Juvenil American Shad'ın Yeni Bir Akustik Mikrotransmitter ile İmplante Edilmesi için Taşıma ve Etiketleme Teknikleri

Summary

Bu makale, optimum kullanım uygulamaları ve bir akustik mikro vericinin genç Amerikan tıraşına implantasyonu için ayrıntılı bir prosedür sağlar. Laboratuvar çalışmamızın sonuçları, bu etiketleme tekniklerinin, hayatta kalma olasılığı yüksek olan genç Amerikan tıraşlarının saha çalışmalarında uygulanabileceğini göstermektedir.

Abstract

Hidroelektrik sistemlerden göç ederken genç Amerikan tırdının (Alosa sapidissima) davranışını ve hayatta kalmasını daha iyi anlamak için telemetri tekniklerinin kullanılması zor olmuştur, çünkü tıraşların özellikle elleçlemeye duyarlı olduğu bilinmektedir. Bu çalışmanın amacı, etiketleme işleminin zararlı etkilerini en aza indiren ve genç Amerikan tıraşlarının etiketleme sonrası hayatta kalmasını en üst düzeye çıkaran yeni, akustik bir mikro verici kullanarak bir etiketleme protokolü geliştirmekti. Etiketlemeden önce ve sonra su dışı elleçlemenin ve acı tuzlu su kullanımının (binde 7,5 parça) sınırlandırılması, basit bir pektoral implantasyon yöntemi kullanılarak etiketlenen shad için hayatta kalma oranını artırdı. Bu protokol, yavru tıraşı akustik vericilerle etiketlemek için ayrıntılı, adım adım bir prosedür sağlar. Bu prosedür kullanılarak etiketlenen ve laboratuvarda 60 gün boyunca tutulan balıklar, etiketlenmemiş meslektaşları için% 70’e kıyasla% 81.5’lik bir hayatta kalma oranına sahipti. Bu çalışmada geliştirilen başarılı etiketleme ve işleme uygulamaları, yavru tıraş ve diğer hassas türlerin saha telemetri çalışmalarına uygulanabilir.

Introduction

Amerikan şadadı (Alosa sapidissima), Amerika Birleşik Devletleri’nin Doğu Kıyısı’na özgü anadrom bir balık türüdür. Habitat mevcudiyetinin azalması ve hidroelektrik barajların artan gelişimi, doğal aralıkları boyunca shad popülasyonunun azalmasına neden olmuştur ^1,2. Yavru tıraş ve diğer alosinler, okyanusa göç ederken, hidroelektrik yapılardan^geçerken yaralanma ve ölüme özellikle duyarlı olabilir ^3,4,5. Hidroelektrik barajlarında yavru tıraşların geçiş ve hayatta kalma oranlarını anlamak, bu tesislerin yeniden ruhsatlandırılmasının yanı sıra türler için restorasyon çabalarını bilgilendirmek için kritik öneme sahiptir. Bununla birlikte, Amerikan tıraşlarının okyanusa göç ederken geçiş ve hayatta kalma oranlarını değerlendirmek için başarılı etiketleme teknikleri eksiktir. Telemetri çalışmaları için vericilerle etiketlenen Shad, etiketlenmemiş çıkarım popülasyonunu temsil etmeli ve etiketten veya etiketleme işleminden^olumsuz etkilenmemelidir ^6,7.

