קביעת 45 חומרי הדברה בזני אבוקדו בשיטת QuEChERS וספקטרומטריית מסה טנדם כרומטוגרפיית גז
Summary
הפרוטוקול הנוכחי מתאר ניתוח של שאריות חומרי הדברה רב-מעמדיים בזני אבוקדו באמצעות שיטת Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) עם פורמט אמוניום, ואחריה ספקטרומטריית מסה של כרומטוגרפיה-טנדם גז.
Abstract
כרומטוגרפיית גז (GC) ספקטרומטריית מסה טנדם (MS/MS) עומדת כמכשיר אנליטי מוביל המשמש באופן נרחב למעקב אחר שאריות חומרי הדברה במזון. עם זאת, שיטות אלה פגיעות לאפקטים מטריציוניים (MEs), אשר עשויים להשפיע על כימות מדויק בהתאם לשילוב הספציפי של אנליטה ומטריצה. בין האסטרטגיות השונות להפחתת MEs, כיול מותאם מטריצה מייצג את הגישה הרווחת ביישומי שאריות חומרי הדברה בשל עלות-תועלת ויישומו הפשוט. במחקר זה, 45 חומרי הדברה מייצגים נותחו בשלושה זנים שונים של אבוקדו (כלומר, Criollo, Hass ו- Lorena) באמצעות שיטת Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) עם פורמט אמוניום ו- GC-MS/MS.
לשם כך, 5 גרם של דגימת אבוקדו הופק עם 10 מ”ל של acetonitrile, ולאחר מכן 2.5 גרם של אמוניום formate נוסף כדי לגרום הפרדת פאזה. לאחר מכן, הסופרנאטנט עבר תהליך ניקוי באמצעות מיצוי שלב מוצק מפוזר תוך שימוש ב-150 מ”ג של MgSO4 נטול מים, 50 מ”ג אמין ראשוני-משני, 50 מ”ג אוקטדצילסילן, 10 מ”ג פחמן שחור גרפי ו-60 מ”ג של חומר סורבנט מבוסס תחמוצת זירקוניום (Z-Sep+). ניתוח GC-MS/MS בוצע בהצלחה תוך פחות מ-25 דקות. ניסויי תיקוף קפדניים בוצעו כדי להעריך את ביצועי השיטה. בחינת עקומת כיול מותאמת מטריצה לכל זן אבוקדו העלתה כי ה-ME נשאר עקבי יחסית ופחות מ-20% (נחשב ל-ME רך) עבור רוב שילובי חומרי ההדברה/זן. יתר על כן, גבולות הכימות של השיטה היו נמוכים מ-5 מק”ג/ק”ג עבור כל שלושת הזנים. לבסוף, ערכי ההתאוששות של רוב חומרי ההדברה היו בטווח המקובל של 70-120%, עם ערכי סטיית תקן יחסית מתחת ל-20%.
Introduction
באנליזה כימית, אפקט המטריצה (ME) יכול להיות מוגדר בדרכים שונות, אך הגדרה כללית מקובלת היא כדלקמן: הוא מתייחס לשינוי באות, במיוחד שינוי בשיפוע עקומת הכיול כאשר מטריצת הדגימה או חלק ממנה נוכחים במהלך ניתוח של אנליטי מסוים. כהיבט קריטי, ME מחייב חקירה יסודית במהלך תהליך התיקוף של כל שיטה אנליטית, שכן הוא משפיע ישירות על דיוק המדידה הכמותית עבור יעד אנליטי1. באופן אידיאלי, הליך קדם-טיפול לדוגמה צריך להיות סלקטיבי מספיק כדי למנוע חילוץ רכיבים כלשהם ממטריצת הדגימה. עם זאת, למרות מאמצים משמעותיים, רבים מרכיבי מטריצה אלה עדיין בסופו של דבר במערכות הקביעה הסופית ברוב המקרים. כתוצאה מכך, רכיבי מטריצה כאלה לעתים קרובות לסכן את ערכי ההתאוששות והדיוק, להציג רעש נוסף, ולהסלים את העלות הכוללת ואת העבודה הכרוכה בשיטה.
