इस विधि एक पुरानी तैयारी है कि रहने वाले चूहों के हिप्पोकैम्पस के लिए ऑप्टिकल का उपयोग की अनुमति देता है का वर्णन करता है. इस तैयारी के लिए न्यूरोनल संरचनात्मक प्लास्टिक और गतिविधि के अनुदैर्घ्य ऑप्टिकल इमेजिंग प्रदर्शन करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है कई हफ्तों की अवधि में सेलुलर plasticity evoked.
दो-फोटोन माइक्रोस्कोपी तंत्रिका विज्ञान के लिए एक मौलिक उपकरण है क्योंकि यह स्थानिक तराजू पर जीवित जानवरों के मस्तिष्क की जांच की अनुमति देता है जिसमें उपकोशिक से लेकर नेटवर्क स्तर तक और मिलीसेकंड से सप्ताह तक अस्थायी तराजू शामिल हैं। इसके अलावा, दो फोटो न इमेजिंग मस्तिष्क समारोह और व्यवहार के बीच कारण संबंधों का पता लगाने के लिए व्यवहार कार्यों की एक किस्म के साथ जोड़ा जा सकता है. हालांकि, स्तनधारियों में, प्रकाश के सीमित प्रवेश और प्रकीर्णन ने ज्यादातर सतही मस्तिष्क क्षेत्रों के लिए दो-फोटोन इंट्राविटल इमेजिंग सीमित कर दी है, इस प्रकार हिप्पोकैम्पस जैसे गहरे मस्तिष्क क्षेत्रों की अनुदैर्घ्य जांच को रोक दिया है। हिप्पोकैम्पस स्थानिक नेविगेशन और प्रासंगिक स्मृति में शामिल है और एक लंबे समय से चली आ रही मॉडल सेलुलर के रूप में के रूप में अच्छी तरह से सीखने और याद करने के लिए महत्वपूर्ण प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए इस्तेमाल किया है, दोनों स्वास्थ्य और रोग में. यहाँ, एक तैयारी है कि जीवित चूहों में पृष्ठीय हिप्पोकैम्पस के लिए पुरानी ऑप्टिकल पहुँच सक्षम बनाता है विस्तृत है. इस तैयारी के साथ जोड़ा जा सकता है दो-photon ऑप्टिकल इमेजिंग सेलुलर और सिर में subcellular संकल्प तय, कई हफ्तों से अधिक anesthetized रहते चूहों. इन तकनीकों न्यूरॉन संरचना या गतिविधि की बार-बार इमेजिंग सक्षम करने के लिए दसियों में पृष्ठीय हिप्पोकैम्पस CA1 में न्यूरॉन्स के सैकड़ों करने के लिए प्लास्टिक की. इसके अलावा, इस पुरानी तैयारी माइक्रो एंडोस्कोपी, सिर पर चढ़कर व्यापक क्षेत्र माइक्रोस्कोपी या तीन-फोटोन माइक्रोस्कोपी जैसे अन्य तकनीकों के साथ संयोजन में इस्तेमाल किया जा सकता है, इस प्रकार बहुत शामिल सेलुलर और नेटवर्क प्रक्रियाओं का अध्ययन करने के लिए उपकरण बॉक्स का विस्तार सीखने और स्मृति में.
स्तनधारियों में, हिप्पोकैम्पस, एन्कोडिंग के लिए एक प्रमुख मस्तिष्क क्षेत्र है और प्रासंगिक यादों को याद करने के साथ-साथ स्थानिक नेविगेशन1,2,3,4के लिए भी एक महत्वपूर्ण मस्तिष्क क्षेत्र है । इस कारण से, हिप्पोकैम्पस गया है – और अभी भी है – एक बहुत ही महत्वपूर्ण मॉडल बुनियादी तंत्र है कि मस्तिष्क सांकेत: बदलना और यादों को याद करने की अनुमति का अध्ययन करने के लिए5,6,7 या एक वातावरण में नेविगेट करने के लिए8 ,9 पुरस्कार इकट्ठा करने और खतरों से बचने। इसके अतिरिक्त, हिप्पोकैम्पस गठन मस्तिष्क क्षेत्रों में से एक है जहां कृन्तकों के जीवन भर नए न्यूरॉन्स उत्पन्न होते हैं10,11 और संभवतः , मनुष्यों के12,13. अंत में, अध: पतन या हिप्पोकैम्पस गठन की हानि मस्तिष्क संबंधी और मनोरोग विकारों के साथ जुड़े रहे हैं, अल्जाइमर रोग सहित14.