Pasifik Kuzeybatı Ulusal Laboratuvarı (PNNL), genç tıraşları izleme yeteneğini geliştirmeye yardımcı olmak için, Amerikan tıraşı ve benzer kompresiform vücut tiplerine sahip diğer balık türlerini incelemek için yeni bir akustik mikro verici geliştirdi. Amerikan tıraşı ve diğer alosinleri incelemenin yaygın zorluklarından biri, diğer türlere kıyasla taşıma, taşıma ve etiketlemeye karşı duyarlılıklarıdır. Örneğin, Raquel ve ^ark.8 , taşıma ve kamyon taşımacılığı ölümlerinin, genç Amerikan tıraşı için, çalışmalarındaki diğer beş yavru balık türünden sürekli olarak daha yüksek olduğunu bulmuşlardır. Juvenil Amerikan tıraşını etiketleme çabalarını değerlendiren birkaç yayınlanmış çalışmadan, 7 gün sonra %2’ye kadar düşük^{bir 9} ve etiketlemeden 48 saat sonra %100’e kadar geniş bir sağkalım aralığı bildirilmiştir¹⁰ ve etiketli çocuk tıraşı için daha uzun süreli sağkalım ve verici tutma hakkında çok az bilgi mevcuttur.

Amerikan tırmığı gibi hassas türlerin başarılı bir şekilde ele alınması ve etiketlenmesindeki zorluklar, göçleri, davranışları ve habitat kullanımları hakkındaki bilgi boşluklarına ışık tutmuştur. Hidroelektrik barajları boyunca hareketi izleme yeteneği, Amerikan tıraşı için geçiş ve hayatta kalma oranlarının anlaşılmasını büyük ölçüde ilerletecektir. Mevcut hidroelektrik tesisler için yönetim kararlarını ve daha önce çalışılmamış balık türleri ve yaşam evreleri üzerindeki etkileri en aza indiren sistemler için yeni tasarımlar için bilgi vermeye yardımcı olacaktır. Yeni verici teknolojisi geliştirildikçe, yanlılığı en aza indirmek ve geçişi ve hayatta kalmayı doğru bir şekilde değerlendirmek için vericinin ve etiketleme sürecinin etkilerini anlamak zorunludur. Bu çalışmanın amacı, yeni bir akustik mikro verici ile etiketlenmiş genç Amerikan tıraşlarının 60 günlük sağkalımını değerlendirmek ve etiketlemenin tıraş üzerindeki olumsuz etkilerini azaltacak bir işleme ve etiketleme protokolü sağlamak, böylece onları etiketlenmemiş muadilleriyle daha karşılaştırılabilir hale getirmekti.

