Waiting
Traitement de la connexion…

Trial ends in Request Full Access Tell Your Colleague About Jove
JoVE Journal Medicine
Click here for the English version

Medicine

OP-IVM: Oosit Alımından Sonra In vitro Olgunlaşmayı Jinekolojik Cerrahi ile Birleştirmek

Published: May 9, 2021 doi: 10.3791/61647
Automatic Translation
*1,2,3,4,5, *1,2,3,4,5, *1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5, 1,2,3,5, 1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5, 1,2,3,4,5
1Center for Reproductive Medicine, Department of Obstetrics and Gynecology, Peking University Third Hospital, 2National Clinical Research Center for Obstetrics and Gynecology, 3Key Laboratory of Assisted Reproduction, Ministry of Education, 4Beijing Key Laboratory of Reproductive Endocrinology and Assisted Reproduction, 5Research Units of Comprehensive Diagnosis and Treatment of Oocyte Maturation Arrest, Chinese Academy of Medical Sciences
* These authors contributed equally

ERRATUM NOTICE

Summary

Jinekolojik operasyondan önce in vitro olgunlaşma (IVM) (OP-IVM), oosit alımını takiben IVM'yi rutin jinekolojik cerrahi ile birleştirir ve doğurganlığın korunması için geleneksel IVM uygulamalarının bir uzantısı olarak hizmet eder.

Abstract

Jinekolojik operasyondan (OP-IVM) önce in vitro olgunlaşma (IVM) kullanımı, oosit alımını takiben IVM'i rutin jinekolojik cerrahi ile birleştiren geleneksel IVM'nin bir uzantısıdır. OP-IVM, doğurganlığın korunmasına (FP) veya in vitro fertilizasyon ve embriyo transferi (IVF-ET) gibi kısırlık tedavilerine ihtiyaç duyan iyi huylu jinekolojik cerrahi uygulanan hastalar için uygundur. Ameliyathanede iyi huylu jinekolojik cerrahi uygulanan hastalar önce uyuşturulur ve ultrason eşliğinde olgunlaşmamış folikül aspirasyonu (IMFA) tedavisi görürler. Sonraki jinekolojik cerrahi yapıldıkça kümülüs-oosit kompleksleri (COC) incelenir ve olgunlaşmamış COC'ler IVM ortamına aktarılır ve IVF laboratuvarında 28-32 saat kültürlenir. Değerlendirmeden sonra, MII aşamasındaki olgun oositler seçilecek ve FP için sıvı nitrojende kriyoprezite veya IVF-ET için intrasitoplazmik sperm enjeksiyonu (ICSI) ile döllenecektir. IVM'yi jinekolojik cerrahi ile birleştirerek, atılacak olgunlaşmamış oositler kaydedilebilir ve yardımcı üreme teknolojisi (ART) için kullanılabilir. OP-IVM'nin prosedürü, önemi ve kritik yönleri bu makalede açıklanmıştır.

Introduction

IVM, insan olgunlaşmamış oositlerin IVF-ET veya FP için olgunlaşmaya in vitro olarak kültüre olduğu bir SANATTIR. IVM'de yumurtlama indüksiyon ilaçları kullanılmaz, böylece ağrı, finansal yük ve yumurtalık hiperstimülasyon sendromu (İSG)1,2gibi komplikasyonlar azaltılır. Ek olarak, IVM özellikle kanser hastalarının FP'si ve yumurtlama indüksiyon tedavisi alamayacak veya alacak zamanı olmayan hormona duyarlı hastaların kısırlık tedavisi için uygundur3. Bu nedenle, alınan oosit sayısına rağmen, klinik gebelik oranı (CPR) ve canlı doğum oranı (LBR) IVF4,5,IVM'den daha düşüktür.

Endometriyal lezyonları, hidrosalpinks veya yumurtalık kistleri olan infertil hastalar genellikle ART tedavisinden önce jinekolojik cerrahiye sahiptir ve oositleri genellikle olgunlaşmamıştır. OP-IVM, olgunlaşmamış oositleri almak ve IVF-ET veya FP için olgunlaşmaya kadar in vitro olarak yetiştirmek için kılavuzlu transvajinal ultrason kullanır. Doğurgan hastalar için OP-IVM, rutin jinekolojik cerrahiden geçerken "doğurganlık sigortası" görevi görebilse de.