चूहों में, हिप्पोकैम्पस मस्तिष्क की सतह15के नीचे लगभग 1 मिमी स्थित है। इसकी स्थिति बरकरार मस्तिष्क में ऑप्टिक का उपयोग रोका गया है और इसके परिणामस्वरूप, हिप्पोकैम्पस गतिशीलता के अनुदैर्घ्य अध्ययन ज्यादातर चुंबकीय अनुनाद (एमआर) इमेजिंग, इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी, और पूर्व विवो इमेजिंग विश्लेषण पर भरोसा किया है। एमआर इमेजिंग तरीकों जैविक प्रक्रियाओं पर नज़र रखने की अनुमति (जैसे, जीन अभिव्यक्ति परिवर्तन16) एक ही जानवर में कई दिनों से अधिक है, लेकिन स्थानिक संकल्प की कमी एकल न्यूरॉन्स भेदभाव करने के लिए. विवो इलेक्ट्रोफिजियोलॉजिकल तकनीकों में क्लासिक बहुत उच्च लौकिक संकल्प और झिल्ली क्षमता में परिवर्तन करने के लिए अति सुंदर संवेदनशीलता प्रदान करते हैं। हालांकि, वे एक सीमित स्थानिक संकल्प है और वे मज़बूती से लंबे समय अवधि में एक ही कोशिकाओं को ट्रैक करने की क्षमता की कमी है. ऑप्टिकल इमेजिंग अधिक विविध प्रक्रियाओं अपने उच्च लौकिक और स्थानिक संकल्प के आधार पर अध्ययन किया जा करने के लिए अनुमति देता है। हालांकि, पूर्व विवो इमेजिंग केवल चल रही प्रक्रियाओं के स्नैपशॉट प्रदान करता है, और इस प्रकार यह अनुदैर्घ्य अध्ययन के लिए उपयुक्त नहीं है जिसके दौरान जानवर सीखने और जानकारी याद करते हैं।
विवो ऑप्टिकल इमेजिंग में ऑप्टिकल इमेजिंग के उन लोगों के साथ एमआर इमेजिंग और इलेक्ट्रोफिजियोलॉजी के कुछ फायदे को जोड़ती है। इसलिए, यह बहुत अच्छी तरह से माउस मस्तिष्क गतिशीलता और व्यवहार के अनुदैर्घ्य और सहसंबंधी विश्लेषण के लिए अनुकूल है. यह बहुत तेजी से (मिलीसेकंड सेकंड के लिए) या बहुत धीमी गति से (सप्ताह के लिए दिन) समय तराजू के साथ जैविक प्रक्रियाओं के अध्ययन में प्रासंगिक है। ऐसी प्रक्रियाओं है कि तंत्रिका विज्ञान के लिए प्रासंगिक हैं के लिए उदाहरण झिल्ली वोल्टेज गतिशीलता, Ca2 + यात्रियों, सेलुलर plasticity और संरचनात्मक परिवर्तन, जो सभी स्मृति गठन और याद करने के लिए बहुत महत्वपूर्ण माना जाता है. विवो इमेजिंग में विभिन्न तरीकों ने पृष्ठीय हिप्पोकैम्पस18,19,20,21,22तक बढा दिया है . तीव्र तैयारी ने पिरामिडीय न्यूरॉन (पीएन ) की गतिविधि के साथ-साथ कई घंटोंकेलिए उनके डेन्ड्रेट और डेन्ड्रिटिक रीढ़ की ट्रैकिंग की अनुमति दी है . तथापि, यह अस्थायी समय-सीमा दीर्घकालिक संरचनात्मक परिवर्तनों की अनुमति नहीं देती है, जो वृद्धिशील अधिगम को कम कर सकती है, जिसका अध्ययन किया जा सकता है। पुरानी तैयारी – माइक्रो एंडोस्कोप के साथ संयोजन में23,24 या लंबे समय तक काम कर दूरी (WD) मानक माइक्रोस्कोप उद्देश्यों के साथ21 – कई पर पृष्ठीय हिप्पोकैम्पस की बार-बार इमेजिंग सक्षम है सप्ताह.
