Name: 폐기 인간 태아 두피 조직에서 신경 줄기 세포의 생성 (동영상) | JoVE Journal
Uploaded: 2011-05-25T12:00:00.000+00:00
Duration: 7 min 29 s
Description: 배우세요 인간 태아 전두엽 피질 조직에서 신경 줄기 세포를 분리하고 배양하는 방법을. 이 기술은 신경 질환의 병리학적 과정을 연구하고 약물 효능을 평가하는 데 활용됩니다.

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HD054347와 VLS에 NS063997 - 01 :이 작품은 국립 보건원에 의해 부분적으로 지원되었다. 이 작품은 또한 건강 계약 # C024324 VLS로의 뉴욕 국무부를 통해 엠파이어 스테이트 줄기 세포 기금에 의해 부분적으로 지원되었다. 의견 여기 표현은 전적으로 저자의 견해이며, 반드시 엠파이어 스테이트 줄기 세포위원회, 건강의 뉴욕 국무부, 또는 뉴욕주 분들을 반영하지 않습니다. VLS는 도리스 듀크 임상 과학자 발달 수상자입니다. 또한 안티 - O1, 안티 - O4 항체 자신의 선물을 교수 티모시 Vartanian 감사합니다.

1. 해부 및 신경 줄기 세포 문화의 유지 관리를위한 솔루션 및 자료 준비 <ol><li> 미리 100ml 해부 매체 (넉아웃 DMEM/F12, Invitogen)을 준비하고 냉동. </li><li> Prepare100 ML 문화 매체 (줄기 프로 NSC SFM, Invitrogen)와 37 ° 보관 물을 욕조에 C. </li><li> 세포의 장기 cryopreservation에 대한 셀 - 냉동 매체 (녹아웃 DMEM/F12 +10 % FBS + 5% DMSO)를 준비합니다. </li><li> 원하는 경우, 조직 고정을위한 4 % paraformaldehyde (PFA)를 준비합니다. </li><li> 핸들과 멸균, autoclaved 포셉와 메스 블레이드는 절개에 사용됩니다. </li><li> 피펫 총 10 ML 전송 pipettes, 그리고 해리 40 μm의 셀 스트레이너 (BD 팰컨 352,340)를 별도로 설정합니다. </li><li> 해부 여러 10cm 문화 요리 (BD), 해리 50 ML의 원심 분리기 튜브 (BD), 냉동 세포 조직 보관 및 냉동 튜브 (BD)에 대한 1.5 ML 원심 분리기 튜브를 따로 설정합니다. </li></ol> 2. 인간 태아 뇌에서 인간 신경 줄기 세포를 분리 <ol><li> 즉시 태아의 종료 후 가능한 조직의 적출하는 것은 절차의 성공에 필수적인 요소입니다. 선택 절차를 보려면 샘플을 얻기 위해 타이밍은 태아의 죽음 이후 시간을 최소화하기 위해 않도록 사전에 준비하실 수 있습니다. 개념의 제품은 2 시간 게시 절차 내에 수확하지만, 이상 분 이내에 선택 절차에 형성될 수 있습니다. 태아 조직은 종종 조각입니다. 그러나, 일반적으로 두뇌의 상당 부분은 시각적인 신원 확인을 위해 그대로 유지됩니다. 임신 성 연령 (GA)의 제한은 법정 법률에 의해 결정되지만 18-22주 GA 사이에이 프로토콜을 사용하여 수행되었습니다. </li><li> 태아 두뇌는 얼음처럼 차가운 마네 DMEM/F12 솔루션을 포함하는 10 ML 페트리 접시에 배치됩니다. 해부 학적 경계표에 의해 피질의 다른 부분을 식별합니다. 전두엽과 parieto - 뒤통수 cortices에 대한 경계는 중앙 고랑과 실비안 균열 (fissure)의 추정 교차로에서 지향하고 있습니다. 뇌실은 그대로 유지하고 손상을 확인하고, 중앙 고랑에 앞쪽에 전두엽 피질로부터 수술 블레이드와 실비안 균열 (fissure)의 경계를 따라 조직을 해부하다. </li><li> 전두엽 피질의 분리 블록에서 잔여 혈액과 meninges를 제​​거합니다. 샘플이 충분 품질 경우, 다양한 목적을 위해 여러 개의 작은 샘플로 블록을 해부하다에 이상적입니다 : 섹션 (PFA, 4 % paraformaldehyde에 고정) 및 단백질 / mRNA assays (빠른 -80 ° C에 냉동). </li><li> 50 ML의 원심 관에 선택한 뇌 블록을 전송하고, 조직의 볼륨의 약 3 시간에 얼음처럼 차가운 마네 DMEM/F12 솔루션을 추가합니다. 부드럽게 10 ML 전송 피펫과 기계 pipetting하여 조직을 떼어 놓다 모든 조직 때까지 (일반적으로 20-30 회) 조각되고, 그리고 단일 또는 가까운 단일 세포를 얻는 40 μm의 셀 스트레이너 (BD 팰컨 352340)를 통해 세포를 필터링 정지. </li><li> 5 분 2000 RPM과 실온에서 세포 현탁액을 원심 분리기, 10 ML 신선한 따뜻한 문화 매체 (줄기 프로 NSC SFM)의 세포 펠렛을 resuspend하고, hemocytometer로 휴대폰 번호를 계산합니다. </li><li> 각 25cm 두 문화 flasks에 5 ML 따뜻한 문화 매체를 추가하고 각 플라스크에 2X10 6 세포를 전송합니다. 문화는 37 유지 ° 분석하기 전에 1 주일 C / 5% CO 2 배양기. 자세한 문화 또는 실험 동안 일주일에 한 번씩은 절반 매체를 변경합니다. </li></ol> 3. 자세한 특성화 또는 experimentations에 대한 신경 줄기 세포의 Manipulaton <ol><li> Neurospheres은 보통 200 400 μm의 사이에 이르기까지 NSC 직경과 추천 문화 조건 1-2주 양식. 이 단계에서 Neurospheres 단일 세포를 얻는 15 분 37 칼슘, 마그네슘 무료 행크스 매체 (행크스)에서 0.2 g / L EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) ° C로 dissociated 수 있습니다. 세포 현탁액은 신선한 행크스에 씻어서 2,000 RPM에서 냈지, 그리고 subculture에 대한 따뜻한 문화 매체 replated 있습니다. </li><li> 차별을 시작하려면, dissociated 전지 coverslip 당 1X10 5 셀 (24mmX24mm)의 밀도에 poly-D-lysine/laminin 한 코팅 coverslips에 도금입니다. Oligodendrocyte 차별은을 위해 마네 DMEM/F12 (Invitrogen, 메인, MD) 2% B27 (50X, Invitrogen, 메인, MD) 10 NG / ML bFGF 100 NG / ML 쉬이잇 + 10ng/ml PDGF - AA의 세포를 유지하여 이루어집니다 이일은 다음 다른 오일에 대한 성장 요인없이 동일한 매체로 전환. 