Ayrıca elektrokoter6,7 ve yumurtalık tümörü rezeksiyonu gibi jinekolojik ameliyatların neden olduğu hasarlar jinekolojik cerrahi öncesi oosit alımı ile azaltılabilir. Bu nedenle, rutin jinekolojik cerrahi ile karşılaştırıldığında, OP-IVM kısırlık tedavisi sırasında operasyon sayısını azaltabilir ve yumurtalık cerrahisi sırasında fonksiyonel oosit kaybını önleyebilir.

Daha önceki bir çalışma, ek oosit alma prosedürünün ne cerrahi komplikasyonları ve olumsuz gebelik sonuçlarını artıracağını ne de hastanede kalış süresini uzatacağınıgöstermiştir 8. Bazı hastalar op-ivm8ile canlı doğum yapmışlardır Bu yöntemin fizibilitesini gösterir. Bu makalede OP-IVM'den yararlanabilecek hastaların özelliklerinin yanı sıra OP-IVM'nin prosedürleri ve kritik noktaları açıklanmaktadır ve insan oosit olgunluğunun değerlendirilmesi tartışılmaktadır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Protocol

NOT: OP-IVM yöntemi ile ilgili çalışmalar Pekin Üniversitesi Üçüncü Hastanesi kurumsal inceleme kurulu (IRB) ve Pekin Üniversitesi Etik Kurulu (2014S2004) tarafından onaylanmıştır. OP-IVM'nin bir özeti Şekil 1'de gösterilmiştir. Adım adım yordam aşağıdaki bölümde tanıtılacaktır.

1. OP-IVM'nin uygun hastalara tanıtılması

  1. 1.1.1-1.1.3. adımlarda açıklananlar gibi OP-IVM'den yararlanabilecek potansiyel hastaları belirleyin:
    1. Klomiphene direnci olan ve laparoskopik yumurtalık delme ameliyatına ihtiyaç duyan polikistik over sendromu (PKOS) hastaları.
    2. ART tedavisinden önce histoskopik miyotektomi, polipektomi, septum ve laparoskopik tubal cerrahinin transerviktal rezeksiyonu ve ophorosistektomi gibi iyi huylu jinekolojik ameliyatlara ihtiyaç duyan infertil hastalar.
    3. Kemoradyoterapi veya radyoterapi alan kanser veya hematolojik hastalığı olan hastalar.

2. Bilgilendirilmiş onay

  1. OP-IVM'nin neden faydalı olabileceği, prosedürü, IVM oositlerinin (IVF-ET veya kriyoprezervasyon) kullanımı, tahmini CPR'ler ve LBR'ler ve olası komplikasyonlar dahil olmak üzere hastalara tam bilgi sağlayın. Hastalardan onay formunu imzalayarak bilinçli onay vermelerini isteyin.

3. Etiketleri ve IVM oosit ortamını hazırlayın

  1. Kültür yemekleri ve tüpler için hastanın adının ve tarihlerinin yazılı olduğu kimlik (kimlik) etiketlerini yazdırın.
  2. 4 kuyulu bir plakanın her kuyusuna 0.075 IU/mL folikül uyarıcı hormon (FSH) ve 0.075 IU/mL luteinize edici hormon (LH) ile desteklenmiş 0.5 mL IVM ortamı ekleyin. Ortamı yağ ile örtün.
    NOT: Tüm bu işlemleri laminer akışlı temiz banklarda gerçekleştirin.
  3. 37 °C'de IVM oosit orta boylu 4 kuyulu plakayı, kullanımdan önce %5 CO2 ve %5 O2 içeren nemlendirilmiş havada ön ısıtma.

4. Ameliyathanede anestezi uygulamak

  1. Anestezi uygulamadan önce hastanın adını kontrol edin.
  2. Anestezi uzmanı tarafından intravenöz anestezik hastaya uyuşturun.