בכרומטוגרפיית גז (GC), ME נובע מנוכחותם של אתרים פעילים במערכת GC, אשר מקיימים אינטראקציה עם ניתוח המטרה באמצעות מנגנונים שונים. מצד אחד, מרכיבי המטריצה חוסמים או מסווים את האתרים הפעילים הללו שאחרת היו מתקשרים עם מנתחי המטרה, וכתוצאה מכך שיפור אותתכוף 2. מצד שני, אתרים פעילים שנשארים ללא הפרעה עלולים לגרום לשיא זנב או לפירוק אנליטי עקב אינטראקציות חזקות, מה שמוביל ל- ME שלילי. עם זאת, זה יכול להציע יתרונות פוטנציאליים במקרים מסוימים2. חשוב להדגיש כי השגת אינרטיות מלאה במערכת GC היא מאתגרת ביותר, למרות השימוש ברכיבים אינרטיים מאוד ותחזוקה נאותה. עם שימוש מתמשך, הצטברות של רכיבי מטריצה במערכת GC הופך בולט יותר, גרימת ME מוגברת. כיום, ידוע כי אנליטים המכילים חמצן, חנקן, זרחן, גופרית ואלמנטים דומים, מציגים ME גדול יותר מכיוון שהם מתקשרים בקלות עם אתרים פעילים אלה. לעומת זאת, תרכובות יציבות מאוד כגון פחמימנים או אורגנוהלוגנים אינם עוברים אינטראקציות כאלה ואינם מראים ME נצפה במהלך ניתוח 2,3.
בסך הכל, ME לא ניתן לבטל לחלוטין, מה שמוביל לפיתוח של מספר אסטרטגיות פיצוי או תיקון כאשר הסרה מלאה של רכיבי מטריצה אינו אפשרי. בין אסטרטגיות אלה, השימוש בתקנים פנימיים (ISs), מגני אנליטים, כיול תואם מטריצה, שיטת התוספת הסטנדרטית, או שינוי טכניקות הזרקה תועדו בספרות המדעית 1,2,4,5. הנחיות SANTE/11312/2021 המליצו גם הן על אסטרטגיות אלה6.
באשר ליישום כיול מותאם מטריצה כדי לפצות על MEs, רצפי דגימות במצבים מעשיים מקיפים סוגים שונים של מזונות או דגימות שונות מאותה סחורה. במקרה זה, ההנחה היא כי שימוש בכל מדגם מאותה סחורה יפצה למעשה על ME בכל הדגימות. עם זאת, חסרים מחקרים מספיקים בספרות הקיימת הבוחנים סוגיה זובאופן ספציפי 7.
קביעת ריבוי שאריות של חומרי הדברה במטריצות המכילות אחוז ניכר של שומן ופיגמנטים מהווה משימה מאתגרת. הכמות הניכרת של החומר המופק יכולה להשפיע באופן משמעותי על יעילות החילוץ ולהפריע לקביעה הכרומטוגרפית שלאחר מכן, מה שעלול לפגוע בעמודה, במקור ובגלאי, וכתוצאה מכך MEsמשמעותיים 8,9,10. כתוצאה מכך, ניתוח חומרי הדברה ברמות קורט במטריצות כאלה מחייב הפחתה משמעותית של רכיבי המטריצה לפני הניתוח תוך הבטחת ערכי התאוששות גבוהים7. השגת ערכי התאוששות גבוהים היא חיונית כדי להבטיח שניתוחי חומרי הדברה יישארו אמינים, מדויקים ועומדים בתקנים רגולטוריים. זה חיוני להבטחת בטיחות מזון, הגנה על הסביבה, וקבלת החלטות מושכלת בחקלאות ובתחומים קשורים.