의 연결을 분화는 7 일 동안 마네의 유지 세포 DMEM/F12 2퍼센트 B27 (50X)를 얻을 수 있습니다. Astrocyte 차별화는 일주일 동안 마네 DMEM/F12 1% FBS 안에 culturing 세포에 의해 이루어집니다. </li><li> 유전자와 신경 줄기 세포의 Transfection은 preformed neurospheres에서 dissociated 세포로 할 수 있습니다. 여기, 우리는 electroporation에 의해 EGFP - C1과 transfected 신경 줄기 세포를 보여주었다. EGFP - C1 구조의 electroporation은 (마우스 신경 줄기 세포에 대한 AMAXA Nucleofector 키트를 사용하여 수행되었습니다 VPG -회사의 지시 아래 AMAXA Nucleofector 장치 (Lonza AAD - 1001)과 1004). 즉, 1 X 10 6 세포를 5 μg의 DNA는 100 μl transfection 매체와 혼합되었고, 펄스 electroporation 후, 세포는 더 이상 문화의 중간을 유지하는 신경 줄기 세포에서 resuspended되었습니다. transfected 세포의 분화는 단계 3.2에서 설명한 동일한 절차에 따라 electroporation 후 neurospheres 3~4일의 분리와 처리되었습니다. </li></ol> 4. 냉동 신경 줄기 세포와 비주류 <ol><li> Dissociated 세포 suspensions는 1X10 7 셀 / 유리병 / ML의 농도와 centrifuged 및 냉동 매체 resuspended 있습니다. 천천히 -20 ° C, -80에서 세포를 동결 ° C 후 오랫동안 저장을위한 액체 질소로 전송할 수 있습니다. </li><li> 세포는 빠른 37와 해동 아르 ° C 물 목욕 및 resuspended은 세척을위한 혈청 DMEM/F12 +10 % 따뜻하게 냉동 매체를 제거하는 centrifuged 및 예열 문화 매체에 resuspended. </li></ol> 5. 대표 결과 : 18주 임신 성 나이에 정상적인 태아의 신경 줄기 세포는 설명 방법과 neurospheres가 둥근, 부드러운 테두리와 비교적 균일한 크기 (Fig.2A)와 일주일 뒤에 볼 수있는 다음과 같은 교양되었습니다. 이러한 neurospheres은 EGFP - C1이나 기타 구성과 transfected 및 형광 현미경 (Fig.2B)에 따라 다음 수 있습니다. 설립 neurospheres 다음 EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산)과 dissociated 및 코팅 coverslips에 분산된 세포로 도금했다. 각각의 프로토콜에 따라 차별화된 세포는 4 % parafamaldehyde로 고정하고, 다른 세포 유형의 특정 마커와 스테인드되었습니다. Multipotentiality는 (Fig2E, F, rhodamine) astrocytes (Fig2C, D, rhodamine) 뉴런을 나타내는 마커 및 oligodendrocytes (Fig2G, H, rhodamine)의 표현과 관찰이다. EGFP의 electroporation 공사를하지 세포는 다른 세포 유형으로 차별하고 다른 셀에 특정 마커와 스테인드되었습니다. Multipotentiality는 (Fig3C, rhodamine 및 Fig3D, fluoroscein) astrocytes (Fig3A, B, fluoroscein) 뉴런을 나타내는 마커 및 oligodendrocytes (Fig3E, F, rhodamine)의 표현과 관찰이다. <img src="/files/ftp_upload/2681/2681fig1.jpg" alt="그림 1" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 1"> 그림 1. 폐기 인간 태아의 두뇌에서 신경 줄기 세포를 분리하는 실험 절차의 도식 <img src="/files/ftp_upload/2681/2681fig2.jpg" alt="그림 2" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 2"> 그림 2. 체외에서 propogated Undifferentiated와 차별화된 인간의 신경 세포. (A) Neurospheres은 부드럽고 둥근 테두리 1 이상의 주일 동안 문화 이후 급속한 성장을 보여 위상 콘트라스트 현미경 아래에 표시됩니다. (B) 다양한 plasmids과 구성의 소개 transfection을 통해 형성될 수 있습니다. EGFP - C1의 transfection 다음과 같은 세 가지 일, 여러 세포는 fluoroscein의 immunostaining 및 형광 현미경 하에서 본 녹색 형광 단백질의 표현을 보여줍니다. EGFP - C1 transfected neurospheres은 뉴런 (C, D), astrocytes (E, F)와 oligodendrocytes (G, H)로 서로 다른 조건에서 dissociated하고 차별하고 rhodamine의 형광 아래에서 보았다. 동시에, transfected EGFP 긍정적인 세포 fluoroscein 형광 아래 표시됩니다. Transfected 세포 (흰색 화살표 머리) untransfected 셀 (흰색 화살표)에서 구별할 수 있습니다. 세포 핵은 Hoechst33342 물들일 수 있습니다. 스케일 바는 200 μm의, B 100 μm의 및 CH 25 μm의 수 있습니다. <img src="/files/ftp_upload/2681/2681fig3.jpg" alt="그림 3" data-altupdatedat="1787634011000" data-alt="그림 3"> 그림 3. transfection없이 Neurospheres은 뉴런 (A, B, fluoroscein), astrocytes (C, rhodamine, D, fluoroscein)와 oligodendrocytes (E, F, rhodamine)으로 서로 다른 조건에서 dissociated와 차별됩니다. 세포 핵은 Hoechst33342 물들일 수 있습니다. 스케일 바 AF 25 μm의 수 있습니다.

