एक्सोनल अवरोध और उत्थान का अध्ययन करने के लिए चूहा मॉडल में चेहरे तंत्रिका सर्जरी
Summary
यह प्रोटोकॉल चूहे के मॉडल में चेहरे की तंत्रिका सर्जरी के लिए एक प्रजनन दृष्टिकोण का वर्णन करता है, जिसमें चोट के विभिन्न उत्कर्ण पैटर्न का विवरण शामिल है।
Abstract
यह प्रोटोकॉल चूहे के चेहरे की तंत्रिका चोट मॉडल में एक्सोनल पुनर्जनन और अवरोध का अध्ययन करने के लिए सुसंगत और प्रजनन योग्य तरीकों का वर्णन करता है। चेहरे की नर्व को इसकी पूरी लंबाई के साथ हेरफेर किया जा सकता है, इसके इंट्राक्रैनियल सेगमेंट से लेकर इसके इंट्राटेम्पोरल कोर्स तक। पुनर्योजी गुणों के प्रयोगात्मक अध्ययन के लिए तीन प्राथमिक प्रकार की तंत्रिका चोट का उपयोग किया जाता है: तंत्रिका क्रश, ट्रांसेक्शन और तंत्रिका अंतर। संभावित हस्तक्षेपों की सीमा विशाल है, जिसमें तंत्रिका की शल्य चिकित्सा हेरफेर, न्यूरोएक्टिव रिएजेंटया कोशिकाओं की डिलीवरी, और या तो केंद्रीय या अंत-अंग जोड़तोड़ शामिल हैं। तंत्रिका उत्थान का अध्ययन करने के लिए इस मॉडल के फायदे में सादगी, प्रजनन क्षमता, अंतर-प्रजातियों की स्थिरता, चूहे की विश्वसनीय जीवित रहने की दर, और मूत्र मॉडल के सापेक्ष एक बढ़ी हुई शारीरिक आकार शामिल है। इसकी सीमाओं में माउस मॉडल बनाम अधिक सीमित आनुवंशिक हेरफेर और चूहे की अतिशयोक्ति पुनर्योजी क्षमता शामिल है, जैसे कि चेहरे की तंत्रिका वैज्ञानिक को सावधानीपूर्वक वसूली के लिए समय बिंदुओं का आकलन करना चाहिए और क्या उच्च जानवरों और मानव अध्ययन के परिणामों का अनुवाद करना चाहिए। चेहरे की तंत्रिका चोट के लिए चूहा मॉडल तंत्रिका उत्थान की व्याख्या और तुलना के लिए कार्यात्मक, इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल और हिस्टोमॉर्फेमेट्रिक मापदंडों के लिए अनुमति देता है। यह इस तरह मानव रोगियों में चेहरे की तंत्रिका चोट के विनाशकारी परिणामों की समझ और उपचार को आगे बढ़ाने की ओर जबरदस्त क्षमता समेटे हुए है ।
Introduction
सिर और गर्दन क्षेत्र में कपाल तंत्रिका चोट जन्मजात, संक्रामक, आडिओपैथिक, आयट्रोजेनिक, दर्दनाक, न्यूरोलॉजिक, ऑनकोलॉजिक, या प्रणालीगत एटिओलोजन1के लिए माध्यमिक हो सकती है। कपाल तंत्रिका सातवीं, या चेहरे की तंत्रिका, आमतौर पर प्रभावित होता है। चेहरे तंत्रिका रोग की घटनामहत्वपूर्ण हो सकती है, क्योंकि यह हरसाल200,000 लोगों पर 20 से 30 को प्रभावित करती है। चेहरे की तंत्रिका की मुख्य मोटर शाखाएं लौकिक, जाइगोमैटिक, बुक्कल, सीमांत मंडीबुलर और सर्वाइकल शाखाएं हैं; इसमें शामिल शाखा के आधार पर, परिणामों में मौखिक अक्षमता या ड्रॉलिंग, कॉर्नियल सूखापन, दृश्य क्षेत्र बाधा माध्यमिक से टॉसिस, डिस्आर्थरिया, या चेहरे की विषमता2,,3शामिल हो सकती है। दीर्घकालिक रुग्णता में एक अलग चेहरे की मांसपेशी समूह के स्वैच्छिक संकुचन की कोशिश के साथ सिंकिनेसिस, या एक चेहरे की मांसपेशी समूह के अनैच्छिक आंदोलन की घटना शामिल है। नेत्र-मौखिक संश्लेषण चेहरे की तंत्रिका चोट के अगले कड़ी के रूप में गुमराह उत्थान का सबसे आम है और कार्यात्मक हानि, शर्मिंदगी, कम आत्मसम्मान, और जीवन की खराब गुणवत्ता का कारण बनता है3। व्यक्तिगत शाखाओं को चोट उन कार्यों को तय करती है जो चुनिंदा रूप से समझौता किए जाते हैं।
