Извлечение и анализ тайваньского зеленый прополиса
Summary
Мы представляем протокол для использования этанола в качестве растворителя для извлечения и характеризуют Тайваньская зеленый прополис обладает антибактериальной активностью.
Abstract
Тайваньская зеленый Прополис богат prenylated флавоноиды и экспонаты широкий спектр биологических мероприятий, таких как антиоксидант, антибактериальные и противораковых те. Биоактивных соединений Тайваньская зеленый прополиса являются propolins, а именно C, D, F и G. Концентрация propolins в тайваньской зеленый Прополис варьируется в зависимости от сезона и географического расположения. Таким образом крайне важно для установления стандартной процедуры для определения качества Тайваньская зеленый прополиса. Здесь мы представляем протокол, использующий добычи на основе этанола, высокой производительности жидкостной хроматографии и анализ антибактериальной активности для характеристики качества Тайваньская зеленый прополис. Этот метод показывает, что 95% и 99,5% этанола извлечений добиться максимальной сухого вещества урожайности от тайваньской зеленый прополис, тем самым давая самые высокие концентрации propolins, имеют антибактериальные свойства. Согласно этим выводам настоящий Протокол считается надежные и повторяемые для определения качества Тайваньская зеленый прополиса.
Introduction
Прополис представляет собой естественный смолистый смесь, производимые виды пчела Apis mellifera. Прополис широко использовался с древних времен в народных лекарственных средств. Исследования недавно сообщили, что прополис является полезным для предотвращения микробной инфекции и воспаления1. Многочисленные исследования показали, что основными биологически активных соединений в прополис являются флавоноиды, фенольные кислоты эфиры, prenylated p-кумариновая кислоты и diterpenic кислоты2,3. На сегодняшний день, были определены 10 prenylated флаванонов производные от тайваньской зеленый Прополис через высокой производительности жидкостной хроматографии (ВЭЖХ)4,5,6,7. Наиболее распространенными среди них являются propolins C, D, F и G5,7. Значительные биологические эффекты Тайваньская зеленый Прополис коррелируют с его высоким содержанием propolins8.
Концентрации биологически активных соединений в прополис различаются в зависимости от сезона и географического расположения, из которого получается прополиса. Европейский Прополис содержит главным образом флавоноид aglycone и фенольные кислоты9. Основными биологически активных соединений в прополис из Бразилии, prenylated p-кумариновая кислоты, такие как artepillin C10. Исследование показало, что сезон является критическим фактором для определения содержания всего propolin в тайваньской зеленый Прополис11. Содержание propolin в тайваньской зеленый Прополис является высоким в летнее время (Май – Июль) и низких в зима11. Антибактериальные свойства прополиса было широко считается показателем биологической активности. Как правило образцы прополис, собранных из различных регионов продемонстрировали аналогичные антибактериальные свойства; Например он обычно эффективен в отношении почти всех грамотрицательных бактерий и выставок ограниченное антибактериальный эффект против грамотрицательных бактерий10,12,13. Чтобы иметь антибактериальный эффект14были продемонстрированы синергического взаимодействия между флавоноиды в прополис. Аналогичным образом Тайваньская зеленый прополисом было сообщено иметь Антимикробный эффект против грамположительных бактерий15. Кроме того исследование также выявило Антимикробный эффект от взаимодействия propolins в тайваньской зеленый Прополис8.
Характеристика биологически активных соединений в прополис трудно, потому что его химический состав могут варьироваться в соответствии его источник происхождения. Таким образом необходимо установить осуществимым и повторяемые метод для определения качества Тайваньская зеленый прополиса. Однако стандартная процедура не была создана для извлечения Тайваньская зеленый прополис и последующих функционального анализа. Были предложены несколько методов, которые разнообразно применение органических и неорганических растворителей для Прополис извлечения16,,1718,19,20. Потому что прополис является смесью липофильных, исследования показали, что органические извлечения лучше чем неорганических извлечения8,18,19. Общая propolin концентрация в тайваньской зеленый прополис и его антибактериальные свойства являются ключевыми показателями качества Тайваньская зеленый прополиса. Таким образом цель настоящего исследования – представить протокол для использования этанола в качестве растворителя для извлечения и характеризуют антибактериальные свойства Тайваньская зеленый прополис.
Protocol
Representative Results
Discussion
Исследования сообщили, что мацерации, используя различные концентрации этанола, могут использоваться для извлечения бразильский Прополис17; Однако этот процесс был длительным17. Он взял по крайней мере 10 дней для извлечения биологически активных соединений, н?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
Этот манускрипт был отредактирован Уоллес академических редактирования.
Materials
| ethanol | Sigma-Aldrich | E7023 | |
| Whatman no. 4 filter paper | Sigma-Aldrich | WHA1004125 | |
| methanol | Sigma-Aldrich | 34860 | |
| reverse phase RP-18 column | Phenomenex Inc. | 00G-0234-E0 | |
| Staphylococcus aureus | ATCC | BCRC 10780 | |
| Escherichia coli | ATCC | BCRC 10675 | |
| tryptic soy broth | Sigma-Aldrich | 22092 | |
| nutrient broth | Sigma-Aldrich | 70122 | |
| dimethyl sulfoxide | Sigma-Aldrich | D2650 | |
| spice grinder | Waring | WSG60K | |
| microplate Reader | Molecular Devices | EMAX PLUS | |
| HPLC system | Agilent | 1200 Series | |
| vacuum evaporation | BÜCHI | Rotavapor R-215 |
References
- Zabaiou, N., et al. Biological properties of propolis extracts: Something new from an ancient product. Chemistry and Physics of Lipids. 207 (Pt B), 214-222 (2017).
