Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:00Titre
- 00:05Introduction
- 01:01Cell Preparation
- 02:28Immunofluorescence Staining
- 05:00Microscopy
- 06:12Analysis Foci Counting
- 07:56Analysis Line Scan
- 08:39Analysis 3D-Image Reconstruction
- 09:09Conclusion
Microscopische analyse van γH2AX foei, welke vorm na de fosforylatie van H2AX op Ser-139 in reactie op DNA dubbelstrengs breuken, is uitgegroeid tot een onmisbaar instrument in straling biologie. Hier hebben we gebruik gemaakt van een antilichaam aan mono-gemethyleerde histon H3 op lysine 4 als een epigenetische marker van actief transcriberen euchromatin, om de ruimtelijke verdeling van de straling-geïnduceerde γH2AX formatie binnen de kern te evalueren.
Tags
Spatial DistributionγH2AXIonizing RadiationDNA Double-strand Breaks (DSBs)Ser-139 ResidueHistone H2AXPhosphorylationPhosphatidyl-inosito 3-kinase (PI3K) FamilyAtaxia Telangiectasia Mutated (ATM)DNA-protein Kinase Catalytic SubunitATM And RAD3-related (ATR)Immunofluorescence MicroscopyγH2AX FociDSB Formation And RepairRadiation Modifying CompoundsCytotoxic CompoundsDNA Damage And RepairChromatin Templateγ-irradiation-induced γH2AX Foci