5. Oosit alma işlemi gerçekleştirin

  1. Etiketleri kültür yemeklerinde ve tüplerinde ad, tarih ve kimlikle etiketleyin.
  2. Hastayı mesane litotomi pozisyonuna yerleştirin; vajinayı sürekli dezenfekte edin, örtün ve ılık salinle ovalayın.
  3. Ultrason probünü vajinanın içine yerleştirin; her iki yumurtalıktaki folikül sayısını tarayın ve kaydedin. Delinme bölgesi olarak yumurtalığa en yakın yeri bulun ve bağırsak, mesane ve büyük kan damarlarından kaçının.
  4. Foliküler sıvıyı aspirat.
    1. Delinmeden önce iğneyi pH kararlı taşıma ortamı ile yıkayın (bkz. Malzeme Tablosu).
    2. Ultrason rehberliğinde yumurtalıklara 19 G, tek lümen aspirasyon iğnesi enjekte edin.
    3. Proba en yakın net sınırlara sahip daha büyük folikülleri delin. Düşük bir konumda, 25 U/mL heparin ile desteklenmiş durulama çözeltisini hızlı bir şekilde enjekte edin. Foliküler sıvıyı 80-90 mmHg basınç altında iğne ile aspire edin, iğneyi mümkün olduğunca fazla foliküler sıvıyı epire etmek için hafifçe döndürün. Bu düzlemde diğer folikülleri yakın mesafeden delin.
      NOT: Aspirasyon sırasında, oosit içeren foliküler sıvı negatif basınç altında steril 10 mL test tüpüne akacaktır. Heparin, aspirasyon sürecini kolaylaştırmak için foliküler sıvı viskozitesini azaltabilir.
    4. İğneyi yumurtalıktan çıkarın (iğneyi vajinal duvarda tutun). Ultrason probunun yönünü ayarlayın ve diğer düzlemlerde kalan folikülleri delin. ~5-9 mm çapında tüm folikülleri aspire etmeye çalışın.
      NOT: Probun konumunu yumurtalıklara her zaman en yakın tutacak şekilde ayarlayın. Yaralanmayı ve kanamayı azaltmak için vajinal fornix'e uygun kuvvetle bastırın.
    5. Bir yumurtalıkta bitirdikten sonra iğneyi çekin, iğneyi taşıma ortamıyla yıkayın ve aynı yöntemi kullanarak diğer tarafı delin.
      NOT: 25-30 dakika içinde komple folikül aspirasyonu.
  5. Foliküler sıvıyı hastanın adını ve kimliği doğrulandıktan sonra birkaç dakika içinde ameliyat odasından tüp bebek laboratuvarına aktarın.
    NOT: Koagülasyonu önlemek için aspire foliküler sıvıyı en kısa sürede IVF laboratuvar tezgahına aktarın.
  6. Tüm folikülleri deldikten sonra B-mod ultrason ile pelvik boşlukta aktif kanamayı tespit edin. Bir spekulum yerleştirin ve delinme yerindeki aktif kanamayı tespit etmek için ucu arka fornix'e doğru yöneltin.
    NOT: Yumurtalık pozisyonu normalse ve oosit alımı dikkatli bir şekilde yapılırsa vajinal delinme yerinde aktif kanama görülmemelidir. Sıkıştırmadan sonra bile devam eden hafif kanamalar için vajinada steril bir gazlı bez kompresini 2-4 saat tutun. 2-4 saat boyunca damar forsepsli kelepçeler kullanarak küçük arterlerden aşırı kanamayı kontrol edin. Nadiren olan pelvik boşluk veya yumurtalıktaki kanamalar laparoskopik cerrahi ile elektrokoagülasyon ile kontrol altına alınmalıdır.

6. Jinekolojik cerrahi

  1. Hastanın ihtiyacına ve durumuna göre, oosit alımından sonra uygun jinekolojik cerrahiyi gerçekleştirin.
    1. Klomiphene direnci olan polikistik over sendromu (PKOS) hastaları için laparoskopik yumurtalık delme ameliyatı gerçekleştirin.
    2. Histoskopik miyotektomi, polipektomi, septum ve laparoskopik tubal cerrahinin transerviktal rezeksiyonu ve ophorosistektomi gibi ART tedavisinden önce infertil hastalar için iyi huylu jinekolojik cerrahi gerçekleştirin.
    3. Kemoradyoterapi alması gereken kanser veya hematolojik hastalığı olan hastaların doğurganlık kriyoprezervasyonu için ovariektomi gerçekleştirin.
      NOT: Bu jinekolojik ameliyatlar temel ve standartlaştırılmış klinik operasyonlardır. Çeşitli ülkelerdeki ve hastanelerdeki operasyon kılavuzları nispeten benzer olmalıdır.