Protocol

PNNL, Laboratuvar Hayvanları Bakımı Değerlendirme ve Akreditasyon Derneği tarafından akredite edilmiştir. Amerikan tırmıkları, laboratuvar hayvanlarının bakımı ve kullanımı için federal yönergelere uygun olarak ele alındı11 ve çalışmamızın protokolleri, PNNL’nin Kurumsal Hayvan Bakımı ve Kullanımı Komitesi’ne uygun olarak yürütüldü ve onaylandı. 1. Etiketleme sonrası geri kazanım tankının hazırlanması Acı tuzlu su (7.5 ppt) hazır olmadığında, serbest bırakmadan önce 1-2 gün boyunca uygun havalandırma ve sirkülasyon ile tıraşı tutmak için statik bir sistem kullanın (Şekil 1). Statik, dairesel bir tankta, havalandırma sağlamak için bir hava ikmal sistemi kurun. Tankın yan tarafına bir PVC boruyu, üstte bir tişört, ortada başka bir tişört olacak ve borunun altına ekranlı bir bağlantı parçası geçirilecek şekilde bağlayın. Ardından, basınçlı hava hattına bir hava taşı bağlayın ve hava taşını borunun altına ekranın yanına yerleştirin.NOT: Ekran, balıkların hava ikmal sistemine yüzmesini önler. Hava asansörünün çıkış portu (orta PVC tişört) yaklaşık yarıya kadar suya batana kadar depoyu temiz suyla doldurun. Ardından suyu kapatın.Ardından, limandan çıkan havalandırılmış su balığın yönlendirilmesi için yönlü bir akış oluşturana kadar hava beslemesini açın ve artırın. 7.5 ppt acı tuzlu su çözeltisi yapmak için ticari deniz tuzu ekleyin ve eriyene kadar karıştırın. 2. Tuzlu su balık kaynağı kovası ve tuzlu su anestezik çözeltisinin hazırlanması Her 0,5 L su için 7,5 g deniz tuzu ölçün ve bir kovada eritin.NOT: Adım 3.5’te, 7.5 ppt’lik bir nihai konsantrasyon oluşturmak için şad içeren eşit hacimde tatlı su eklenir. Başka bir kovada, her litre su için 7,5 g deniz tuzu ölçün ve çözün.Bir litre tuzlu su başına 120 mg sodyum bikarbonat ile tamponlanmış 120 mg trikain metansülfonat (MS-222) ekleyin. Anestezik kovalara ek hava ekleyin. 3. Sudan suya transfer ile acı tuzlu suya shad toplanması Başka bir kovayı kısmen temiz suyla doldurun ve ön etiketleme kaynak tankına yanlamasına yerleştirin. Shad’ı kovaya yüzmesi için nazikçe yönlendirmek için bir ağ veya el kullanın. Kovaya uygun sayıda balık girdikten sonra kovayı dik çevirin ve delikli bir kapakla sabitleyin. Fazla suyu kapaktan boşaltın, balığı hedef miktarda tatlı suda (yani, son 7,5 ppt tuzlu su kaynağı kovasının hacminin yarısı) tutun. Tıraşı ve tatlı suyu, adım 2.1’de hazırlanan tuzlu su kaynağı kovasına yavaşça dökün.NOT: Nihai tuzluluk 7.5 ppt olacaktır. Çözünmüş oksijeni kabul edilebilir bir seviyede tutmak için bir akvaryum hava pompası ve hava taşı kullanarak ön etiketli balık kaynağı kovasına ek hava sağlayın (%>90 doygunluk idealdir). 