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</ol>

관심 없음 충돌 선언하지 않습니다.

문화 신선한 조직 및 생산 인간의 세포 라인에 대한 다양한 접근 방법이 있습니다. 역사적으로, 신선한 조직은 수확되었고 중추 신경계의 여러 세포 유형을 생성하는 즉시 양식. 이 접근법은 그러나 명확하게 얻은 인간 샘플의 경우에는 일반적으로 매우 작은 수있는 샘플의 수에 따라 제한됩니다. 조작의 최소한의 정도로봤을 때, 갓 교양 신경 세포가 확장 culturing에서 잠재적인 유물을 제한함으로써 가장 안정적인 실험 시스템을 제공합니다. 제한된 공급 다양한 oncogenes 12, 13의 삽입을 통해 영원히 있었다 인간의 세포 라인을 생성하는 두 번째 접근되었다. 이 접근법에 대한 우려는 이러한 세포의 종양 발생 조작은 셀 속성을 변경 것이라는 가능성에 누워. 또한, 인간의 세포 라인을 생성하기위한 근거의 일부는 다양한 인간의 장애의 이식 치료에 대한 가능성이되었습니다. 불후의 세포 라인은 암 성장 위험 predispose 수 있습니다. 이러한 세포 라인에 대한 이점은 라인의 균일, 두뇌의 지역 고유의 다양한의...