यहाँ, हम एक पुरानी तैयारी है कि एक स्थायी रूप से डाला इमेजिंग cannula का उपयोग कर रहने वाले चूहों के पृष्ठीय हिप्पोकैम्पस के CA1 उप क्षेत्र के लिए आवर्तक ऑप्टिक पहुँच प्रदान करता है का वर्णन. इस तैयारी कार्यात्मक अशांति के बिना CA1 के लिए दोहराया उपयोग की अनुमति देता है और intravital दो-फोटोन (2P) या व्यापक क्षेत्र epifluorscence इमेजिंग के लिए उपयुक्त है. लाइव चूहों के पृष्ठीय CA1 में 2P गहरी मस्तिष्क पुरानी इमेजिंग के दो उदाहरण विस्तृत हैं: डेन्ड्रिटिक संरचना और डेन्ड्रिटिक रीढ़ की गतिशीलता के अनुदैर्घ्य इमेजिंग और गतिविधि के अनुदैर्घ्य इमेजिंग-उत्तेजित प्लास्टिकता. तकनीक के मुख्य लाभ और सीमाओं पर चर्चा की जाती है।
यहाँ, लाइव चूहों में पृष्ठीय CA1 के दोहराया 2P इमेजिंग के लिए एक प्रक्रिया का वर्णन किया गया है. सर्जरी के बाद, माउस आमतौर पर 2 दिनों के भीतर ठीक हो जाता है। इस प्रक्रिया से कम से कम एस्ट्रोग्लियोसिस26,43पैदा होती है . रक्तस्राव और एडीमा जो सर्जरी का पालन कर सकते हैं आमतौर पर 10 से 14 दिनों के भीतर फिर से adsorbed हैं। आम तौर पर, 14 दिनों के बाद प्रत्यारोपण के बाद से तैयारी इंट्राविटल इमेजिंग करने के लिए पर्याप्त रूप से स्पष्ट है। सर्जरी की सफलता एक बाँझ वातावरण में काम करने पर निर्भर नहीं करता है। हालांकि, सर्जरी से जुड़े संक्रमण के कारण जटिलताओं से बचने के लिए, स्वच्छता के उच्च स्तर को बनाए रखना महत्वपूर्ण है। यह सावधानी से सर्जरी से पहले और बाद में शल्य चिकित्सा उपकरणों की सफाई और गर्मी से उन्हें तुरंत प्रत्येक उपयोग से पहले स्टरलाइज़ करके प्राप्त की है (चरण 2.1.1). ऑप्टिक कैनुला को एक साफ, बाँझ कंटेनर में रखा जाता है और प्रत्यारोपण से ठीक पहले बाँझ नमकीन के साथ कुल्ला किया जाता है। हाथ कीटाणुशोधन और सर्जिकल स्टेशन की सफाई के आम शल्य चिकित्सा प्रथाओं का प्रदर्शन भी बहुत महत्वपूर्ण है। तैयारी स्थिर बनी हुई है और कई सप्ताह26,35के लिए सेलुलर और उपकोशिकीय संकल्प इमेजिंग की अनुमति देता है .
महत्वपूर्ण कदम, संशोधन और समस्या निवारण.
यह गहरे फाइबर उजागर कर रहे हैं जब तक बाहरी कैप्सूल छील करने के लिए महत्वपूर्ण है. Alveus का पर्दाफाश करने में विफलता PNs की सोमा पर ध्यान केंद्रित करने में असमर्थता में परिणाम हो सकता है, या कम संकल्प इमेजिंग डेन्ड्रिटिक रीढ़ में, जब 3 या 4-मिमी WD के साथ वाणिज्यिक उद्देश्यों का उपयोग कर. इस उद्देश्य के लिए, यह बहुत धीरे धीरे एक 0.9 मिमी व्यास सुई का उपयोग कर neocortex ablate करने के लिए उपयोगी है और फिर सबसे पृष्ठीय फाइबर को हटाने जब चूषण की एक बेहतर नियंत्रण के लिए एक 0.3-0.5 मिमी व्यास (24-29 गेज) सुई के लिए स्विच. वैकल्पिक रूप से, ठीक forceps फाइबर जोखिम36के बाद शेष प्रांतस्था को दूर करने के लिए इस्तेमाल किया जा सकता है.