4. Bir şad içine akustik bir vericinin implantasyonu Vericileri etanol içinde 20 dakika dezenfekte edin ve kullanmadan önce steril suyla durulayın. Pürüzsüz, ekstra ince gözenekli (~0,4 mm) bir daldırma ağı kullanarak, kaynak kovadan anestezik kovaya bir balık ağı ekleyin. Shad, su sıcaklığına ve diğer su kalitesi parametrelerine bağlı olarak ~ 2-3 dakika içinde denge ve omurga reflekslerini kaybetmelidir. Dördüncü aşamaya12 tamamen uyuşturulduktan sonra, uzunluğunu elde etmek için balığı ıslak bir ölçüm tahtasına nazikçe yerleştirmek için eldivenli bir el kullanın. Ağırlığını elde etmek için balığı darası alınmış bir kantarda su dolu bir tartı teknesine taşıyın. Etiketlemeden önce uzunluk ve ağırlığı, akustik etiket kodunu ve balığın durumuyla ilgili pul kaybı veya kanama gibi yorumları kaydedin. Balıkları anestezik tuzlu su ile dolu bir transfer kabına koyun ve akustik verici ile birlikte balık cerrahına teslim edin. Balıkları sol tarafı aşağı bakacak şekilde, v-oluk ile hazırlanmış ıslak, suya dayanıklı bir köpük ped üzerine yerleştirin (Şekil 2A).NOT: V-oluk, işlem sırasında balığın çok fazla kaymasını önler ve suyun balığın ağzının etrafında birikmesine izin verir, böylece solungaçlarının üzerinden aktif olarak su çekebilir. Yerçekimi beslemeli bir su rezervuarına bağlı borular aracılığıyla balığın ağzına tatlı su sağlayın. Dezenfekte edilmiş veya yepyeni bir # 11 paslanmaz çelik cerrahi bıçak kullanarak, göğüs yüzgecinin distal ucuna yakın miyomerler arasında dikey olarak 3 mm uzunluğunda bir kesi yapın. Gerekirse, balığın derisini engelliyorsa bıçak ucundaki bir pulu çıkarın.Vericiyi dikkatlice insizyona yerleştirin ve tüm etiket vücut boşluğunun içine oturana kadar arkaya doğru itin (Şekil 2B). Gerekirse, etiketi dikkatlice tam olarak yerleştirmek için neşterin (veya ince uçlu forseps) kör ucunu kullanın. Etiketli balıkları, balığın anesteziden kurtulmasını sağlamak için havalandırmalı 7,5 ppt tuzlu su içeren küçük bir kaba koyun. Balık yeniden dengeye kavuştuğunda, geri kazanım kabından 7,5 ppt tuzlu su içeren etiketleme sonrası bekletme tankına sudan suya transfer yapın. Etiketli balığın serbest bırakılmadan önce 1-2 gün tuzlu suda iyileşmesine izin verin.