<table border="1"><tbody><tr><th> 시약의 이름 </th><th> 회사 </th><th> 카탈로그 번호 </th><th> 댓글 (옵션) </th></tr><tr><td> 녹아웃 DMEM/F12 </td><td> Invitrogen </td><td> 12660-012 </td><td> 해리 매체 </td></tr><tr><td> 스템 프로 NSC SFM </td><td> Invitrogen </td><td> A10509 - 01 </td><td> 문화 매체 </td></tr><tr><td> 태아 소 혈청 </td><td> Invitrogen </td><td> 10091-148 </td><td> 냉동 매체 </td></tr><tr><td> 행크스 솔루션 (- CA 2 +, - MG 2 +) </td><td> Invitrogen </td><td> 14175-095 </td><td> 해리 매체 </td></tr><tr><td> DMSO </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> D2650 </td><td> 냉동 매체 </td></tr><tr><td> EDTA (에틸렌 다이아 민 테트라 초산) </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> 431788 </td><td> 해리 매체 </td></tr><tr><td> Paraformaldehyde </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> 158127 </td><td> 고정 솔루션 </td></tr><tr><td> bFGF </td><td> R &amp; D </td><td> 234 - FSE </td><td> 차별화 매체 </td></tr><tr><td> 쉬이잇 </td><td> R &amp; D </td><td> 1845 - SH </td><td> 차별화 매체 </td></tr><tr><td> PDGF - AA </td><td> R &amp; D </td><td> 221 - AA </td><td> 차별화 매체 </td></tr><tr><td> B27 </td><td> Invitrogen </td><td> 17504-044 </td><td> 차별화 매체 </td></tr><tr><td> 마우스 방지 MAP2 </td><td> 시그마 - 알드리치 </td><td> M2320 </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 DCX </td><td> 세포 신호 </td><td> 4604s </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 GFAP </td><td> DAKO </td><td> Z0334 </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 S100B </td><td> DAKO </td><td> Z0311 </td><td> 1:200 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 O1 </td><td> 교수 티모시 Vartanian의 선물 * </td><td></td><td> 1시 50분 </td></tr><tr><td> 토끼 방지 O4 </td><td> 교수 티모시 Vartanian의 선물 * </td><td></td><td> 1시 50분 </td></tr><tr><td> 40μm 셀 스트레이너 </td><td> BD 팰컨 </td><td> 352340 </td><td></td></tr></tbody></table> * 티모시 Vartanian, MD, 박사, 신경과 및 신경 과학, 웨일 코넬 메디컬 칼리지, 뉴욕, 미국학과

폐기 인간 태아 두피 조직에서 신경 줄기 세포의 생성

Generation of Neural Stem Cells from Discarded Human Fetal Cortical Tissue

신경 줄기 세포 (NSCs)은 대뇌 피질 판의 개발 중에 심실 영역 neuroepithelium 함께 거주. 이러한 초기 progenitors 궁극적으로 중급 progenitors을 일으키다 이상, 대뇌 피질을 형성 다양한의 연결 및 glial 세포 subtypes. 폐기 정상 태아 조직에서 인간 NSCs을 (그래서 neurospheres라고도 함) 생성 및 확장하는 능력은 바로 정상적인 인간 NSC 개발 1-5의 기능 측면을 연구하기 위해있는 수단을 제공합니다. 이 접근법은 또한이를 통해 조상의 증식, 이주 및 차별 6-9를 변경 질병 프로세스를 식별할 수있는 기회를 affording, 알려진 신경 질환에서 NSCs의 생성 방향으로 이동하실 수 있습니다. 우리는 빠른 속도로 알츠하이머 질병 표현형 10,11에 기여할 수 있습니다 인간의 다운 증후군의 NSCs의 병리 학적 메커니즘을 식별에 초점을했습니다. 나도 생체내에이나 체외 마우스 모델은 인간의 염색체 21에 위치한 유전자의 동일한 레퍼토리를 복제할 수 없습니다. 여기 중단 인간의 태아 cortices의 증후군의 NSCs 다운 격리와 문화에서 성장하는 간단하고 신뢰할 수있는 메서드를 사용합니다. 방법론이 제한 해부의 명소, 셀 정렬은 도금 인간 NSCs의 passaging과 조직, 절개를 수확의 특정 측면을 제공합니다. 우리는 또한 더 선택적 세포 subtypes에 인간 NSCs의 차별을 유도하는 몇 가지 기본적인 프로토콜을 제공합니다.