सर्जरी के दौरान रक्त स्राव समस्याग्रस्त हो सकता है, क्योंकि रक्त दृश्य में बाधा डालता है। थक्का बनाने के लिए प्रतीक्षा कर रहा है और फिर अवशिष्ट रक्त को धोने के लिए नमकीन के साथ rinsing की सिफारिश की जाती है। आवश्यकतानुसार दोहराएँ.
कैनुला और क्रैनियोटोमी के बीच एक सुखद फिट सीमेंट के आवेदन से पहले कैनुला को जगह में रखकर तैयारी की स्थिरता को बढ़ाने में मदद करता है, खासकर अगर कैनुला का बाहरी रिम खोपड़ी के साथ फ्लश होता है। के बाद से trephine ड्रिल और cannula के आकार मिलान कर रहे हैं, एक ढीला फिट कैनुला के पक्ष में अनियमितताओं की वजह से पैदा कर सकते हैं – जो थोड़ा बड़ा craniotomies फिट करने की आवश्यकता होती है (चरण 2.3.14 देखें) – या एक अनियमित craniotomy से. किसी भी cannula अनियमितताओं से दायर किया जाना चाहिए (चरण 1.3 और 1.12) और ट्रेफिन खोपड़ी के सीधा आयोजित किया जाना चाहिए जब तक craniotomy पूरा हो गया है (चरण 2.3.12). कपाल रचना पूरी होने से पहले खोपड़ी से ट्रेफिन निकालना अनियमित क्रैनिओटॉमी हो सकता है।
सीमाएं- आक्रामकता और तैयारी की स्थिरता.
यह cortical ablation के प्रभाव का मूल्यांकन करने के लिए मुश्किल है के रूप में यह ठीक से प्रत्यक्ष और परोक्ष रूप से प्रभावित क्षेत्रों को परिभाषित करने के लिए कठिन है. सामान्य तौर पर, सर्जरी पार्श्विक प्रांतस्था के हिस्से और दृश्य और हिंदलिम संवेदी प्रांतस्था21के हिस्से को हटा देती है। ablated प्रांतस्था सीधे हिप्पोकैम्पस और हिप्पोकैम्पस ऊतक के लिए परियोजना नहीं है न तो छुआ है और न ही घायल. महत्वपूर्ण बात यह है कि यह दिखाया गया है कि एक इमेजिंग कैनुला का प्रत्यारोपण हिप्पोकैम्पस समारोह और विशेष रूप से हिप्पोकैम्पस-निर्भर सीखने21,36,37,38, 39. फिर भी, यह क्या हद तक दोनों cannula और प्रत्यारोपण के बाहरी भाग (सिर धारक प्लेट और दंत एक्रिलिक टोपी) corticosterone रक्त के स्तर और अधिवृक्क ग्रंथि वजन की तुलना में आकलन करके पुरानी तनाव हैं मात्रा निर्धारित करने के लिए महत्वपूर्ण होगा प्रत्यारोपित चूहों.
तैयारी आम तौर पर सप्ताह से26महीने तक स्थिर रहती है . लंबे समय में, त्वचा और हड्डी के विकास के लिए एक्रिलिक टोपी विस्थापित करते हैं और इमेजिंग तैयारी की अस्थिरता में वृद्धि.
ऑप्टिकल सीमाओं.