Representative Results

2020’de ön denemeler ve 2021’de uzun vadeli bir bekletme çalışması olan çocuk tıraşlarının etiketlenmesinin etkinliğini ele almak için iki dizi etiketleme değerlendirmesi yapıldı. Kasım 2020’de PNNL’de Amerikan tıraşını yeni bir akustik mikrotransmitter ile implante etmek için tercih edilen bir yöntemi belirlemek için ön laboratuvar değerlendirmeleri yapıldı. Prototip verici tasarımları (n = 4, P1-P4), toplam 4 benzersiz akustik verici etiketleme konumu tedavisi için farklı etiketleme konumlarıyla (mide , pektoral, pelvik ve dorsal) eşleştirildi (tedavi başına n = 40 balık, Tablo 1). Tüm test balıkları rastgele bir arıtma ve bekletme tankına atandı. Test balıkları, 14 gün boyunca tank başına her tedaviden eşit sayıda balık (yani tedavi başına 20 balık) içeren 2 bekletme tankında tutuldu. Değerlendirmenin ilk 2 günü boyunca, shad acı tuzlu suda (7.5 ppt) tutuldu ve etiketleme ve kullanımdan kurtulmasına izin verildi. Daha sonra tanklar, değerlendirme süresinin geri kalanı için akışlı tatlı suya geçirildi. Ön değerlendirme için, etiketli balık ve yüzgeçli kontrollerin boyutları 50-80 mm arasında değişmiştir. Göğüs insizyonu ile implante edilen balıklarda diğer etiketleme tekniklerine kıyasla yavru tıraşta sağkalım ve etiket tutma en yüksekti (Şekil 3). Ek pilot değerlendirmeler ayrıca, sudan suya transferler ve etiketleme gibi stresli olaylardan önce ve sonra balıkları acı tuzlu suda tutma gibi taşıma tekniklerinin hayatta kalma oranlarını artırmak için kritik olduğunu göstermiştir. Ön değerlendirmeden elde edilen başarılı etiketleme ve işleme protokolleri kullanılarak, pektoral insizyon etiketleme yöntemi kullanılarak akustik bir verici ile implante edilen genç Amerikan tıraşının uzun süreli 60 günlük sağkalımını ve etiket tutulmasını değerlendirmek için 2021’de PNNL’de bir laboratuvar çalışması yapılmıştır. Uzun vadeli değerlendirmede, ön değerlendirmede kullanılan P1 tasarımına benzer biçim ve boyut olarak geliştirilmiş bir prototip tasarımı olan kukla verici P5 (Şekil 4) kullanılmıştır. Kukla P5 etiketinin ortalama boyutları ve ağırlığı 7,6 mm uzunluğunda × 2,3 mm çapında ve havada ağırlığı 0,058 g (standart sapma 0,002 g) idi ve bu da %<1'lik bir etiket yüküyle sonuçlandı. İşlevsel bileşenlere sahip prototip akustik verici (Şekil 4), 7.6 mm uzunluk x 2.0 mm çap boyutlarına ve havada 0.050 g ağırlığa sahiptir. Uzun süreli değerlendirmede kullanılan genç Amerikan tıraşı, test sırasında 4 ay boyunca esaret altında tutulmuştu. Deney, 60 günlük bir süre boyunca iki tankta tutulan eşit sayıda tedavi ve kontrol balığına sahip olacak şekilde tasarlanırken, etiketleme sırasında kalan tıraş sayıları düşüktü. Bu nedenle, etiketleme tekniğinin tıraş üzerindeki uzun vadeli etkinliğini daha iyi anlamak için, etiketli tedavi grubuna kontrol grubundan daha fazla tıraş rastgele atandı. İki tankın her birinde 27 tedavi balığı ve 9 veya 10 kontrol balığı bulunuyordu. Bununla birlikte, Tank A’dan hayatta kalma (.8), Tank B’den (.4) önemli ölçüde daha kötü olduğundan; Fisher’ın kesin testi, p < 0.001) ve her tanktaki etiketli ve kontrol grupları arasında hayatta kalma açısından bir fark yoktu, sadece B tankı için sonuçlar buraya dahil edildi. Shad (çatal uzunluğu 69-105 mm; ağırlık 3.9-11.7 g) pektoral insizyon kullanılarak P5 vericisi ile etiketlendi (n = 27) veya kontrol grubuna (n = 10) atandı. Kontrol balıkları, ~ 20 saniye boyunca cerrahi ped üzerine yerleştirilmek de dahil olmak üzere aynı prosedürler kullanılarak ele alındı, ancak bir yüzgeç klipsi veya bir kesi almadılar ve bir verici ile implante edilmediler. Etiketlemeden sonra, her iki tedavi grubu da 1 gün boyunca acı tuzlu suda (7.5 ppt) tutuldu ve daha sonra çalışmanın geri kalanında akan nehir suyuna geçildi. 