चेहरे की तंत्रिका चोट के नैदानिक उपचार अच्छी तरह से मानकीकृत नहीं है और परिणामों में सुधार करने के लिए आगे अनुसंधान की जरूरत है । स्टेरॉयड तीव्र चेहरे की तंत्रिका सूजन को कम कर सकते हैं, जबकि बोटॉक्स सिंकाइनेटिक आंदोलनों को अस्थायी करने के लिए उपयोगी है; लेकिन, प्रैक्टिशनर के आयुध में प्राथमिक पुनर्निर्माण विकल्पतंत्रिका मरम्मत, प्रतिस्थापन, या पुनर्एनिमेशन3,,44,5,,6के माध्यम से शल्य चिकित्सा हस्तक्षेप शामिल हैं। चेहरे की तंत्रिका चोट के प्रकार के आधार पर निरंतर, चेहरे तंत्रिका सर्जन विकल्पों में से एक कई का उपयोग कर सकते हैं । सरल ट्रांसेक्शन के लिए, तंत्रिका reanastomosis उपयोगी है जबकि केबल-भ्रष्टाचार की मरम्मत तंत्रिका दोष के लिए बेहतर अनुकूल है; समारोह की बहाली के लिए, सर्जन या तो स्थिर या गतिशील चेहरे के पुनर्एनिमेशन प्रक्रियाओं का चयन कर सकते हैं। चेहरे की तंत्रिका चोट और बाद में मरम्मत के कई मामलों में, यहां तक कि अनुभवी चेहरे तंत्रिका सर्जन के हाथों में, सबसे अच्छा परिणाम अभी भी लगातार चेहरे विषमता और कार्यात्मक समझौता7में परिणाम है ।
इन उप-इष्टतम परिणामों ने चेहरे की तंत्रिका उत्थान पर व्यापक शोध को प्रेरित किया है। ब्याज के व्यापक विषयों में तंत्रिका मरम्मत तकनीकों को सिद्ध करना और नवाचार करना, विभिन्न तंत्रिका उत्थान कारकों के प्रभाव का निर्धारण करना और सिंकिनेसिस8,,9,,10,,11के दीर्घकालिक परिणाम का मुकाबला करने में मदद करने के लिए विशिष्ट तंत्रिका अवरोधकों की क्षमता का आकलन करना शामिल है। जबकि इन विट्रो मॉडल का उपयोग प्रो-ग्रोथ या निरोधात्मक कारकों की कुछ विशेषताओं का आकलन करने के लिए किया जा सकता है, इस विषय पर सच्चे अनुवादात्मक अनुसंधान का अनुवाद करने योग्य पशु मॉडल के माध्यम से सबसे अच्छा पूरा किया जाता है।
जिसका निर्णय पशु मॉडल का उपयोग करना चुनौतीपूर्ण हो सकता है, क्योंकि शोधकर्ताओं ने चूहों12,,13जैसे भेड़ और छोटे पशु मॉडल जैसे बड़े जानवरों का उपयोग किया है। जबकि बड़े पशु मॉडल आदर्श शारीरिक दृश्य प्रदान करते हैं, उनके उपयोग के लिए विशेष उपकरण और कर्मियों को आसानी से या आसानी से उपलब्ध नहीं होने की आवश्यकता होती है। इसके अलावा, प्रभाव प्रदर्शित करने के लिए एक अध्ययन शक्ति अत्यधिक लागत निषेधात्मक और संभावित नहीं कई वैज्ञानिक केंद्रों के व्यवहार्य दायरे के भीतर हो सकता है । इस प्रकार, छोटे पशु मॉडल का अक्सर उपयोग किया जाता है। माउस मॉडल चेहरे तंत्रिका सर्जरी से संबंधित परिणामों की एक संख्या का आकलन करने के लिए उपयोग किया जा सकता है; हालांकि, तंत्रिका की सीमित लंबाई वैज्ञानिक के लिए इस तरह के बड़े अंतर चोट14के रूप में कुछ पैटर्न मॉडल करने की क्षमता को प्रतिबंधित कर सकते हैं ।