पारंपरिक 2P माइक्रोस्कोपी के बारे में 1 मिमी तक इमेजिंग की अनुमति देता है neocortical ऊतक40,41में गहरी . इस के अनुरूप, यह एसआर में स्थित डेन्ड्रिट और डेन्ड्रिटिक रीढ़ की छवि के लिए संभव है (चित्र 2 डी–एफ) या SLM36. हालांकि, एक cannula के माध्यम से इमेजिंग प्रभावी एनए के लिए सीमाओं बन गया है. अधिकतम संकल्प को प्राप्त करने के लिए, व्यास और इमेजिंग cannulas की गहराई इमेजिंग एनए के लिए मिलान किया जाना चाहिए, के रूप में छोटे व्यास और अब गहराई उच्च NA उद्देश्यों के प्रकाश क्लिप जाएगा. उदाहरण के लिए, जब एक 1.6 मिमी लंबे cannula के माध्यम से एक 1.0 एनए पानी विसर्जन उद्देश्य के साथ इमेजिंग, एक 3.65 मिमी आंतरिक व्यास पूर्ण एनए रखने की जरूरत है. हालांकि, इस व्यास के एक cannula का उपयोग हिप्पोकैम्पस पर संपीड़न में वृद्धि होगी और ऊतक के स्वास्थ्य को प्रभावित कर सकता है, इस कारण के लिए, हम एक छोटे व्यास के साथ एक cannula का उपयोग करें. जब एक 1.6 मिमी लंबे cannula के माध्यम से एक 0.8 एनए पानी विसर्जन उद्देश्य के साथ इमेजिंग, 2.5 मिमी के एक आंतरिक व्यास पूर्ण एनए रखने के लिए पर्याप्त होगा. हालांकि, 0.8 एनए पानी विसर्जन उद्देश्यों एक छोटे WD है (3 मिमी हमारे मामले में), जो सपा पर ध्यान केंद्रित करने से रोका जा सकता है.
ये परिकलन कैनुला के निचले भाग में दृश्य के क्षेत्र के केंद्र पर लागू होते हैं. हालांकि, दृश्य के इमेजिंग क्षेत्र को पक्षवार ले जाना – कैनुला के किनारों के करीब – या ऊतक में गहरा ध्यान केंद्रित करना – कैनुला के कांच की सतह से आगे – फोकल प्लेन पर प्रभावी एनए को और कम कर देता है और इस प्रकार संकल्प को कम कर देता है। यह छवि वाले ऊतक के विभिन्न संस्करणों में गैर समजात संकल्प करने के लिए नेतृत्व करेंगे और subcellular संकल्प पर मात्रात्मक इमेजिंग के लिए एक चिंता का विषय हो सकता है, खासकर जब इस तरह के 2P-STED माइक्रोस्कोपी42के रूप में सुपर संकल्प तकनीक का उपयोग कर . इन मुद्दों को कम महत्वपूर्ण हैं जब सेलुलर संकल्प पर इमेजिंग.
ऊतक गति.
ऊतक के भीतर गति – एनेस्थेटाइज़्ड जानवरों में सांस लेने और दिल की धड़कन से निकलने वाली गति – इमेजिंग कैनुला से बढ़ी हुई दूरी के साथ अधिक गंभीर हो जाती है। यह संभवतः इसलिए है क्योंकि इमेजिंग कैनुला मस्तिष्क पर यांत्रिक दबाव लागू करता है इस प्रकार कैनुला के आसपास के क्षेत्र में गति के कुछ प्रतिक्रिया (नियोकोर्टिक तैयारी के समान)। इस प्रकार, हालांकि डेन्ड्रिटिक रीढ़ की इमेजिंग एसआर और एसएलएम में संभव है, हमारे हाथों में, यह कैनुला की सतह से $200 डिग्री तक SO के लिए सबसे मजबूत पृष्ठीय है। गति के लिए क्षतिपूर्ति करने के लिए, हम गुंजयमान स्कैनर और ऑफ़लाइन औसत का उपयोग करें। कई छवियों (4 से 6 repetitions) अधिकतम उपलब्ध गति (30 फ्रेम / प्रत्येक z-plane के लिए सभी repetitions तो deconvolved हैं (वाणिज्यिक सॉफ्टवेयर का उपयोग कर, AutoQuant), पंजीकृत (ImageJ का उपयोग कर) और एक ही छवि में औसत26. सोमाटा की इमेजिंग के लिए, गति अक्सर संज्ञाहरण35 पर नगण्य है और दो औसत अक्सर गति कलाकृतियों के लिए क्षतिपूर्ति करने के लिए पर्याप्त हैं।
भविष्य के आवेदन या विधि के निर्देश .
