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Article de méthode

Mesure de la thermogenèse des muscles squelettiques chez la souris et le rat

3K vues

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DOI :

10.3791/64264

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27 juillet 2022

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Dans cet article

Résumé

Les souris et les rats sont implantés chirurgicalement avec des transpondeurs de température à distance, puis habitués à l’environnement et à la procédure de test. Les changements de température musculaire sont mesurés en réponse à des stimuli pharmacologiques ou contextuels dans la cage familiale ou pendant l’activité physique prescrite (c.-à-d. la marche sur tapis roulant à une vitesse constante).

Résumé

La thermogenèse des muscles squelettiques offre une avenue potentielle pour mieux comprendre l’homéostasie métabolique et les mécanismes sous-jacents à la dépense énergétique. Étonnamment, peu de preuves sont disponibles pour relier les mécanismes neuronaux, myocellulaires et moléculaires de la thermogenèse directement aux changements mesurables de la température musculaire. Cet article décrit une méthode dans laquelle des transpondeurs de température sont utilisés pour récupérer des mesures directes de la température des muscles squelettiques de souris et de rats.

Des transpondeurs à distance sont implantés chirurgicalement dans le muscle des souris et des rats, et les animaux ont le temps de récupérer. Les souris et les rats doivent ensuite être habitués à plusieurs reprises à l’environnement et à la procédure de test. Les changements de température musculaire sont mesurés en réponse à des stimuli pharmacologiques ou contextuels dans la cage domestique. La température musculaire peut également être mesurée pendant l’activité physique prescrite (c.-à-d. la marche sur tapis roulant à une vitesse constante) pour tenir compte des changements d’activité qui contribuent aux changements de température musculaire induits par ces stimuli.

Cette méthode a été utilisée avec succès pour élucider les mécanismes sous-jacents au contrôle thermogénique musculaire au niveau du cerveau, du système nerveux sympathique et du muscle squelettique. Des démonstrations de ce succès sont fournies en utilisant l’odeur de prédateur (PO; odeur de furet) comme stimulus contextuel et des injections d’ocytocine (Oxt) comme stimulus pharmacologique, où l’odeur de prédateur induit la thermogenèse musculaire et Oxt supprime la température musculaire. Ainsi, ces ensembles de données montrent l’efficacité de cette méthode dans la détection des changements rapides de température musculaire.

Introduction

Dans le cadre de la recherche métabolique, l’examen de la thermogenèse des muscles squelettiques est une nouvelle avenue prometteuse pour sonder l’homéostasie du poids corporel. La littérature publiée soutient l’idée que les réponses thermogéniques de l’un des plus grands systèmes organiques du corps – le muscle squelettique – fournissent un moyen d’augmenter la dépense énergétique et d’autres effets métaboliques, rééquilibrant ainsi efficacement les systèmes au sein de maladies telles que l’obésité 1,2,3. Si le muscle peut être considéré comme un organe thermogénique, les ét....

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Protocole

Ces méthodes peuvent être appliquées à des modèles de rats et de souris et ont été réalisées avec l’approbation institutionnelle (Kent State University, IACUC Approval #359 et #340 CN 12-04). Avant la mise en œuvre du protocole, les animaux devraient être logés conformément au Guide sur le soin et l’utilisation des animaux de laboratoire.

1. Préparation du lecteur de transpondeur

REMARQUE: Avant utilisation, le lecteur de transpondeur doit être réglé; Les étapes suivantes incluent uniquement les modifications de paramètres nécessaires pour cette étude. Cette partie du protocole est directe....

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Résultats

Des transpondeurs ont été implantés unilatéralement dans le gastrocnémien droit de dix souris de type sauvage (WT) âgées de 4 à 6 mois issues de la souche SF1-Cre (Tg(Nr5a1-cre)7Lowl/J, souche #012462, C57BL/6J et FVB; femelle N = 5; mâle N = 5). Après la récupération, les souris étaient habituées à une procédure d’analyse de la température de la cage domestique qui n’incluait pas de stimulus contextuel (p. ex. PO). Les mesures de température à l’aide d’une baguette transpondeur ont été enregistrées dans leur salle d’hab.......

