Venstre Atrial stenose indusert lunge venøse Arterialization og gruppe 2 pulmonal hypertensjon i rotte

Summary

Venstre atrial stenose (LAS) er en roman kirurgisk teknikk som brukes for å studere gruppe 2 pulmonal hypertensjon (PH) og mekanismene bak lunge venøse arterialization. Her presenterer vi en protokoll for constrict venstre atrium med en Titan klipp å forårsake lunge venøse arterialization og moderat PH i rotte.

Abstract

Mekanismen for mitral stenose-indusert lunge venøse arterialization og gruppe 2 pulmonal hypertensjon (PH) er uklart. Det er ingen gnager modell av gruppe 2 PH, på grunn av mitral stenose (MS), å lette etterforskningen av sykdom mekanismer og potensielle strategier. Vi presenterer en ny rotte modell av lunge venøs overbelastning-indusert lunge venøse arterialization og gruppe 2 PH forårsaket av venstre atrial stenose (LAS). LAS oppnås ved constricting venstre atrium med en halv-lukkede Titan klipp. Etter LAS kirurgi, utvikler en rotte modell med en transmitral tilsig hastighet større enn eller lik 2.0 m/s på echocardiography gradvis lunge venøse arterialization og gruppe 2 PH over en 8 – til 10-ukers periode. I denne protokollen gir vi fremgangsmåte for hvordan du utfører LAS kirurgi. Presentert LAS rotte modell etterligner MS hos mennesker og er nyttig for studerer underliggende molekylær mekanisme lunge venøse arterialization og prekliniske evalueringen av terapi for gruppe 2 PH.

Introduction

Formålet med denne artikkelen er å vise den trinnvis fremgangsmåten for hvordan du utfører LAS kirurgi i rotter. Kirurgisk indusert LAS nærmere etterligner MS og triatriatum hos mennesker, som involverer etableringen av en mekanisk hindringer i venstre atrium¹. Obstruksjon av venstre ventrikkel (LV) tilsig ofte forårsaker en opphopning av lunge venøs sirkulasjon, og pasienter utvikle gradvis PH. Verdens helseorganisasjon klassifiserer PH på grunn av venstre hjertesykdommer som gruppe 2, som er mest utbredt gruppe PH^2,3,4. Diagnostisering av PH hos pasienter med venstre hjertesykdommer er forbundet med en større enn en sevenfold økning i 1 år standardisert dødelighet⁴. Det er for øyeblikket ingen godkjent terapi for gruppe 2 PH fra behandle de underliggende igjen hjerte sykdommer (f.ekskirurgisk erstatter stenotic Mitralklaff). Men løser selv effektiv mitral ventil erstatning ikke PH fullt i opptil halvparten av pasientene med MS⁵. Denne vedvarende PH er ugunstig lunge vaskulær remodeling, som er dårlig forstått. Derfor dyremodeller er viktig å styrke vår forståelse av underliggende molekylære mekanismer av ugunstige lunge vaskulær remodeling i gruppe 2 PH.

Det er noen dyr modeller gruppe 2 pH koronar ligation^6,7 tverrgående aorta striper^8,9,10 i gnagere er mest brukte gruppe 2 PH dyremodeller. Den store ulempen med disse modellene er involvering av LV, noe som gjør utfallet av gruppe 2 PH studier vanskelige å tolke. I kontrast, forblir LV intakt i LAS modellen. Videre er LAS modellen klinisk relevant fordi det resulterer i langsom og progressiv utvikling av PH over en 10-ukers periode¹¹. I mennesker som MS betydelig hvis transmitral Doppler flyten hastighet er større enn 2,0 m/s¹¹, og vi også bruke dette nummeret som en cut-off for å avgjøre om LAS operasjonen har produsert betydelig stenose. Videre, selv om LAS modellen genererer mild eller moderat PH, viser karakteristiske histologic endringer, ligner i menneskelige pasienter, nemlig utviklingen av intrapulmonary venøse arterialization¹¹. LAS rotte modellen er en roman og klinisk relevante gruppe 2 PH modell med bevarte LV-funksjonen. Det er egnet for å studere i Patofysiologien ved vedvarende lunge vaskulær remodeling, identifisere molekylære mål og testing romanen terapi for gruppe 2 PH.

Protocol

LAS eksperimentelle protokollen er godkjent av Jikei universitet skolen av medisin dyr omsorg komiteen og universitet forskning og etikk (protocol #2015-118). 1. pre-operative forberedelse Etter ankomst på dyr anlegget, gi 5-uke-gamle Sprague Dawley hannrotter mellom 150 til 200 g med 1 uke acclimate til sitt nye hjem før operasjonen. Klargjør følgende utstyr før operasjonen ved autoklavering: 1) en liten dyr respirator, 2) en anesthetic maskin, 3) en intubasjon kit (b…

Representative Results

Effektiviteten av LAS bekreftes med echocardiography, 2 uker postoperativ. Rotter med en LV tilsig hastighet større enn 2,0 m/s, målt med fire-kammer utsikt, regnes har utviklet betydelige stenose (figur 1) og pålitelig utvikle moderat PH og lunge venøse arterialization 8-10 uker etter LAS kirurgi. Ti uker etter LAS kirurgi, rotter i gruppen LAS Vis venstre atrial utvidelse (<strong class="xfig"…

Discussion

LAS rotta er en roman gruppe 2 PH modell har allerede fått betydelig interesse fra forskere i feltet^12,13. Sammenligne de to eksisterende gruppe 2 modellene, nemlig den pulmonary blodåre stenose (PV) model¹⁴, grisunger og supracoronary aorta striper (SAB) rotte modell^8,har^9,10, LAS rotte modell flere fordeler. Sammenlignet med PVS piglet modelle…

Materials

5-0 Prolene Suture	Johnson & Johnson – Ethicon	8725H	Polypropylene suture with HEMO-SEAL Technology
Anaesthesia Machine	Wakenyaku Co., Ltd.	BRTK-100A	Air pump and anaethesia machine
Angiocatheter guidewire	Self-made		10 cm guidewire glued to a 1 cc syringe
Chest retractor	Natsume Seisakusho Co., Ltd.	F-2
Chest tube 23G	Self-made		10 cc syringe attached to a 23G needle plus plastic tube
Curved forceps	Natsume Seisakusho Co., Ltd.	A-14
Heating pad	Vivaria	MP-916-NV	Keep body temperature at 37 degree celsius
Horizon Ligating Clips	Teleflex	REF 003200	Size Medium-Large
Horizon Manual-Load Ligating Clip Applier For Medium-Large Size Horizon	Teleflex	REF 337085	Ligation Clips Angled Jaw, (20cm)
Needle holder	Natsume Seisakusho Co., Ltd.	MC-40
Rodent Respirator	CWE Inc	SAR-830/P	Small animal ventilator
Scissors	Natsume Seisakusho Co., Ltd.	B-12	Straight scissors ideally with round tips
Straight forceps	Natsume Seisakusho Co., Ltd.	A-7
Tongue depressor	Uchida Yoko Co., Ltd.	8-615-2417	Use the wide end