तैयारी माइक्रो एंडोस्कोप के साथ जोड़ा जा सकता है26,43. माइक्रो-एंडोस्कोप कठोर ऑप्टिक जांच होते हैं जो गहरे ऊतक18के लिए प्रकाश का मार्गदर्शन करने के लिए ढाली अपवर्तक सूचकांक (जीआरआईआर) माइक्रोलेन्स का उपयोग करते हैं। माइक्रो एंडोस्कोप का उपयोग छोटे व्यास या यहां तक कि कोई cannulas के cannulas की अनुमति देता है. हालांकि, वाणिज्यिक माइक्रो एंडोस्कोप कम अच्छी तरह से ऑप्टिकल विपथन के लिए सही कर रहे हैं और वाणिज्यिक उद्देश्यों की तुलना में कम एनए है. वर्तमान अन्वेषण ों की ताक्षर एवं अक्षीय रिज़ॉल्यूशन ों तक पहुँच जाते हैं, जो क्रमशः17,18,44हैं। माइक्रो-एंडोस्कोप ्सके यूज होने से इस तैयारी का संयोजन सिर पर चढ़कर एकीकृत वाइडफील्ड माइक्रोस्कोप45,46,47के साथ भी मिल सकता है.
विधि भी गैर-एनेस्थेटाइज्ड चूहों में उपयोग करने के लिए उधार देता है, और यह जाग सिर में सी2 + सेंसर का उपयोग सेलुलर गतिविधि की जांच करने के लिए इस्तेमाल किया गया है21,37,48,49. इन मामलों में, फ्लोरोसेंट परिवर्तन के तेजी से समय तराजू के कारण, लाइन पंजीकरण50को लागू करने की सलाह दी जाती है। अन्य हिप्पोकैम्पस उप-क्षेत्रों जैसे दंतेले जाइरस (डीजी)39,51,52के इमेजिंग के लिए तैयारी को भी अनुकूलित करना संभव है . 3P उत्तेजना53के साथ इस तैयारी के संयोजन,54 के साथ 1 मेगाहर्ट्ज आवृत्ति स्पंदित लेजर 1400 एनएम करने के लिए देखते हैं, हम हिप्पोकैम्पस गठन आणविक परत तक पहुँचने में गहरी छवि करने में सक्षम थे, ग्रेन्युल सेल परत और डीजी की हिलाहट (चित्र 4) ओवरलेइंग सीए 1 को हटाए बिना।
अंत में, हम एक विधि है कि पृष्ठीय हिप्पोकैम्पस के लिए ऑप्टिकल पहुँच प्रदान करता है और हिप्पोकैम्पस संरचना और गतिविधि की गतिशीलता के अनुदैर्घ्य और सहसंबंधी अध्ययन की अनुमति देता है प्रस्तुत करते हैं. इस तकनीक शारीरिक और रोग की स्थिति के तहत हिप्पोकैम्पस समारोह के विश्लेषण की संभावनाओं का विस्तार.
The authors have nothing to disclose.