इस प्रकार, चूहा मूत्र प्रोटोटाइप वर्कहॉर्स मॉडल के रूप में उभरा है जिसके माध्यम से वैज्ञानिक अभिनव शल्य चिकित्सा प्रक्रियाओं का प्रदर्शन कर सकता है या निरोधात्मक या समर्थक विकास कारकों का उपयोग कर सकता है और परिणाम मापदंडों की एक विस्तृत श्रृंखला में प्रभाव का आकलन कर सकता है। चूहे के चेहरे की तंत्रिका शरीर रचना विज्ञान जाहिर है और आसानी से एक प्रजनन फैशन में संपर्क किया है । माउस मॉडल की तुलना में, इसके बड़े पैमाने पर, सरल ट्रांसेक्शन से लेकर 5 मिमी अंतराल15,,16तक सर्जिकल दोषों की एक विस्तृत श्रृंखला के मॉडलिंग के लिए अनुमति देता है। यह दोष स्थल पर जटिल हस्तक्षेपों के अनुप्रयोग के लिए आगे की अनुमति देता है, जिसमें कारक का सामयिक स्थान, कारक के इंट्रानियल इंजेक्शन, और आइसोग्राफया या पुलों की नियुक्ति17,,18,,19,,20,,21,,22,,23शामिल है।
चूहे की विनम्र प्रकृति, इसकी विश्वसनीय शरीर रचना विज्ञान, और प्रभावी तंत्रिका उत्थान के लिए इसकी प्रवृत्ति चोट24के उपरोक्त सर्जिकल पैटर्न के जवाब में कई परिणाम उपायों के संग्रह के लिए अनुमति देती है। चूहे के मॉडल के माध्यम से, चेहरे की तंत्रिका वैज्ञानिक इम्यूनोहिस्टोकेमिस्ट्री के माध्यम से चोट, तंत्रिका और मांसपेशियों के हिस्टोलॉजिक परिणामों के लिए इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल प्रतिक्रियाओं का आकलन करने में सक्षम है, विब्रिसल पैड के ट्रैकिंग आंदोलन के माध्यम से कार्यात्मक परिणाम और आंख बंद होने का आकलन, और फ्लोरोसेंट या कॉन्फोकल माइक्रोस्कोपी के माध्यम से सूक्ष्म और स्थूल परिवर्तन, अन्य के बीच11,,22,,23,,25,,26,,27,28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28, 28,,29, इस प्रकार, निम्नलिखित प्रोटोकॉल चूहे के चेहरे की तंत्रिका और चोट पैटर्न के लिए एक शल्य चिकित्सा दृष्टिकोण की रूपरेखा तैयार करेगा जिसे प्रेरित किया जा सकता है।
Protocol
Representative Results
Discussion
चूहे के चेहरे की तंत्रिका चोट मॉडल अपनी शल्य चिकित्सा पहुंच, शाखाओं में बंटी पैटर्न, और शारीरिक महत्व27,,29,,33,,34,35,,36के कारण न्यूरोट्रो?…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
एसएए अमेरिकन एकेडमी ऑफ फेशियल प्लास्टिक एंड पुनर्निर्माण सर्जरी लेस्ली बर्नस्टीन ग्रांट प्रोग्राम द्वारा वित्त पोषित है।
Materials
| 1.8% isoflurane | VetOne | 13985-030-40 | |
| 11-0 nylon microsutures | AROSuture | TK-117038 | |
| 4-0 monocryl suture | VWR | 75982-084 | |
| Buprenorphine SR | ZooPharm | MIF 900-006 | |
| Carprofen | Sigma-Aldrich | MFCD00079028 | |
| Chlorhexidine | VWR | IC19135805 | |
| Jeweler forceps | VWR | 21909-458 | |
| Micro Weitlaner retractor | VWR | 82030-146 | |
| Micro-scissors | VWR | 100492-348 | |
| Mini tenotomy scissors | VWR | 89023-522 | |
| Number 15 scalpel blade | VWR | 102097-834 | |
| Operating microscope | Leica | ||
| Petrolatum eye gel | Pharmaderm | B002LUWBEK | |
| Sterile water | VWR | 89125-834 | |
| Tissue adhesive | Vetbond, 3M | NC9259532 | |
| Water conductor pad | Aqua Relief System | ARS2000B |
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