7. IVM gerçekleştirin

NOT: IVM'nin tüm işlemini 37 °C homotermal düzlükte gerçekleştirin.

  1. Emişli folikül sıvısını 70 μm naylon hücre süzgeci ile filtreleyin. Kültür tüpünü ve süzgeci önceden ısıtılmış pH-kararlı yol tutuş ortamı ile tekrar tekrar durulayın. Tüm olgunlaşmamış COC'lerin tamamen kültür çanağından aktarıldığından emin olun. Filtrelenmiş sıvıyı, durulamayı ve kültürü 100 x 15 mm Petri kabında toplayın.
  2. Stereoskop altındaki COC'leri (Şekil 2)40x büyütme ile inceleyin. Olgunlaşmamışları önceden ısıtılmış bir IVM oosit ortamına hızlı bir şekilde aktarın.
    NOT: Operatörün alışkanlığına bağlı olarak uygun bir büyütme seçin.
  3. Kültürlü olgunlaşmamış COC sayısını kaydedin.
  4. Hastayı kültürlü COC sayısı hakkında bilgilendirin. Hastalar ve partnerleri ile sperm toplamayı tartışın. Sperm ekstraksiyonu normal prosedüre göre gerçekleştirin.
  5. Olgunlaşmamış COC'leri 37 °C'de% 5 CO2 ve 28-32 saat boyunca% 5 O2 içeren nemli havada kültürlendir.
  6. Oosit olgunluğunu değerlendirin.
    1. 40x büyütme ile stereoskop altında bir cam Pasteur pipet kullanarak tekrarlanan pipetleme ile kümülüs hücrelerini denude. Oositlerin gelişim aşamasını tanımlamak için kutup gövdesinin (PB) ekstrüzyonunu inceleyin. COC'lerdeki oositlerin, metafaz II'nin (MII), metafaz I'in (MI) ve açık morfolojik özelliklere sahip germinal veziküllerin (GV) temsili görüntüleri için Şekil 2'ye bakın.
      NOT: Cam Pasteur pipetin çapını bir oosit boyutuna ayarlamak için dikey bir alev (örneğin, bir Bunsen brülörü) kullanın.
    2. MII oositlerini sayın ve sayıyı kaydedin.
    3. IVF veya vitrifikasyon için olgun oositler seçin.
      NOT: Oositlerin IVF için olgunlaştığı gün sperm toplayın, ancak oosit vitrifikasyonu için değil.
    4. Orijinal IVM kültür ortamında GV ve MI aşamasında olgunlaşmamış oositleri kümülüs hücreleriyle 10-14 saat daha kültür edin. 7.6.2-7.6.3 adımlarını yineleyin.

8. ICSI veya oosit vitrifikasyonu gerçekleştirin

  1. Üreme merkezinin standart prosedürünü izleyin8.

9. Embriyoları kültüre edin ve embriyo kriyoprezervasyonu gerçekleştirin

  1. Üreme merkezinin standart prosedürünü izleyin8.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Representative Results

Aralık 2019'a kadar OP-IVM 274 hastanın doğurganlık korunmasında kullanıldı. 2014-2016 yılları arasında 158 hastanın embriyolojik ve üreme sonuçları daha önceki bir makaledeyayınlanmıştır 8. Aşağıdaki örnekte, 2016 yılında OP-IVM alan bir PCOS hastası için izlenen prosedür açıklar. Hasta primer kısırlık, sol adneksal kist ve PKOS tanısı alan 28 yaşında bir hastadır. 28 Eylül 2016'da laparoskopik sistektomi ve OP-IVM aldı; 27 olgunlaşmamış COC elde edildi. 28 saat süren bir kültürden sonra, MII aşamasındaki 7 oosit ICSI tarafından seçildi ve döllendi. 1. günde kaliteli 2 çekirdek yanlısı (2PN) ve 3. günde embriyo sayısı ve 5. günde embriyo sayısı sırasıyla 6, 6 ve 2'ydi. 5. günde(4Ekim 2016) elde edilen blastosistler donduruldu. 14 Şubat2017'debir blastosist çözüldü. Bu çözülmüş blastula hayattaydı ve 14 Şubat2017'de uterusa transfer edildi. Kan insan koryonik gonadotropin (hCG) testinin sonuçları pozitif çıktı ve ultrasonografide intrauterin erken gebelik gösterildi. Hasta,2Kasım 2017'de 40 haftalıkken sezaryenle sağlıklı bir kız çocuğu dünyaya geldi.

