi, B., Donini, A., Romagnoli, C., Bruni, A. Antimicrobial activity of some commercial extracts of propolis prepared with different solvents. Phytotherapy Research. 10 (4), 335-336 (1996).
- Cunha, I. B. S., et al. Factors that influence the yield and composition of Brazilian propolis extracts. Journal of the Brazilian Chemical Society. 15 (6), 964-970 (2004).
- Woo, S. O., Hong, I. P., Han, S. M. Extraction properties of propolis with ethanol concentration. Journal of Apicultural Research. 30 (3), 211-216 (2015).
- Park, Y. K., Ikegaki, M. Preparation of water and ethanolic extracts of propolis and evaluation of the preparations. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 62 (11), 2230-2232 (1998).
- Ramanauskienė, K., Inkėnienė, A. M. Propolis oil extract: quality analysis and evaluation of its antimicrobial activity. Natural Product Research. 25 (15), 1463-1468 (2011).
- Machado, B. A., et al. Chemical composition and biological activity of extracts obtained by supercritical extraction and ethanolic extraction of brown, green and red propolis derived from different geographic regions in brazil. PLoS One. 11 (1), e0145954 (2016).
- Monroy, Y. M., et al. Brazilian green propolis extracts obtained by conventional processes and by processes at high pressure with supercritical carbon dioxide, ethanol and water. The Journal of Supercritical Fluids. 130, 189-197 (2017).
- Popova, M., Chen, C. N., Chen, P. Y., Huang, C. Y., Bankova, V. A validated spectrophotometric method for quantification of prenylated flavanones in pacific propolis from Taiwan. Phytochemical Analysis. 21 (2), 186-191 (2010).
- Chen, L. H., et al. Taiwanese green propolis ethanol extract delays the progression of type 2 diabetes mellitus in rats treated with streptozotocin/high-fat diet. Nutrients. 10 (4), e503 (2018).