אבוקדו הוא פרי בעל ערך מסחרי גבוה המגודל באקלים טרופי וים תיכוני ברחבי העולם ונצרך באופן נרחב הן באזורי מוצאו והן בשוקי הייצוא הרבים. מבחינה אנליטית, אבוקדו הוא מטריצה מורכבת המכילה מספר משמעותי של חומצות שומן (כלומר, אולאית, פלמיטית ולינולאית), בדומה לאגוזים, תכולת פיגמנט משמעותית, כמו בעלים ירוקים, וכן סוכרים וחומצות אורגניות, בדומה לאלה הנמצאים בפירות אחרים11. בשל אופיו השומני, יש לתת תשומת לב מיוחדת בעת שימוש בכל שיטה אנליטית לניתוח. בעוד שניתוח שאריות חומרי הדברה בוצע על אבוקדו באמצעות GC-MS במקרים מסוימים 8,12,13,14,15,16,17,18,19,20, הוא היה יחסית פחות שכיח בהשוואה למטריצות אחרות. ברוב המקרים, גרסה של שיטת Quick-E asy-Ch eap-E ffective-R ugged-S afe (QuEChERS) יושמה 8,12,13,14,15,16,17,18. אף אחד מהמחקרים הללו לא בדק את העקביות של MEs בין זני אבוקדו שונים.
לכן, מטרת עבודה זו הייתה לחקור את העקביות של MEs ואת ערכי ההתאוששות של 45 חומרי הדברה מייצגים על פני זנים שונים של אבוקדו (כלומר, Criollo, Hass, ו Lorena) באמצעות שיטת QuEChERS עם פורמט אמוניום ו GC-MS/MS. למיטב ידיעתנו, זו הפעם הראשונה שמחקר מסוג זה נערך על דגימות מטריקס שומניות כאלה.
Protocol
Representative Results
Discussion
המגבלה העיקרית הקשורה לכיול תואם מטריצה נובעת מהשימוש בדוגמאות ריקות כתקני כיול. זה מוביל למספר מוגבר של דגימות שיש לעבד לניתוח והזרקה מוגברת של רכיבי מטריצה בכל רצף אנליטי, מה שעלול להוביל לדרישות תחזוקת מכשירים גבוהות יותר. עם זאת, אסטרטגיה זו מתאימה יותר מתוספת סטנדרטית, שתייצר מספר גד…
Divulgations
The authors have nothing to disclose.
Acknowledgements
ברצוננו להודות לאוניברסיטת EAN ולאוניברסיטת לה לגונה.
Materials
| 3-Ethoxy-1,2-propanediol | Sigma Aldrich | 260428-1G | |
| Acetonitrile | Merk | 1006652500 | |
| Ammonium formate | Sigma Aldrich | 156264-1KG | |
| AOAC 20i/s autosampler | Shimadzu | 221-723115-58 | |
| Automatic shaker MX-T6-PRO | SCILOGEX | 8.23222E+11 | |
| Balance | OHAUS | PA224 | |
| Centrifuge tubes, 15 mL | Nest | 601002 | |
| Centrifuge tubes, 2 mL | Eppendorf | 4610-1815 | |
| Centrifuge tubes, 50 mL | Nest | 602002 | |
| Centrifuge Z206A | MERMLE | 6019500118 | |
| Choper 2L | Oster | 2114111 | |
| Column SH-Rxi-5sil MS, 30 m x 0.25 mm, 0.25 µm | Shimadzu | 221-75954-30 | MS GC column |
| Dispensette 5-50 mL | BRAND | 4600361 | |
| DSC-18 | Sigma Aldrich | 52600-U | |
| D-Sorbitol | Sigma Aldrich | 240850-5G | |
| Ethyl acetate | Merk | 1313181212 | |
| GCMS-TQ8040 | Shimadzu | 211552 | |
| Graphitized carbon black | Sigma Aldrich | 57210-U | |
| Injection syringe | Shimadzu | LC2213461800 | |
| L-Gulonic acid γ-lactone | Sigma Aldrich | 310301-5G | |
| Linner splitless | Shimadzu | 221-4887-02 | |
| Magnesium sulfate anhydrus | Sigma Aldrich | M7506-2KG | |
| Methanol | Panreac | 131091.12.12 | |
| Milli-Q ultrapure (type 1) water | Millipore | F4H4783518 | |
| Pipette tips 10 – 100 µL | Biologix | 200010 | |
| Pipette tips 100 – 1000 µL | Brand | 541287 | |
| Pipette tips 20 – 200 µL | Brand | 732028 | |
| Pipettes Pasteur | NORMAX | 5426023 | |
| Pippette Transferpette S variabel 10 – 100 µL | BRAND | 704774 | |
| Pippette Transferpette S variabel 100 – 1000 µL | BRAND | 704780 | |
| Pippette Transferpette S variabel 20 – 200 µL | SCILOGEX | 7.12111E+11 | |
| Primary-secondary amine | Sigma Aldrich | 52738-U | |
