आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल में ऑर्थोटोपिक एटीसी ट्यूमर के विश्लेषण के लिए उच्च-रिज़ॉल्यूशन अल्ट्रासोनोग्राफी
Summary
वर्तमान प्रोटोकॉल पूरे माउस थायरॉयड ग्रंथि को देखने और एनाप्लास्टिक थायराइड कार्सिनोमा के विकास की निगरानी के लिए उच्च आवृत्ति अल्ट्रासोनोग्राफी का वर्णन करता है।
Abstract
एनाप्लास्टिक थायराइड कार्सिनोमा (एटीसी) एक खराब रोग का निदान और कम औसत जीवित रहने के समय से जुड़ा हुआ है, लेकिन कोई प्रभावी उपचार परिणामों में काफी सुधार नहीं करता है। आनुवंशिक रूप से इंजीनियर मुराइन मॉडल जो एटीसी की प्रगति की नकल करते हैं, शोधकर्ताओं को इस बीमारी के उपचार का अध्ययन करने में मदद कर सकते हैं। चूहों के तीन अलग-अलग जीनोटाइप को पार करते हुए, एक टीपीओ-सीआरई / ईआरटी 2; ब्रैफसीए / Trp53 त्रिभुज 2-10/त्रिभुज 2-10 ट्रांसजेनिक ATC मॉडल विकसित किया गया था। एटीसी मुराइन मॉडल को ब्रैफवी 600 ई के ओवरएक्प्रेशन और टीआरपी 53 के विलोपन के साथ टैमोक्सीफेन के इंट्रापरिटोनियल इंजेक्शन द्वारा प्रेरित किया गया था, और ट्यूमर लगभग 1 महीने के भीतर उत्पन्न हुए थे। ट्यूमर दीक्षा और प्रगति की जांच के लिए उच्च-रिज़ॉल्यूशन अल्ट्रासाउंड लागू किया गया था, और ट्यूमर के आकार को मापकर गतिशील विकास वक्र प्राप्त किया गया था। चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग (एमआरआई) और कंप्यूटेड टोमोग्राफी स्कैनिंग की तुलना में, अल्ट्रासाउंड में एटीसी मुराइन मॉडल को देखने में फायदे हैं, जैसे कि गैर-आक्रामक, पोर्टेबल, वास्तविक समय में और विकिरण जोखिम के बिना। उच्च-रिज़ॉल्यूशन अल्ट्रासाउंड गतिशील और कई मापों के लिए उपयुक्त है। हालांकि, चूहों में थायरॉयड की अल्ट्रासोनोग्राफिक परीक्षा के लिए प्रासंगिक शारीरिक ज्ञान और अनुभव की आवश्यकता होती है। यह लेख ट्रांसजेनिक एटीसी मॉडल में ट्यूमर को स्कैन करने के लिए उच्च-रिज़ॉल्यूशन अल्ट्रासाउंड का उपयोग करने के लिए एक विस्तृत प्रक्रिया प्रदान करता है। इस बीच, अल्ट्रासोनिक पैरामीटर समायोजन, अल्ट्रासाउंड स्कैनिंग कौशल, संज्ञाहरण और जानवरों की वसूली, और अन्य तत्व जिन्हें प्रक्रिया के दौरान ध्यान देने की आवश्यकता होती है, सूचीबद्ध हैं।
Introduction
हालांकि एनाप्लास्टिक थायराइड कार्सिनोमा (एटीसी) थायराइड कैंसर के 2% से कम के लिए जिम्मेदार है, यह सालाना 50% से अधिक थायराइड कैंसर से संबंधित मौतों का कारण बनता है। एटीसी के साथ निदान के बाद औसत जीवित रहने का समय केवल 6 महीने है, और कोई उपचार उपलब्ध नहीं है जो अस्तित्वमें काफी सुधार करता है 1,2.
एटीसी की दुर्लभता ने अनुसंधान में बाधा डाली है कि बीमारी कैसे शुरू होती है और आक्रामक रूप से प्रगति करती है। आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल जो बीमारी की नकल करते हैं, हाल ही में उपलब्ध हो गए हैं, जो रोग में अंतर्दृष्टि प्रदान करते हैं और संभावित उपचार 3,4,5 के लिए इसकी प्रतिक्रियाएं प्रदान करते हैं। इस तरह के अध्ययनों को माप और निगरानी के लिए सटीक ट्यूमर इमेजिंग की आवश्यकता होती है, जो आमतौर पर चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग, कंप्यूटेड टोमोग्राफी, या उच्च-रिज़ॉल्यूशन अल्ट्रासोनोग्राफी 6,7 का उपयोग करके किया जाता है। अल्ट्रासोनोग्राफी का व्यापक रूप से माउस अंगों में उपयोग किया गया है। इसमें चुंबकीय अनुनाद इमेजिंग और कंप्यूटेड टोमोग्राफी पर फायदे हैं क्योंकि यह वास्तविक समय में किया जा सकता है और विषय को विकिरण के संपर्क में नहीं लाता है, और आवश्यक उपकरण पोर्टेबल 8,9 होने के लिए पर्याप्त छोटा है। हालांकि, अल्ट्रासाउंड का उपयोग करके एटीसी विकास की लगातार निगरानी पर अध्ययन दुर्लभ हैं; इसलिए, यह काम इस संदर्भ में अल्ट्रासाउंड की उपयोगिता की पड़ताल करता है।
यहां, एटीसी के माउस मॉडल में ट्यूमर को सटीक रूप से स्कैन, मॉनिटर और मापने के लिए उच्च-रिज़ॉल्यूशन अल्ट्रासोनोग्राफी का उपयोग करने के लिए एक प्रोटोकॉल प्रस्तुत किया गया है।
Protocol
Representative Results
Discussion
यह प्रोटोकॉल आनुवंशिक रूप से इंजीनियर माउस मॉडल में ऑर्थोटोपिक एटीसी ट्यूमर का विश्लेषण करने के लिए उच्च-रिज़ॉल्यूशन अल्ट्रासोनोग्राफी का उपयोग करता है। ट्रांसजेनिक मॉडल, टीपीओ-सीआरई / ईआरटी 2 के…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
इस शोध को सार्वजनिक, वाणिज्यिक या गैर-लाभकारी वित्त पोषण एजेंसियों से कोई विशिष्ट अनुदान नहीं मिला।
Materials
| Adhesive tape | Winner | ||
| Anesthesia system | RWDlifescience | ||
| Brafflox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Chamber for anesthesia induction | RWDlifescience | ||
| Cotton swabs | Winner | ||
| Depilatory cream | Veet | ||
| Electric heating blanket | Petbee | ||
| Isoflurane vaporizer | RWDlifescience | ||
| Medical gloves | Winner | ||
| Paper towels | Breeze | B914JY | |
| TPO-cre/ERT2 mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Trp53flox/wt mice | Collaboration with Institute of Life Science, eBond Pharmaceutical Technology Ltd, Chengdu, China | ||
| Ultrasound gel | Keppler | KL-250 | |
| Ultrasound machine | VisualSonics | Vevo 3100 |
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