Implantation d’échafaudage à matrice de collagène tridimensionnelle comme stratégie de régénération du foie

Summary

Les maladies du foie sont induites par de nombreuses causes qui favorisent la fibrose ou la cirrhose. La transplantation est la seule option pour retrouver la santé. Cependant, étant donné la rareté des organes transplantables, des alternatives doivent être explorées. Notre recherche propose l’implantation d’échafaudages de collagène dans le tissu hépatique à partir d’un modèle animal.

Abstract

Les maladies du foie sont la principale cause de décès dans le monde. Une consommation excessive d’alcool, un régime riche en graisses et une infection par le virus de l’hépatite C favorisent la fibrose, la cirrhose et / ou le carcinome hépatocellulaire. La transplantation hépatique est la procédure cliniquement recommandée pour améliorer et prolonger la durée de vie des patients à un stade avancé de la maladie. Cependant, seulement 10% des greffes sont réussies, avec la disponibilité des organes, les procédures préchirurgicales et postchirurgicales, et les coûts élevés directement corrélés avec ce résultat. Les échafaudages à matrice extracellulaire (ECM) sont apparus comme une alternative pour la restauration des tissus. La biocompatibilité et l’acceptation des greffons sont les principales caractéristiques bénéfiques de ces biomatériaux. Bien que la capacité de restaurer la taille et la fonction correcte du foie ait été évaluée dans des modèles d’hépatectomie hépatique, l’utilisation d’échafaudages ou d’une sorte de support pour remplacer le volume de la masse hépatique disparue du pays n’a pas été évaluée.

Une hépatectomie partielle a été réalisée dans un foie de rat avec la xénoimplantation d’un échafaudage à matrice de collagène (CMS) d’un condyle bovin. Le tissu du lobe hépatique gauche a été enlevé (environ 40%) et une proportion égale de CMS a été implantée chirurgicalement. Les tests de la fonction hépatique ont été évalués avant et après l’intervention chirurgicale. Après les jours 3, 14 et 21, les animaux ont été euthanasiés et des évaluations macroscopiques et histologiques ont été effectuées. Aux jours 3 et 14, du tissu adipeux a été observé autour de la CMS, sans signe clinique de rejet ou d’infection, tout comme la néoformation des vaisseaux et la réabsorption de la CMS au jour 21. Il y avait des preuves histologiques d’un processus d’inflammation insignifiant et de la migration des cellules adjacentes vers le CMS, observé avec l’hématoxyline et l’éosine (H & E) et la coloration trichrome de Masson. Il a été démontré que le CMS fonctionne bien dans le tissu hépatique et pourrait être une alternative utile pour étudier la régénération et la réparation des tissus dans les maladies hépatiques chroniques.

Introduction

Le foie est l’un des organes les plus importants impliqués dans le maintien de l’homéostasie et de la production de protéines¹. Malheureusement, les maladies du foie sont la principale cause de décès dans le monde. Aux stades avancés des lésions hépatiques, qui comprennent la cirrhose et le carcinome hépatocellulaire, la transplantation hépatique est la procédure cliniquement recommandée. Cependant, en raison de la rareté des donneurs et du faible taux de greffes réussies, de nouvelles techniques en génie tissulaire (TE) et en médecine régénérative (RM) ont été développées^2,3.

Protocol

La présente recherche a été approuvée par le comité d’éthique de l’École de médecine (DI/115/2015) de l’Universidad Nacional Autónoma de México (UNAM) et le comité d’éthique de l’Hôpital général de Mexico (CI/314/15). L’institution répond à toutes les spécifications techniques pour la production, l’entretien et l’utilisation des animaux de laboratoire et est légalement certifiée par la législation nationale (NOM-062-ZOO-1999). Des rats Wistar mâles pesant de 150 à 250 g (âgés de 6 à 8 semaines) ont été obtenus auprès de l’installation pour animaux de laboratoire de l’École de médecine de l’UNAM pour cette étude.

1. Obtention d’échafaudages à ....

Results

La déminéralisation osseuse affecte les propriétés mécaniques du CMS sans altérer la forme d’origine ou l’interconnexion de sespores. CMS peut avoir n’importe quelle forme, et par conséquent, peut être ajusté à la taille et à la forme de l’organe ou du tissu sélectionné¹⁹. Dans le protocole actuel, nous avons utilisé un CMS triangulaire (Figure 1A-D). Un modèle de rat a été utilisé pour évaluer la capacité de régénér.......

Discussion

La transplantation d’organes est le pilier du traitement chez les patients atteints de fibrose hépatique ou de cirrhose. Quelques patients bénéficient de cette procédure, ce qui rend nécessaire de fournir des alternatives thérapeutiques aux patients sur la liste d’attente. L’ingénierie tissulaire est une stratégie prometteuse qui utilise des échafaudages et des cellules à potentiel de régénération^2,4,13. L’ablation d’une partie .......

Materials

List of materials used in this article

Name	Company	Catalog Number	Comments
Détergent anionique	Alconox	Z273228
Cassettes de biopsie	Leica
Appareil photo DMX	Nikon	DXM1200F
Centrifugeuse	Eppendorf	5424
Gluconate de chlorhexidine 4 %	BD	372412
Verres de protection 25 mm x 40 mm	Corning	2980-224
Eosin	Sigma-Aldrich	200-M	CAS 17372-87-1
Alcool éthylique pur	Sigma-Aldrich	459836	CAS 64-17-5
Méglimide de flunixine	MSD	Q-0273-035
Lames de verre 75 mm x 25 mm	Corning	101081022
Hématoxyline	Merck	H9627	CAS 571-28-2
Acide chlorhydrique 37 %	Merck	339253	CAS 7647-01-0
Kétamine	Pisa agropecuaria	Q-7833-028
Microscope optique	Nikon	Microphoto-FXA
Microchirurgie stéréomicroscope	Zeiss	OPMI F170
Microtainer cape jaune	Beckton Dickinson	365967
Microtome	Leica	RM2125
Animal modèle : rats Wistar	Universidad Nacional Autó ; noma de Mé ; xico
Nylon 3-0 (Dermalon)	Covidien	1750-41
Polypropylène 7-0	Atramat	SE867/2-60
Povidone-iodeSolution cutanée à 10 %	Diafra SA de CV	1.37E+86
Microscope électronique à balayage	Zeiss	DSM-950
Hydroxyde de sodium, granulés J	. T. Baker	3722-01	CAS 1310-73-2
Logiciel ACT-1	Nikon	Ver 2.70
Stéréomicroscope	Leica	EZ4Stereo 8X-35X
Sterrad 100S	Johnson and Johnson	99970
Surgipath paraplast	Leica	39601006
Synringe de 1 mL avec aiguille (27G x 13 mm)	SensiMedical	LAN-078-077
Processeur de tissus ( Histokinette)	Leica	TP1020
Tissue-Tek TEC 5 (Enfonceur de tissu)	Sakura Finetek USA	5229
Kit de coloration trichrome	Sigma-Aldrich	HT15
Unicell DxC600 Analyzer	Beckman Coulter	BC 200-10
Xylazine	Pisa agropecuaria	Q-7833-099
Xylene	Sigma-Aldrich	534056	CAS 1330-20-7