| Shikimic acid | Sigma Aldrich | S5375-1G | |
| Syringe Filter PTFE/L 25 mm, 0.45 µm | NORMAX | FE2545I | |
| Triphenyl phosphate (QC) | Sigma Aldrich | 241288-50G | |
| Vials with fused-in insert | Sigma Aldrich | 29398-U | |
| Z-SEP+ | Sigma Aldrich | 55299-U | zirconium oxide-based sorbent |
| Pesticides | CAS registry number | ||
| 4,4´-DDD | Sigma Aldrich | 35486-250MG | 72-54-8 |
| 4,4´-DDE | Sigma Aldrich | 35487-100MG | 72-55-9 |
| 4,4´-DDT | Sigma Aldrich | 31041-100MG | 50-29-3 |
| Alachlor | Sigma Aldrich | 45316-250MG | 15972-60-8 |
| Aldrin | Sigma Aldrich | 36666-25MG | 309-00-2 |
| Atrazine | Sigma Aldrich | 45330-250MG-R | 1912-24-9 |
| Atrazine-d5 (IS) | Sigma Aldrich | 34053-10MG-R | 163165-75-1 |
| Buprofezin | Sigma Aldrich | 37886-100MG | 69327-76-0 |
| Carbofuran | Sigma Aldrich | 32056-250-MG | 1563-66-2 |
| Chlorpropham | Sigma Aldrich | 45393-250MG | 101-21-3 |
| Chlorpyrifos | Sigma Aldrich | 45395-100MG | 2921-88-2 |
| Chlorpyrifos-methyl | Sigma Aldrich | 45396-250MG | 5598-13-0 |
| Deltamethrin | Sigma Aldrich | 45423-250MG | 52918-63-5 |
| Dichloran | Sigma Aldrich | 45435-250MG | 99-30-9 |
| Dichlorvos | Sigma Aldrich | 45441-250MG | 62-73-7 |
| Dieldrin | Sigma Aldrich | 33491-100MG-R | 60-57-1 |
| Diphenylamine | Sigma Aldrich | 45456-250MG | 122-39–4 |
| Endosulfan A | Sigma Aldrich | 32015-250MG | 115-29-7 |
| Endrin | Sigma Aldrich | 32014-250MG | 72-20-8 |
| EPN | Sigma Aldrich | 36503-100MG | 2104-64-5 |
| Esfenvalerate | Sigma Aldrich | 46277-100MG | 66230-04-4 |
| Ethion | Sigma Aldrich | 45477-250MG | 563-12-2 |
| Fenamiphos | Sigma Aldrich | 45483-250MG | 22224-92-6 |
| Fenitrothion | Sigma Aldrich | 45487-250MG | 122-14-5 |
| Fenthion | Sigma Aldrich | 36552-250MG | 55-38-9 |
| Fenvalerate | Sigma Aldrich | 45495-250MG | 51630-58-1 |
| HCB | Sigma Aldrich | 45522-250MG | 118-74-1 |
| Iprodione | Sigma Aldrich | 36132-100MG | 36734-19-7 |
| Lindane | Sigma Aldrich | 45548-250MG | 58-89-9 |
| Malathion | Sigma Aldrich | 36143-100MG | 121-75-5 |
| Metalaxyl | Sigma Aldrich | 32012-100MG | 57837-19-1 |
| Methidathion | Sigma Aldrich | 36158-100MG | 950-37-8 |
| Myclobutanil | Sigma Aldrich | 34360-100MG | 88671-89-0 |
| Oxyfluorfen | Sigma Aldrich | 35031-100MG | 42874-03-3 |
| Parathion-methyl | Sigma Aldrich | 36187-100MG | 298-00-0 |
| Penconazol | Sigma Aldrich | 36189-100MG | 66246-88-6 |
| Pirimiphos-methyl | Sigma Aldrich | 32058-250MG | 29232-93-7 |
| Propiconazole | Sigma Aldrich | 45642-250MG | 60207-90-1 |
| Propoxur | Sigma Aldrich | 45644-250MG | 114-26-1 |
| Propyzamide | Sigma Aldrich | 45645-250MG | 23850-58-5 |
| Pyriproxifen | Sigma Aldrich | 34174-100MG | 95737-68-1 |
| Tolclofos-methyl | Sigma Aldrich | 31209-250MG | 5701804-9 |
| Triadimefon | Sigma Aldrich | 45693-250MG | 43121-43-3 |
| Triflumizole | Sigma Aldrich | 32611-100MG | 68694-11-1 |
| α-HCH | Sigma Aldrich | 33377-50MG | 319-86-8 |
| β-HCH | Sigma Aldrich | 33376-100MG | 319-85-7 |
References
- Raposo, F., Barceló, D. Challenges and strategies of matrix effects using chromatography-mass spectrometry: An overview from research versus regulatory viewpoints. Trends Analyt Chem. 134, 116068 (2021).