60 günde sağkalım, etiketli grup için% 81.5 ve etiketlenmemiş kontroller için% 70 idi (Şekil 5). Bu değerlendirmede etiketli balıkların hayatta kalması, hem hayatta kalma hem de etiket tutma olarak tanımlanmıştır, çünkü etiket atılımı bir telemetri çalışmasında bir ölüm olayından ayırt edilemez. İki grup arasında sağkalım açısından anlamlı bir fark yoktu (Fisher’ın kesin testi, P = 0.884); Bununla birlikte, küçük örneklem büyüklükleri nedeniyle bir fark tespit etme gücü .4 idi. Tedaviler arasında bir fark tespit etme gücü düşük olmasına rağmen, uzun vadeli değerlendirmenin sonuçları, bu işleme ve etiketleme protokolünün Amerikan tıraşını akustik vericilerle implante etmek için orta derecede başarı ile kullanılabileceğini göstermektedir. Şekil 1: Etiketleme sonrası acı tuzlu suyla doldurulmuş geri kazanım tankı. Bir hava ikmal sistemi, statik tanka oksijen sağlar. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın. Şekil 2: Bir Juvenil Amerikan tıraşının akustik verici implantasyonu. Göğüs kesisi ile (A) ve (B) insizyona yerleştirilen kukla P5 vericisi ile juvenil Amerikan tıraşı. Şadın ağzının kısmen mavi borudan akan suya batırıldığına dikkat edin. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.  Şekil 3: Bir grup etiketsiz kontrol ve dört etiketli genç Amerikan tıraş grubu ile yapılan ön 14 günlük bir değerlendirmede hayatta kalma yüzdesi. Etiketli tedaviler, her biri benzersiz bir verici prototipi (P1-P4) ile eşleştirilmiş dört etiketleme konumundan (mide, pektoral, pelvik ve dorsal) oluşuyordu. Etiketli balıkların hayatta kalması, hem hayatta kalma hem de etiket tutma olarak tanımlandı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.  Şekil 4: Genç Amerikan tıraşını etiketlemek için akustik ve kukla vericiler. (A) Fonksiyonel akustik mikrotransmitter ve (B) 60 günlük laboratuvar sağkalım çalışmasında kullanılan kukla P5 prototip vericisi. Cetveldeki 4-7 sayılarının santimetreyi temsil ettiğine dikkat edin. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.  Şekil 5: Uzun süreli 60 günlük bir tutma çalışmasında Amerikan tıraşının hayatta kalma yüzdesi. Yavru tıraşlar ya etiketsiz (Etiketsiz Kontroller; düz çizgi) ya da kukla bir verici ile etiketlendi (Etiketli [Pektoral P5]; kesikli çizgi). Etiketli grubun hayatta kalması, hem hayatta kalma hem de etiket tutma olarak tanımlandı. Bu rakamın daha büyük bir sürümünü görüntülemek için lütfen buraya tıklayın.  Etiket Türü Etiket Konumu N Çatal Uzunluğu (mm) Ortalama Etiket Ağırlığı (SD; g) Etiket Yükü (%) Hayatta kalma (%) Ortalama Etiketleme/Klip Süresi Aralık Ortalama (SD) P1 (İngilizce) Mide 40 50 – 76 60 (6.0) 0.058 (0.003) 1.5 – 5.2 45 12 P2 (İngilizce) Göğüs 40 50 – 78 60 (7.3) 0.039 (0.001) 1.0 – 3.2 80 23 P3 (İngilizce) Pelvik 40 50 – 70 58 (5.3) 0.039 (0.001) 1.0 – 4.1 55 26 P4 (İngilizce) Dorsal 40 50 – 80 61 (6.8) 0.088 (0.004) 0 60 57 Kontrol NA (Klip) 40 50 – 80 59 (5.7) NA 0 92.5 14 Tablo 1: Ön değerlendirmenin bir parçası olarak prototip vericiler (P1-P4) ile implante edilen veya üst kaudal ve alt kaudal yüzgeç klipsleri (Kontrol) ile işaretlenen Amerikan tıraşı için etiketleme ve hayatta kalma bilgileri.Kontrol grubu için etiket konumu Uygulanamaz (NA) çünkü bu balıklar sadece yüzgeç klipsleri (Klip) aldı. P4 etiket tipinin nötr olarak yüzen bir tasarım olduğunu unutmayın. Ortalamanın standart sapması (SD) parantez içinde listelenmiştir.