यू. ए. एफ. Schram नींव द्वारा समर्थित है; C.-W. T. P. और W. G. Max प्लैंक सोसायटी द्वारा समर्थित हैं; एल.वाई. और आर.वाई. मैक्स प्लैंक सोसायटी और राष्ट्रीय स्वास्थ्य संस्थान (R01MH080047, 1DP1NS096787) द्वारा समर्थित हैं; ए सी यूरोपीय अनुसंधान परिषद से एक FP7 अनुदान द्वारा समर्थित है, ERANET और मैं कोर कार्यक्रमों, इजरायल के स्वास्थ्य मंत्रालय के मुख्य वैज्ञानिक कार्यालय, संघीय शिक्षा और अनुसंधान मंत्रालय, रॉबर्टो और Renata Ruhman, ब्रूनो और सिमोन लीच, नेला और लियोन बेनोजीयो सेंटर फॉर न्यूरोलॉजिकल डिजामेंट्स, हेनरी चानोच क्रेन्ट इंस्टीट्यूट फॉर बायोमेडिकल इमेजिंग एंड जीनोमिक्स, द इज़राइल साइंस फाउंडेशन द पर्लमैन परिवार, एडेलिस, मार्क बेसन, प्रैट और इरविंग I. Moskowitz फाउंडेशन; ए. ए मैक्स प्लैंक सोसायटी, श्राम फाउंडेशन और ड्यूश Forschungsgemeinschaft (DFG) द्वारा समर्थित है। 3P छवियों को न्यूरोइमेजिंग तकनीक पर उन्नत पाठ्यक्रम के दौरान मैक्स प्लैंक फ्लोरिडा इंस्टीट्यूट फॉर न्यूरोसाइंस में अधिग्रहण किया गया था। Neuroimaging तकनीक पर उन्नत पाठ्यक्रम मैक्स प्लैंक सोसायटी, फ्लोरिडा राज्य मैक्स प्लैंक वैज्ञानिक फैलोशिप कार्यक्रम और मैक्स प्लैंक फ्लोरिडा संस्थान निगम भागीदारी कार्यक्रम द्वारा समर्थित है. हम पाठ्यक्रम के दौरान 2P / 3P इमेजिंग प्रणाली के लिए समर्थन और उपकरण प्रदान करने के लिए Thorlabs, सुसंगत और SpectraPhysics धन्यवाद देना चाहते हैं. हम भी पाठ्यक्रम के दौरान प्रणाली के साथ सहायता के लिए हेनरी Haeberle और Melissa Eberle के आभारी हैं.
Professional drill/grinder IBS/E | Proxxon GmbH | 28481 | Pecision drill |
MICROMOT drill stand MB 200 | Proxxon GmbH | 28600 | Movable ruler table |
MICRO compound table KT 70 | Proxxon GmbH | 27100 | Movable ruler table |
Machine vice MS 4 | Proxxon GmbH | 28132 | Movable ruler table |
Stainless steel tube Ø 3,0 x 0,25 mm (Inner Ø 2,5 mm ) L = 500 mm | Sawade | R00303 | Stainless steel tube for the cannula metal ring |
Microscope Cover glass (4 mm round) | Engelbrecht Medizin and Labortechnik | Glass coverslips for the cannula glass | |
Schlusselfeilensatz 6-tgl. Im Blechetui | Hoffmann Group | 713750 160 | Manual files |
Präzisions-Nadelfeile Gesamtlänge 140 mm 4 | Hoffmann Group | 527230 4 | Manual files |
UV-Curing Optical Adhesives | Thorlabs | NOA81 | UV-curing adhesive |
UV Curing LED System, 365 nm | Thorlabs | CS2010 | UV-curing LED driver unit |
Stemi 305 | Zeiss | Stereoscope | |
Presto II | NSK-Nakanishi Germany | Z307015 | Dental drill |
Diamantbohrer FG (5 St.), Zylinder flach, 837-014 fein | MF Dental | F837.014.FG | Files for the dental drill |
Diamantbohrer FG (5 St.), Zylinder flach, 837-014 grob | MF Dental | G837.014.FG | Files for the dental drill |
Graefe Forceps – Straight / Serrated | Fine Science Tools | 11050-10 | Forceps for the surgery |
Burrs for Micro Drill | Fine Science Tools | 19008-05 | 0.5 mm width burr for the micro-drill |
Burrs for Micro Drill | Fine Science Tools | 19008-09 | 0.9 mm width burr for the micro-drill |
MicroMotor mit Handstück | DentaTec | MM11 | Micro-drill for the craniotomy |
Dumont #3 Forceps | Fine Science Tools | 11231-30 | Dumont forceps for the surgery |
Fine Scissors – ToughCut | Fine Science Tools | 14058-09 | Scissors for the surgery |
Trephine | MW Dental | 229-020 | Trephine drill – 3.0 mm diameter; for the micro-drill |
Stainless Steel Self-Tapping Bone Screws | Fine Science Tools | 19010-10 | 0.86 mm width bone screws |
Stereotaxic apparatus | Kopf | Stereotaxic apparatus | |
3-D-Gelenkarm | Hoffmann Group | 442114 | Stereotaxic arm and plate holder |