- Rahman, M. M., Abd El-Aty, A. M., Shim, J. H. Matrix enhancement effect: a blessing or a curse for gas chromatography?-A review. Anal Chim Acta. 801, 14-21 (2013).
- Poole, C. F. Matrix-induced response enhancement in pesticide residue analysis by gas chromatography. J Chromatogr A. 1158 (1-2), 241-250 (2007).
- Anastassiades, M., Maštovská, K., Lehotay, S. J. Evaluation of analyte protectants to improve gas chromatographic analysis of pesticides. J Chromatogr A. 1015 (1-2), 163-184 (2003).
- Trufelli, H., Palma, P., Famiglini, G., Cappiello, A. An overview of matrix effects in liquid chromatography-mass spectrometry. Mass Spectrom Reviews. 30 (3), 491-509 (2011).
- European Commission SANTE/11312/2021. Guidance document on analytical quality control and method validation procedures for pesticide residues analysis in food and feed. European Commission. , (2021).
- Kwon, H., Lehotay, S. J., Geis-Asteggiante, L. Variability of matrix effects in liquid and gas chromatography-mass spectrometry analysis of pesticide residues after QuEChERS sample preparation of different food crops. J Chromatogr A. 1270, 235-245 (2012).
- Lehotay, S. J., Maštovská, K., Yun, S. J. Evaluation of two fast and easy methods for pesticide residue analysis in fatty food matrixes. J AOAC Int. 88 (2), 630-638 (2005).
- González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., González-Sálamo, J., Varela-Martínez, D. A., Hernández-Borges, J. Analysis of pesticide residues in pollen and dairy products. Sustainable Agriculture Reviews 47. 47, 47-89 (2020).
- Madej, K., Kalenik, T. K., Piekoszewski, W. Sample preparation and determination of pesticides in fat-containing foods. Food Chem. 269, 527-541 (2018).
- Yanty, N. A. M., Marikkar, J. M. N., Long, K. Effect of varietal differences on composition and thermal characteristics of avocado oil. J Am Oil Chem Soc. 88, 1997-2003 (2011).
- Pano-Farias, N. S., Ceballos-Magaña, S. G., Muniz-Valencia, R., Gonzalez, J. Validation and assessment of matrix effect and uncertainty of a gas chromatography coupled to mass spectrometry method for pesticides in papaya and avocado samples. J Food Drug Anal. 25 (3), 501-509 (2017).
- Pano-Farias, N. S., Ceballos-Magaña, S. G., Jurado, J. M., Aguayo-Villarreal, I. A., Muñiz-Valencia, R. Analytical method for pesticides in avocado and papaya by means of ultra-high performance liquid chromatography coupled to a triple quadrupole mass detector: Validation and uncertainty assessment. J Food Sci. 83 (8), 2265-2272 (2018).
- Pano-Farias, N. S., Ceballos-Magaña, S. G., Gonzalez, J., Jurado, J. M., Muñiz-Valencia, R. Supercritical fluid chromatography with photodiode array detection for pesticide analysis in papaya and avocado samples. J Sep Sci. 38 (7), 1240-1247 (2015).
- Lozano, A., Rajski, &. #. 3. 2. 1. ;., Uclés, S., Belmonte-Valles, N., Mezcua, M., Fernández-Alba, A. R. Evaluation of zirconium dioxide-based sorbents to decrease the matrix effect in avocado and almond multiresidue pesticide analysis followed by gas chromatography tandem mass spectrometry. Talanta. 118, 68-83 (2014).