Discussion

Hidroelektrik tesisleri etrafındaki genç Amerikan shad hareketlerini inceleme ihtiyacı, etiketli shad’ın hayatta kalmasını iyileştirmek için bir taşıma ve etiketleme protokolünün geliştirilmesine yol açmıştır. PNNL’de, tuzlu su kullanılmadan yeni bir akustik verici ile yavru tıraş implante etmeye yönelik ilk girişimler, 24 saat içinde %100 ölümle sonuçlandı. Daha sonraki, dikkatlice geliştirilen taşıma ve etiketleme protokolü, Amerikan tırdının akustik bir mikrotransmitter ile implante edilebileceğini ve yüksek bir sağkalım oranı (% 81.5) ile laboratuvar ortamında uzun süreli tutulabileceğini gösterdi. Etiketlemeden önce ve sonra su dışı elleçlemeyi ve acı tuzlu su kullanımını en aza indirmek, genç Amerikan tıraşını etiketlemenin başarısı için çok önemliydi.

Ön değerlendirmede, 50 mm’ye kadar küçük tıraşlar, dört implantasyon yöntemi kullanılarak sahte bir verici ile etiketlendi. Erişkin shad ^13,14,15’i etiketlemek için en yaygın yöntemlerden biri olan gastrik etiketleme, pilot test sırasında umut verici sonuçlar verdi, ancak ön değerlendirme sırasında etiket kaybı insidansı yüksekti. Pelvik bir insizyon yoluyla implantasyon, yetişkin Twaite shad hareketlerini incelemek için başarılı bir şekilde kullanılmıştır¹⁶ ve dorsal ataşmanlar, juvenil Amerikan shad^10’un kısa süreli izlenmesi için kullanılmıştır. Daha yakın zamanlarda, hem nehir hem de deniz ortamlarında yetişkin tıraşların uzun süreli hareketlerini incelemek için pektoral bir kesi yoluyla etiket implantasyonu kullanıldı¹⁷. PNNL’deki ön değerlendirmede, pektoral insizyon yeri değerlendirilen diğer üç konumdan daha iyi performans gösterdi ve 7 günlük etiketleme sonrası sağkalım %90’ın üzerindeydi.

Genel olarak, bu değerlendirmelerden elde edilen sonuçlar, etiketli tıraşın hayatta kalmasının, her 5 saniyede bir iletilen bir akustik sinyalle ~30 gün olması beklenen akustik vericinin pil ömrünün ötesinde etiketsiz tıraşın hayatta kalmasıyla karşılaştırılabilir olduğunu gösterdi.

Bu verici tasarımı ve etiketleme protokolü, saha uygulamalarında Amerikan tıraşı gibi küçük, hassas ve tehdit altındaki balık türlerini incelemek için büyük umut vaat ediyor ve araştırmacıların hidroelektrik tesislerinin yakınındaki balık hareketleri hakkında değerli bilgiler edinmelerini sağlıyor. Örneğin, bu etiketleme tekniği, bir hidroelektrik barajının dolusavak ve güç merkezine yaklaşırken akustik etiketli yavru tıraşların davranışını incelemek için yaklaşmakta olan bir saha uygulamasında kullanılacaktır. Nehir içi çalışmalardan elde edilen sonuçlar, bu tesislerdeki yönetim kararlarını daha iyi bilgilendirebilir ve türlerin genç yaşam evreleri boyunca korunmasına yardımcı olabilir. Gelecekteki çalışmalar, nehir akıntısı balıklarının tarla koşullarında etiketlenmesi ve izlenmesi için bu prosedürün etkinliğini değerlendirmelidir. Ek olarak, bu teknikler, yaşam öyküleri boyunca uzun süreli izleme sağlayabilen Pasif Entegre Transponder (PIT) etiketlerine sahip shad veya diğer hassas türlerin implante edilmesine kolayca aktarılabilir.

Materials

#11 stainless steel surgical blade	Exel	29502	purchased from Med-Vet International; no real preference on blade vendor
#11 stainless steel surgical blade	Miltex	MIL4-311	purchased from Med-Vet International; no real preference on blade vendor
2 gallon bucket	Leaktite	#2GL White Pail
acoustic transmitter for American shad	Pacific Northest National Laboratory	Patent-Pending	BattelleIPID: 32500
air stone	Pentair	AS3
aquarium air pump	Tetra	Whisper
dissolved oxygen meter	YSI	ProODO or ProSolo
ethanol	Decon Laboratories	2805HC
fine mesh net	Blue Ribbon	ABLEC8
fish holding tank	Reiff Manufacturing	NA	round aquaculture tank
foam garden kneeler	Tommyco	12003
plastic storage container	Ziploc	discontinued; 8oz container with lid
PVC cement	Oatey	30821
PVC pipe	Charlotte Pipe	NA	PVC Schedule 40 2" diameter
PVC primer	Oatey	30757
PVC tee	Charlotte Pipe	NA	2" PVC Schedule 40 S x S x S Tee
sea salt	InstantOcean	SS15-10
silicone tubing 3/16"	Pentair	tp30s	tubing to supply water during tagging
sodium bicarbonate	Fisher Chemical	S233-500
sterile water	NA	NA	water is sterilized using an autoclave
tricaine methanesulfonate	Syndel USA	15650
tubing for airline	Hydromaxx	1403038050