프로그래밍 풀러와 패치 - pipettes와 샤프 전극을 만들기

Summary

이 동영상은 전기 생리학에 대한 패치 pipettes과 날카로운 전극을 만들 수있는 프로그램 풀러를 사용하는 방법을 보여줍니다. 동일한 절차는 주사 바늘을 포함한 유리 다양한 도구를 만드는 데 사용할 수 있습니다.

Abstract

유리 microelectrodes는 (또한 pipettes라고도 함) 수십 년 동안 전기 생리학의 일하는 말이되어 왔습니다. 오늘날과 같은 pipettes은 프로그램 풀러를 사용하여 유리 모세관에서 만들어집니다. 이러한 악기 열 금속 필라멘트 또는 레이저와 중력, 모터 또는 둘 모두를 사용하여 유리를 그릴 중 하나를 사용하여 모세관. 세포내 레코딩을위한 날카로운 전극은 열, 중력, 그리고 모터의 조합을 사용하는 동안 패치 – 클램프 녹음 Pipettes은 단 열과 중력을 이용하여 형성됩니다. 세포내 기록 pipettes를 만들기 위해 사용되는 절차는 Xenopus의 oocytes에 cRNA 분사를 포함한 다양한 어플 리케이션을위한 주사 바늘을 만들기 위해 사용하는 것과 비슷합니다. 좁은 유리 세포 기록 (외경 = 1.0 ㎜)에 사용되는 동안 일반적으로, 모세관 유리에 직경 <1.2 mm은 패치 클램프 녹음 pipettes을하는 데 사용됩니다. 각 도구에 대한, 풀러가 약간 다르게 프로그램입니다. 이 비디오는 사전에 설립 풀러 프로그램을 사용 기록 pipettes 두 가지를하는 방법을 보여줍니다.

Protocol

풀링 pipettes 풀러 등 서터 P – 97 플라밍 / 브라운으로 microelectrode를 사용하여 약 10-20 pipettes 세트를 가져옵니다. 당신의 모세관 유리를 선택합니다. 우리는 borosilicate 모세관 (서터 BF150 – 110 – 10, 1.5mm 외경, 내경 1.1mm, 길이 10cm)을 사용합니다. 그것이 깨끗하고 먼지가 무료로 남아 있도록 신중하게 유리를 저장합니다. 당기는 프로그램을 디자인합니다. 우리는 내림?…

Discussion

프로토콜 그림 여기에 전기 생리학 실험실에서 일상 사용되고 또한 세포 및 동물 주입 바늘을하는 데 사용됩니다. 프로그램 풀러와 함께, 그것은 사용의 다양한 pipettes를 만들기 위해 쉽습니다. 관심과 관리를 통해 귀하의 풀러의 필라멘트는 1 년 이상 지속됩니다. 실험과 함께 행운을 빕니다.

Materials

Material Name	Type	Company	Catalogue Number	Comment
Micropipette Puller	Instrument	Sutter Instruments	P-97	Or similar instrument (e.g. Sutter P-87 or P-2000)
Glass Capillaries	Reagent	Sutter Instruments	BF150-86-10	Or, similar capillary glass. To make filling the pipette easier, use a capillary with a glass filament.