- Han, L., Matarrita, J., Sapozhnikova, Y., Lehotay, S. J. Evaluation of a recent product to remove lipids and other matrix co-extractives in the analysis of pesticide residues and environmental contaminants in foods. J Chromatogr A. 1449, 17-29 (2016).
- Chamkasem, N., Ollis, L. W., Harmon, T., Lee, S., Mercer, G. Analysis of 136 pesticides in avocado using a modified QuEChERS method with LC-MS/MS and GC-MS/MS. J Agric Food Chem. 61 (10), 2315-2329 (2013).
- Rajski, &. #. 3. 2. 1. ;., Lozano, A., Uclés, A., Ferrer, C., Fernández-Alba, A. R. Determination of pesticide residues in high oil vegetal commodities by using various multi-residue methods and clean-ups followed by liquid chromatography tandem mass spectrometry. J Chromatogr A. 1304, 109-120 (2013).
- Hernández-Borges, J., Ravelo-Pérez, L. M., Hernández-Suárez, E. M., Carnero, A., Rodríguez-Delgado, M. &. #. 1. 9. 3. ;. Analysis of abamectin residues in avocados by high-performance liquid chromatography with fluorescence detection. J Chromatogr A. 1165 (1-2), 52-57 (2007).
- Moreno, J. F., Liébanas, F. A., Frenich, A. G., Vidal, J. M. Evaluation of different sample treatments for determining pesticide residues in fat vegetable matrices like avocado by low-pressure gas chromatography-tandem mass spectrometry. J Chromatogr A. 1111 (1), 97-105 (2006).
- . Commission Directive 2002/63/EC of 11 July 2002 establishing Community methods of sampling for the official control of pesticide residues in and on products of plant and animal origin and repealing Directive 79/700/EEC. Official Journal of the European Union. L187, 30-43 (2002).
- . European Regulation, 396/2005, Regulation (EC) NO 396/2005 of the European Parliament and of the Council of 23 February 2005 on maximum residue levels of pesticides in or on food and feed of plant and animal origin and amending Council Directive 91/414/EEC. Official Journal of the European Union. L70, 1-16 (2005).
- González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Lehotay, S. J., Hernández-Borges, J. Validation of a modified QuEChERS version for high-throughput analysis of a wide range of pesticides in foods. Abstracts of Papers of the American Chemical Society. 246, (2013).
- González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Lehotay, S. J., Hernández-Borges, J., Rodríguez Delgado, J. Ammonium formate buffer in QuEChERS for high throughput analysis of pesticides in food by fast, low-pressure GC-MS/MS and LC-MS/MS. Abstracts of Papers of the American Chemical Society. 248, (2014).
- González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Lehotay, S. J., Hernández-Borges, J., Rodríguez-Delgado, M. &. #. 1. 9. 3. ;. Use of ammonium formate in QuEChERS for high-throughput analysis of pesticides in food by fast, low-pressure gas chromatography and liquid chromatography tandem mass spectrometry. J Chromatogr A. 1358, 75-84 (2014).
- Varela-Martínez, D. A., González-Sálamo, J., González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Quick Hernández-Borges, J. Quick, easy, cheap, effective, rugged, and safe (QuEChERS) extraction. Handbooks in Separation Science. , 399-437 (2020).
- González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;. Analysis of organochlorine pesticides in a soil sample by a modified QuEChERS approach using ammonium formate. J Vis Exp. 191, e64901 (2023).
- González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., Dionis-Delgado, S., Asensio-Ramos, M., Hernández-Borges, J. Pesticide analysis in toasted barley and chickpea flours. J Sep Sci. 35 (2), 299-307 (2012).
- Varela-Martínez, D. A., González-Curbelo, M. &. #. 1. 9. 3. ;., González-Sálamo, J., Hernández-Borges, J. High-throughput analysis of pesticides in minor tropical fruits from Colombia. Food Chem. 280, 221-230 (2019).
- Li, L., Li, W., Qin, D. M., Jiang, S. R., Liu, F. M. Application of graphitized carbon black to the QuEChERS method for pesticide multiresidue analysis in spinach. J AOAC Int. 92 (2), 538-547 (2009).