Figure 1
Şekil 1: OP-IVM akış şeması. Jinekolojik cerrahiden önce transvajinal ultrason rehberliğinde IMFA yoluyla folikül sıvısı aspire edilir. Elde edilen folikül sıvısı tüp bebek laboratuvarına aktarılır, süzülir ve durulanır. Olgunlaşmamış COC'ler önceden ısıtılan bir IVM kültür çözümüne aktarılır ve 28-32 saat kültürlenir. PB ile olgun oositler kriyoprezervasyon veya IVF-ET için kullanılır. Kısaltmalar: IMFA = olgunlaşmamış folikül aspirasyonu; IVF = tüp bebek; IVF-ET = IVF ve embriyo transferi; COC'ler = kümülüs-oosit kompleksleri; IVM = in vitro olgunlaşma; OP-IVM = Jinekolojik bir operasyondan önce IVM; GV = germinal vezikül; MI = metafaz I; ICSI = intrasitoplazmik sperm enjeksiyonu; PB = kutup gövdesi; PN = çekirdek yanlısı; D1 = 1. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Figure 2
Şekil 2: Oositlerin temsili görüntülerinin morfolojik özellikleri. (A) COC'ler, (B) MII, (C) MI, (D) GV aşaması. Kısaltmalar: COC'ler = kümülüs-oosit kompleksleri; GV = germinal vezikül; MI = metafaz I; MII = metafaz II. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Discussion

Bu makalede açıklanan OP-IVM yöntemi konvansiyonel IVM uygulamalarına uzanır ve oosit alımından sonra IVM'yi rutin jinekolojik cerrahi ile birleştirir. Jinekolojik cerrahide kaybolacak oositler artık ek cerrahi riskler olmadan IVF-ET veya FP için kullanılabilir. OP-IVM ilk olarak PKOS hastalarında yumurtalık delmeden önce oositleri almak için kullanılmıştır. Uygulaması kısa sürede iyi huylu jinekolojik cerrahiye ve kanser veya hematolojik hastalık hastalarına ihtiyaç duyan ve kemoradyoterapiye ihtiyaç duyan infertil hastalara genişledi. Potansiyel metastaz riski nedeniyle OP-IVM kötü huylu tümörlü hastalar için uygun değildir veya önerilmez. OP-IVM'ye dayanarak, bu kurumda infertil hastaların ve kanser hastalarının FP'si için yeni bir Çin yumurta bankası modu kuruldu.

OP-IVM için hem jinekolojik cerrahinin aciliyeti hem de daha yüksek sayıda oosit elde etme potansiyeli göz önünde bulundurulmalıdır. Genel olarak, IVM sonucu, oosit alımı sırasında elde edilen olgunlaşmamış oosit sayısı ile pozitif olarak ilişkilidir9. Baskın foliküller, çevredeki küçük foliküllerin büyümesini engelleyebilir ve atrezi10'a neden olabilir , bu da alınan olgunlaşmamış oositlerin sayısının azalmasına neden olur. Bu nedenle, jinekolojik cerrahi acil değilse, OP-IVM için en iyi pencere, B-mod ultrasonografi ile az sayıda baskın folikül içeren daha fazla sayıda küçük folikül gözlenmesidir. Ek olarak, anti-Mullerian hormonu (AMH), alınan oositlerin sayısı AMH11 , 12ile önemli ölçüde pozitif olarak ilişkili olduğu için yumurtalık rezervini tahmin etmek için bir parametre olarak kullanılabilir. Jinekolojik operasyona öncelik verildiği durumlarda mümkün olduğunca çok sayıda olgunlaşmamış oosit alınmalıdır. Acil ameliyatlarda oosit alımı ve IVM hastanın durumuna ve iradesine göre dikkatle değerlendirilmelidir.