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Discussion

Ce protocole de test de température fournit au domaine un moyen de mesurer directement la thermogenèse des muscles squelettiques. Ceci est essentiel alors que la recherche se penche sur l’identification des mécanismes sous-jacents à la thermogenèse musculaire33. La méthode fournit deux protocoles rentables pour mesurer la thermogenèse des muscles squelettiques dans des conditions contextuelles et pharmacologiques. Ce protocole souligne l’importance de l’accoutumance et de l’acclimatation dans le c.......

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Déclarations de divulgation

Les auteurs déclarent n’avoir aucun conflit d’intérêts.

Remerciements

Ce travail est soutenu par R15 DK097644 et R15 DK108668. Nous remercions la Dre Chaitanya K Gavini et la Dre Megan Rich pour leurs contributions antérieures et le Dr Stanley Dannemiller pour avoir veillé à ce que nous respections les lignes directrices institutionnelles sur l’utilisation des animaux. Un merci spécial au Dr Tim Bartness pour avoir fourni la recherche fondamentale nécessaire à la construction de cette méthode et des études associées. Les figures 1A, C, D et 2A ont été créées à l’aide de Biorender.com.

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Matériaux

Liste des matériaux utilisés dans cet article
NomEntrepriseNuméro de catalogueCommentaires
1012M-2 Tapis roulant métabolique modulaire fermé pour souris, 2 voies avec ShockColumbus Instruments
1012R-2 Tapis roulant métabolique modulaire fermé pour rats, 2 voies avec ShockColumbus Instruments
1-1/4 po. Coupe-PVC à cliquetBrassCraft
Seringues de 1 mLFisher ScientificBD 309659
Écouvillons en bétadineFisher Scientific19-898-945
Bobine d’appointBioMedic Data SystemsTranspondeur Accessoire
Tondeuse électriqueAndis40 Ultraedge Clipper Blade
Feuilles de miroir flexiblesAmazonCarrelage miroir non en verre auto-adhésif
PinceFisher Scientific89259-940
Chambre d’induction
RXKETO-50
Bandes magnétiquesAmazon
MagnetsAmazonDIYMAG Crochets magnétiques 40lbs
AiguillesMed-Vet Intl.26400
Néomycine/Polymixine/Bacitracine avec hydrocortisone Pommade ophtalmique à l’hydrocortisone, 3,5 gMed-Vet Intl.RXNPB-HC
Suture résorbable OasisMed-Vet Intl.MV-H821-V
Predator (Ferret) Serviettes anti-odeursMarshall BioResources
Tuyau
Reflex Clip Wound RemoverCellPoint Scientific
Clip de plaie, 7 mm (souris)Clip CellPoint Scientific
Reflex, 9 mm (rat)CellPoint Scientific
Srerile Autoclip, 7 mm (souris)CellPoint ScientificWound Clip Applier (souris)
Passoires en acier inoxydable Assaisonnements à intervalles Infuseur à théAmazon
Sterile Autoclip, 9 mm (rat)CellPoint ScientificWound Clip Applier (rat)
Sterile SalineMed-Vet Intl.RX0.9NACL-10
Ciseaux chirurgicauxFisher Scientific08-951-5
Draps
Serviettes (Contrôle/Habituation)Amazon100 % Cotton Towels,
blanc TranspondeursBioMedic Data SystemsModèle : IPTT-300
Transpondeurs ReaderBioMedic Data SystemsModèle : DAS-8027-IUS/ DAS-7007R
VersacleanFisher Scientific18-200-700détergent
liquide Webcol Alcohol PrepsCovidien22-246-073  ;
Pièces de coin pour tuyau
de coussin chauffant (isoflurane)Kent Scientific VetFlo-0730 3.0 L Chambres à faible coût pour vaporisateurs traditionnels Ketoprophen Med-Vet Intl.en PVCchirurgicaux en PVC

Références

  1. Periasamy, M., Herrera, J. L., Reis, F. C. G. Skeletal muscle thermogenesis and its role in whole body energy metabolism. Diabetes Metabolism Journal. 41 (5), 327-336 (2017).
  2. Rowland, L. A., Bal, N. C., Periasamy, M.

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Réimpressions et autorisations

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