- Bankova, V. B., De Castro, S. L., Marcucci, M. C. Propolis: Recent advances in chemistry and plant origin. Apidologie. 31 (1), 3-15 (2000).
- Park, Y. K., Alencar, S. M., Aguiar, C. L. Botanical origin and chemical composition of Brazilian propolis. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 50 (9), 2502-2506 (2002).
- Chen, C. N., Wu, C. L., Shy, H. S., Lin, J. K. Cytotoxic prenylflavanones from Taiwanese propolis. Journal of Natural Products. 66 (4), 503-506 (2003).
- Chen, C. N., Weng, M. S., Wu, C. L., Lin, J. K. Comparison of radical scavenging activity, cytotoxic effects and apoptosis induction in human melanoma cells by Taiwanese propolis from different sources. Evidence-Based Complementary and Alternative. 1 (2), 175-185 (2004).
- Chen, C. N., Wu, C. L., Lin, J. K. Apoptosis of human melanoma cells induced by the novel compounds propolin A and propolin B from Taiwanese propolis. Cancer Letters. 24 (1-2), 218-231 (2007).
- Huang, W. J., et al. Propolin G, a prenylflavanone, isolated from Taiwanese propolis, induces caspase-dependent apoptosis in brain cancer cells. Journal of Agricultural and Food Chemistry. 55 (18), 7366-7376 (2007).
- Chen, Y. W., Ye, S. R., Ting, C., Yu, Y. H. Antibacterial activity of propolins from Taiwanese green propolis. Journal of Food and Drug Analysis. 26 (2), 761-768 (2018).
- Hegazi, A. G., Abd El Hady, F. K., Abd Allah, F. A. M. Chemical composition and antimicrobial activity of European propolis. Zeitschrift für Naturforschung. 55 (1-2), 70-75 (2000).
- Sforcin, J. M., Fernandes, A., Lopes, C. A. M., Bankova, V., Funari, S. R. C. Seasonal effect on Brazilian propolis antibacterial activity. Journal of Ethnopharmacology. 73 (1-2), 243-249 (2000).
- Chen, Y. W., et al. Characterization of Taiwanese propolis collected from different locations and seasons. Journal of the Science of Food and Agriculture. 88 (3), 412-419 (2008).
- Grange, J. M., Davey, R. W. Antibacterial properties of propolis (bee glue). Journal of the Royal Society of Medicine. 83 (3), 159-160 (1990).
- Kujumgiev, A., et al. Antibacterial, antifungal and antiviral activity of propolis from different geographic origins. Journal of Ethnopharmacology. 64 (3), 235-240 (1999).
- Krol, W., Scheller, S., Shani, J., Pietsz, G., Czuba, Z. Synergistic effect of ethanol extract of propolis and antibiotics in the growth of Staphylococcus aureus. Drug Research. 43 (5), 607-609 (1993).
- Lu, L. C., Chen, Y. W., Chou, C. C. Antibacterial and DPPH free radical-scavenging activities of the ethanol extract of propolis collected in Taiwan. Journal of Food and Drug Analysis. 11 (4), 277-282 (2003).
- Tosi, B., Donini, A., Romagnoli, C., Bruni, A. Antimicrobial activity of some commercial extracts of propolis prepared with different solvents. Phytotherapy Research. 10 (4), 335-336 (1996).
- Cunha, I. B. S., et al. Factors that influence the yield and composition of Brazilian propolis extracts. Journal of the Brazilian Chemical Society. 15 (6), 964-970 (2004).
- Woo, S. O., Hong, I. P., Han, S. M. Extraction properties of propolis with ethanol concentration. Journal of Apicultural Research. 30 (3), 211-216 (2015).
- Park, Y. K., Ikegaki, M. Preparation of water and ethanolic extracts of propolis and evaluation of the preparations. Bioscience, Biotechnology, and Biochemistry. 62 (11), 2230-2232 (1998).
- Ramanauskienė, K., Inkėnienė, A. M. Propolis oil extract: quality analysis and evaluation of its antimicrobial activity. Natural Product Research. 25 (15), 1463-1468 (2011).
- Machado, B. A., et al. Chemical composition and biological activity of extracts obtained by supercritical extraction and ethanolic extraction of brown, green and red propolis derived from different geographic regions in brazil. PLoS One. 11 (1), e0145954 (2016).
- Monroy, Y. M., et al. Brazilian green propolis extracts obtained by conventional processes and by processes at high pressure with supercritical carbon dioxide, ethanol and water. The Journal of Supercritical Fluids. 130, 189-197 (2017).
- Popova, M., Chen, C. N., Chen, P. Y., Huang, C. Y., Bankova, V. A validated spectrophotometric method for quantification of prenylated flavanones in pacific propolis from Taiwan. Phytochemical Analysis. 21 (2), 186-191 (2010).
- Chen, L. H., et al. Taiwanese green propolis ethanol extract delays the progression of type 2 diabetes mellitus in rats treated with streptozotocin/high-fat diet. Nutrients. 10 (4), e503 (2018).