Transvajinal ultrason rehberliği altında IMFA, yumurtalık fonksiyonu13,14'everilen hasarı azaltabilen oositleri almak için kullanılan bir yöntemdir. Olgunlaşmamış oositleri aspirate etmek için laparoskopik yumurtalık delinmesi de bazı çalışmalarda kullanılmaktadır15. Bununla birlikte, laparoskopi ile karşılaştırıldığında, transvajinal ultrason altında IMFA daha az zaman alır, daha az invazivdir,16,17yapmak daha kolaydır ve daha hedefe yönelik folikül aspirasyonu elde edebilir. Bu nedenle, yumurtalık rezervi üzerindeki etkiyi en aza indirmek ve aspirasyon doğruluğunu artırmak için, OP-IVM'de okosit alımı için daha iyi bir yöntem olarak transvajinal ultrason rehberliği altındaki IMFA önerilir. Bununla birlikte, gübreleme için ICSI önerilir. Önceki çalışmalar, zona pellucida'nın uzun süre in vitro kültüre edildikten sonra sertleşeceğini ve başarılı döllenme oranının azalmasına neden olacağını göstermiştir18. ICSI'nin IVM oositlerinin doğal döngülerde döllenme oranını etkili bir şekilde iyileştirdiği gösterilmiştir19,20. Son çalışmalar ICSI ve IVF21 , 22için benzer döllenme oranları göstermiş olsa da, ICSI yumurtalık stimülasyonu yerine doğal döngüleri kullanma avantajına sahiptir. Toplanan embriyolar hazırlıksız endometrium nedeniyle dondurulur ve embriyo transferi daha sonra her merkezde standart prosedüre göre yapılabilir.

ART'ın amacı kısırlığı tedavi etmek ve sağlıklı bebekler doğurmaktır. OP-IVM'nin üreme sonuçları hakkında yapılan önceki araştırmalar, alınan oositlerin ve oosit olgunlaşma oranlarının sayısının FSH ve hCG kullanılarak geleneksel IVM döngüleri için gözlenenlerle karşılaştırılabilir olduğunu göstermiştir. Bununla birlikte, OP-IVM geleneksel IVM 8 , 23,24,25'tendaha düşük bir CPR ve daha düşük birLBR'yesahiptir. Bu, olgunlaşmamış oositlerin doğal döngülerdeki zayıf gelişim potansiyeli nedeniyle kısıtlı oosit olgunlaşması ile açıklanabilir. Ancak hormon stimülasyonu, tedaviyi alamayan veya alacak zamanı olmayan bazı hastalar için bir seçenek değildir. Ek olarak, vitrifikasyon oositlerin gelişim potansiyeline zarar verebilir, bu da düşük CPR'ler ve LBR'ler26,27.

Ayrıca, gonadotropinler yumurtalıkları büyütebilir ve okosit alımı sırasında kanama riskini artırabilir ve laparoskopide ameliyat alanlarının maruziyetini olumsuz yönde etkileyebilir. OP-IVM yönteminin LBR'si nispeten düşüktür. Op-IVM sonuçlarını iyileştirmek için en iyi çalışma zamanlamasını incelemek ve IVM kültür sistemini değiştirmek için daha fazla çalışmaya ihtiyaç vardır. Genel olarak, OP-IVM IVM'yi jinekolojik cerrahi ile birleştirir, böylece hasar görmüş veya atılmış olgunlaşmamış oositler kaydedilebilir ve ART için kullanılabilir. OP-IVM, yumurtalık uyarıcı ilaçların neden olduğu komplikasyonlardan kaçınmanın ve kısırlık tedavisi için operasyon sayısını azaltmanın avantajlarına sahiptir. Bu nedenle OP-IVM, belirli hastalar için potansiyel olarak değerli bir tedavi yöntemi olarak değerlendirilmeli ve etkilerini ve sonuçlarını daha iyi anlamak için daha derinlemesine çalışılmalıdır.

Subscription Required. Please recommend JoVE to your librarian.

Disclosures

Yazarların açıklayacak bir şeyi yok.

Acknowledgments

Bu çalışma Çin Ulusal Anahtar Ar-Ge Programı'ndan (no. 2017YFC1002000) hibelerle desteklendi. 2018YFC1004001, 2019YFA0801400), Çin Ulusal Bilim Vakfı (81571386 no. 81730038), CAMS Tıp Bilimleri İnovasyon Fonu (2019-I2M-5-001) ve Çin Sermaye Sağlığını Geliştirme Özel Araştırma Projesi (2018-2-4095).