Aufnahme 2SM | Hoffmann Group | 442100 2SM | Stereotaxic arm and plate holder |
Hot Bead Sterilizers | Fine Science Tools | 18000-45 | Glass beads sterilizer |
Isofluran CP, Flasche 250 ml | Henry Schein VET GmbH | 798932 | Liquid isoflurane for anesthesia |
Harvard Apparatus Isoflurane Funnel-Fill Vaporizer | Harvard Apparatus GmbH | 34-1040 | Isoflurane vaporizer |
Lab Active Scavenger | Gropper Medizintechnik | UV17014 | Isoflurane scavenger system |
Metacam 0,5% Injektionslsg. (Hund / Katze), Flasche 20 ml | Henry Schein VET GmbH | 798566 | Meloxicam, anti-inflammatory |
Vetalgin 500 mg/ml | MSD Tiergesundheit | Vetalgin, pain killer | |
CMA 450 Temperature Controller | Hugo Sachs Elektronik – Harvard Apparatus GmbH | 8003770 | Heating blanket |
Bepanthen Augen- und Nasensalbe | Bayer AG | Ophtalmic ointment | |
KL 1500 LCD | Schott | Fiber optic light source | |
Xylocain Pumpspray | AstraZeneca GmbH | Lidocain, local anesthetic | |
Absorption Triangles – Unmounted | Fine Science Tools | 18105-03 | Absorption triangles for the surgery |
Parkell C&B Metabond clear powder L | Hofmeester dental | 013622 | Quick adhesive cement |
Parkell C&B Metabond Quick Base B | Hofmeester dental | 013621 | Quick adhesive cement |
Parkell C&B Metabond Universal Catalyst C | Hofmeester dental | 013620 | Quick adhesive cement |
Adjustable Precision Applicator Brushes | Parkell | S379 | Precision applicators for the surgery |
Blunt needles 0.9×23 mm | Dentina | 0441324 | Blunt needles |
Blunt needles 0.5×42 mm | Dentina | 0452155 | Blunt needles |
Blunt needles 0.3×23 mm | Dentina | 0553532 | Blunt needles |
Kallocryl A/C | Speiko | 1615 | Acrylic liquid component |
Kallocryl | Speiko | 1609 | Acrylic powder |
Hydrofilm transparent roll | Hartmann | Adhesive film | |
Head plates | Custom made | 30 mm x 10 mm size; 8 mm diameter hole, titanium | |
Head plate clamp | Custom made | Head plate holder | |
Pedestal post holders | Thorlabs | PH20E/M | Head plate holder |
Stainless steel post | Thorlabs | TR30/M | Head plate holder |
Stainless steel post | Thorlabs | TR75/M | Head plate holder |
Stainless steel post | Thorlabs | TR150/M | Head plate holder |
Post connector clamps | Custom made | Head plate holder | |
Aluminum Breadboard, 300 mm x 450 mm x 12.7 mm, M6 Taps | Thorlabs | MB3045/M | Microscope stage |
7" x 4" Lab Jack | Thorlabs | L490/M | Microscope stage |
Low profile face mask small mice | Emka Technologies | VetFlo-0801 | Anesthesia facemask holder |
RS4000 Tuned Damped Top Performance Optical Table | Newport | Floating table | |
S-2000A Top Performance Pneumatic Vibration Isolators with Automatic Re-Leveling | Newport | Floating table | |
Power Meter Model 1918-R | Newport | Power meter | |
X-Cite 120Q | Excelitas Technologies | Fluorescence lamp | |
Two-photon microscope | Bruker | Ultima IV | Two-photon microscopes |
Two-photon microscope | Thorlabs | Bergamo | Two-photon microscopes |
Plan N 4x/0.10 ∞/-/FN22 | Olympus | Objectives | |
Plan N 10x/0.25 ∞/-/FN22 | Olympus | Objectives | |
LMPlan FLN 20x/0.40 ∞/-/FN26.5 | Olympus | Objectives | |
XLPlan N 25x/1.00 SVMP ∞/0-0.23/FN18 | Olympus | Objectives | |
Ultafast tunable laser for 2P excitation | Spectraphysics | Mai Tai Deep See | Excitaiton lasers |
Ultafast tunable laser for 2P excitation | Spectraphysics | InSight DS+ Dual beam | Excitaiton lasers |
Ultafast tunable laser for 3P excitation | Coherent | Monaco | Excitaiton lasers |