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Geração de células-tronco pluripotentes induzidas pela reprogramação fibroblastos de rato embrionárias com um fator de transcrição Quatro, Doxiciclina induzível Sistema de Transdução Lentivirus
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Journal JoVE Biologie
Generation of Induced Pluripotent Stem Cells by Reprogramming Mouse Embryonic Fibroblasts with a Four Transcription Factor, Doxycycline Inducible Lentiviral Transduction System

Geração de células-tronco pluripotentes induzidas pela reprogramação fibroblastos de rato embrionárias com um fator de transcrição Quatro, Doxiciclina induzível Sistema de Transdução Lentivirus

DOI:
10.3791/1447-v

•

11:48 min

•

November 13, 2009

•

, , ,
1Stemgent, 2Whitehead Institute for Biomedical Research,MIT – Massachusetts Institute of Technology

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 00:09Introduction
  • 00:30Viral Transduction of Mouse Embryonic Fibroblasts
  • 01:25Doxycycline Induced Reprogramming
  • 03:18Immunocytochemical Analysis of Transduction Efficiency
  • 05:31Isolating and Expanding Induced Pluripotent Stem Cell Colonies
  • 07:39Immunocytochemical Analysis for Pluripotency
  • 09:14Pluripotency Marker Analysis
  • 10:31Conclusion

Summary

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O Stemgent induzível Dox Mouse Set Lentivirus TF pode reprogramar fibroblastos embrionárias de camundongos (MEFs) para pluripotentes induzidas da haste (iPS) células. Aqui demonstramos o protocolo para DOX induzível-expressão de fatores de reprogramação em ratos transcrição Oct4, Sox2, KLF4 e c-Myc para gerar colônias iPS que expressam marcadores comuns MES pluripotência.

Tags

Induced Pluripotent Stem CellsReprogrammingTranscription FactorsDoxycycline Inducible Lentiviral Transduction SystemMouse Embryonic FibroblastsPluripotencyRetrovirus-mediated DeliveryOct4Sox2C-MycKlf4Doxycycline Inducible Lentiviral Delivery SystemAdult Mouse Somatic Cell TypesEmbryonic Stem CellsRegenerative MedicineTeratoma FormationDifferentiated CellsEthical DilemmaStemgent DOX Inducible Mouse TF Lentivirus Set

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