Materials

Name Company Catalog Number Comments
19 G single-lumen aspiration needles Cook, Australia K-OPS-7035-REH-ET
4-well plate Corning
70 μm nylon cell strainer Falcon, USA 352350
CO2 Incubator Thermo
Culture oil Vitrolife, Sweden 10029,OVOIL  Step 3.2.
FSH & LH Ferring Reproductive Health, Germany MENOPUR®
Glass Pasteur pipette Hilgenberg GmbH, Germany 3154102-26
G-MOPS medium pH-stable handling medium for washing the needle before puncturing
IVM medium Origio, Denmark ART-1600-B
Laminar Flow Clean Benches ESCO
Petri dish Thermo Fisher Scientific, Denmark 263991
pH stable handing media designed to support the handling and manipulation of oocytes and embryos outside the incubator Vitrolife, Sweden 10130, G-MOPS PLUS Step 7.1.
Rinse solution Cook, Australia K-SIFB-100
Stereoscope Nikon

DOWNLOAD MATERIALS LIST

References

  1. Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
  2. Yang, Z. Y., Chian, R. C. Development of in vitro maturation techniques for clinical applications. Fertility and Sterility. 108 (4), 577-584 (2017).
  3. Hatirnaz, S., et al. Oocyte in vitro maturation: A sytematic review. Turkish Journal of Obstetrics and Gynecology. 15 (2), 112-125 (2018).
  4. Gremeau, A. S., et al. In vitro maturation or in vitro fertilization for women with polycystic ovaries? A case-control study of 194 treatment cycles. Fertility and Sterility. 98 (2), 355-360 (2012).
  5. Ho, V. N. A., Braam, S. C., Pham, T. D., Mol, B. W., Vuong, L. N. The effectiveness and safety of in vitro maturation of oocytes versus in vitro fertilization in women with a high antral follicle count. Human Reproduction. 34 (6), 1055-1064 (2019).
  6. Sahin, C., et al. Which should be the preferred technique during laparoscopic ovarian cystectomy. Reproductive Sciences. 24 (3), 393-399 (2017).
  7. Xiao, J., et al. Impact of hemostatic methods on ovarian reserve and fertility in laparoscopic ovarian cystectomy. Experimental and Therapeutic. 17 (4), 2689-2693 (2019).
  8. Song, X. -L., et al. Enhancing the scope of in vitro maturation for fertility preservation: transvaginal retrieval of immature oocytes during endoscopic gynaecological procedures. Human Reproduction. 35 (4), 837-846 (2020).
  9. Magnusson, Å, Källen, K., Thurin-Kjellberg, A., Bergh, C. The number of oocytes retrieved during IVF: a balance between efficacy and safety. Human Reproduction. 33 (1), 58-64 (2018).
  10. Larose, H., et al. Gametogenesis: A journey from inception to conception. Current Topics in Developmental Biology. Wellik, D. M., et al. 132, Academic Press. 257-310 (2019).
  11. Broer, S. L., Broekmans, F. J. M., Laven, J. S. E., Fauser, B. C. J. M. Anti-Müllerian hormone: ovarian reserve testing and its potential clinical implications. Human Reproduction Update. 20 (5), 688-701 (2014).
  12. Arce, J. C., La Marca, A., Mirner Klein, B., Nyboe Andersen, A., Fleming, R. Antimüllerian hormone in gonadotropin releasing-hormone antagonist cycles: prediction of ovarian response and cumulative treatment outcome in good-prognosis patients. Fertility and Sterility. 99 (6), 1644-1653 (2013).
  13. Katayama, K. P., et al. Ultrasound-guided transvaginal needle aspiration of follicles for in vitro fertilization. Obstetrics and Gynecology. 72 (2), 271-274 (1988).
  14. Dellenbach, P., et al. Transvaginal sonographically controlled follicle puncture for oocyte retrieval. Fertility and Sterility. 44 (5), 656-662 (1985).
  15. Hirata, T., et al. Concomitant ovarian drilling and oocyte retrieval by laparoendoscopic single-site surgery led to live birth using in vitro maturation of oocyte and transfer of frozen-thawed blastocyst in woman with polycystic ovary syndrome. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 40 (5), 1431-1435 (2014).
  16. Deutinger, J., et al. Follicular aspiration for in vitro fertilization: sonographically guided transvaginal versus laparoscopic approach. European Journal of Obstetrics, Gynecology, and Reproductive Biology. 26 (2), 127-133 (1987).
  17. Tanbo, T., Henriksen, T., Magnus, O., Abyholm, T. Oocyte retrieval in an IVF program. A comparison of laparoscopic and transvaginal ultrasound-guided follicular puncture. Acta Obstetricia et Gynecologica Scandinavica. 67 (3), 243-246 (1988).
  18. Nagy, Z. P., et al. Pregnancy and birth after intracytoplasmic sperm injection of in vitro matured germinal-vesicle stage oocytes: case report. Fertility and Sterility. 65 (5), 1047-1050 (1996).
  19. Söderström-Anttila, V., Mäkinen, S., Tuuri, T., Suikkari, A. -M. Favourable pregnancy results with insemination of in vitro matured oocytes from unstimulated patients. Human Reproduction. 20 (6), 1534-1540 (2005).
  20. Hwang, J. L., Lin, Y. H., Tsai, Y. L. In vitro maturation and fertilization of immature oocytes: a comparative study of fertilization techniques. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 17 (1), 39-43 (2000).
  21. Walls, M., Junk, S., Ryan, J. P., Hart, R. IVF versus ICSI for the fertilization of in-vitro matured human oocytes. Reproductive Biomedicine Online. 25 (6), 603-607 (2012).
  22. Park, J. H., Jee, B. C., Kim, S. H. Comparison of normal and abnormal fertilization of in vitro-matured human oocyte according to insemination method. Journal of Obstetrics and Gynaecology Research. 42 (4), 417-421 (2016).
  23. Ho, V. N. A., Pham, T. D., Le, A. H., Ho, T. M., Vuong, L. N. Live birth rate after human chorionic gonadotropin priming in vitro maturation in women with polycystic ovary syndrome. Journal of Ovarian Research. 11 (1), 70 (2018).
  24. Zheng, X., et al. Effect of hCG priming on embryonic development of immature oocytes collected from unstimulated women with polycystic ovarian syndrome. Reproductive Biology and Endocrinology. 10, 40 (2012).
  25. Tannus, S., et al. Predictive factors for live birth after in vitro maturation of oocytes in women with polycystic ovary syndrome. Archives of Gynecology and Obstetrics. 297 (1), 199-204 (2018).
  26. Cohen, Y., et al. Decreased pregnancy and live birth rates after vitrification of in vitro matured oocytes. Journal of Assisted Reproduction and Genetics. 35 (9), 1683-1689 (2018).
  27. Yazdanpanah, F., Khalili, M. A., Eftekhar, M., Karimi, H. The effect of vitrification on maturation and viability capacities of immature human oocytes. Archives of Gynecology and Obstetrics. 288 (2), 439-444 (2013).

Tags

Tıp Sayı 171 IVM doğurganlık koruma transvajinal geri alma endoskopik jinekolojik prosedürler PKOS

Erratum

Formal Correction: Erratum: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery
Posted by JoVE Editors on 06/26/2023. Citeable Link.

An erratum was issued for: OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. The Protocol and Representative Results sections were updated.

Step 3.2 of the Protocol was updated from:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.075 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.075 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

to:

Add 0.5 mL of IVM medium supplemented with 0.75 IU/mL of follicle-stimulating hormone (FSH) and 0.75 IU/mL of luteinizing hormone (LH) to each well of a 4-well plate. Cover the medium with oil.

The legend for Figure 2 was updated from:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) MII, (C) MI, (D) GV stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

to:

Figure 2: Morphological characteristics of representative images of oocytes. (A) COCs, (B) GV, (C) MI, (D) MII stage. Abbreviations: COCs = cumulus-oocyte complexes; GV = germinal vesicle; MI = metaphase I; MII = metaphase II.

OP-IVM: Oosit Alımından Sonra In vitro Olgunlaşmayı Jinekolojik Cerrahi ile Birleştirmek
Play Video
PDF DOI DOWNLOAD MATERIALS LIST

Cite this Article

Liu, T., Song, X., Zheng, X., Yan,… More

Liu, T., Song, X., Zheng, X., Yan, L., Ma, C., Li, R., Yan, J., Qiao, J. OP-IVM: Combining In vitro Maturation after Oocyte Retrieval with Gynecological Surgery. J. Vis. Exp. (171), e61647, doi:10.3791/61647 (2021).

Less
Copy Citation Download Citation Reprints and Permissions
View Video

Get cutting-edge science videos from JoVE sent straight to your inbox every month.

Waiting X
Simple Hit Counter