폐기 인간의 태아 대뇌 피질의 조직에서 신경 줄기 세포의 격리와 문화에 대한 간단하고 신뢰할 수있는 방법을 설명합니다. 알려진 인간의 신경 장애에서 파생된 문화가 같은 약리 효능을 평가하기위한 플랫폼을 제공뿐만 아니라, 병적인 세포 및 분자 공정의 특성에 사용될 수 있습니다.

신경줄기세포(NSCs)는 피질판의 발달 과정 동안 뇌실구역 신경상피를 따라 분포합니다. 이러한 초기 전구세포들은...

본 실험 절차의 전반적인 목적은 폐기된 전두엽 피질 조직에서 인간 신경줄기세포를 분리하는 것입니다. 이는 인간 태아 뇌를 해부하기 전, 용액과 재료를 미리 준비함으로써 수행됩니다. 이후 분리된 신경줄기세포의 추가 증식, 특성 분석 및 실험을 포함한 유지 관리 과정이 이어집니다.장기 보관이 가능하며, 전구세포를 뉴런 및 글리아 세포 유형으로 분화시키기 위한 하위 배양 확립 또한 가능합니다. 궁극적으로, 정상 CNS 유래 세포의 분화 특성을 분석하고 이를 알려진 신경 질환이 있는 CNS 유래 세포의 분화와 비교할 수 있습니다. 이 기술의 함의는 모든 인간 CNS 질환의 치료 또는 진단으로 확장됩니다.이 기술은 병리적 S를 평가하고 특정 질환에 대한 신약의 약리학적 효능을 측정할 수 있는 간단하고 신뢰할 수 있는 플랫폼을 제공합니다. 다분화능 세포의 매우 높은 가치로 인해, 프로토콜을 시작하기 전에 모든 재료를 미리 준비해야 합니다. 샘플 손상 위험을 최소화하기 위해 냉장 해부 도구, 37 °C로 가온된 배양액 및 배지, 그리고 장기 보관을 위한 냉장 세포 동결 배지를 준비하십시오.해부를 위한 저온 보존을 위해, 세포 해리를 위한 멸균 오토클레이브 처리된 핀셋과 핸들이 장착된 메스 날을 준비하십시오. 피펫 건, 10 milliliter 전이 피펫 및 40 micromolar 세포 스트레이너를 준비하십시오. 해부에 사용할 10 centimeter 배양 접시 여러 개를 준비하여 따로 둡니다.해리를 위한 50 milliliter 원심분리 튜브, 조직 보관을 위한 1.5 milliliter 원심분리 튜브 및 세포 동결을 위한 냉동 보관 바이알을 준비합니다. 성공적인 실험을 위해, 18~22주령의 생존 조직은 확보 후 2시간 이내에 채취해야 합니다.이상적으로는, 선택적 시술 후 수거할 수 있도록 미리 협의하여 태아 조직을 확보한 후 수 분 이내에 수집하는 것이 좋습니다. 조직이 파편화되어 있는 경우가 많으나, 뇌의 상당 부분은 온전하게 유지됩니다. 얼음처럼 차가운 dissection Medium이 채워진 10 milliliter 페트리 접시에 뇌를 수집하십시오.해부학적 지표를 통해 피질의 서로 다른 부위를 식별합니다. 전두엽, 두정엽 및 후두엽 피질의 경계는 중심구(central sulcus)와 실비우스열(syl fissure)의 외삽된 교차점을 기준으로 설정합니다. 수술용 칼날을 사용하여 중심구 앞쪽의 전두엽 피질과 실비우

generation-neural-stem-cells-from-discarded-human-fetal-cortical

Research

연구

JoVE Journal

Neuroscience

신경과학

우리는 인간의 연결을 progenitors 및 신경 수리 개발 CNS에의 연결을 세포 유형의 대형 공급 파생을 가능하게 작은 분자와 함께 정의된 조건 하에서 유지 pluripotent 인간 배아 줄기 세포에서 직접 neuroblasts의 유도를위한 프로토콜을 설립했습니다.

작은 분자와 유도 Pluripotent 인간 배아 줄기 세포에서 인간의 연결을 Progenitors과 뉴런의 효율 유도

이 동영상은 효소 처리를 사용하여 인간의 신경 줄기세포를 신경 및 성상세포 전구세포로 분화시키고 성장 인자가 풍부한 배지에서 배양하여 결국 특수 전구 세포로 성숙시키는 방법을 보여줍니다.

인간 신경 줄기 세포를 신경 및 성상 세포 전구 세포로 분화

이 비디오는 신경 줄기 세포의 접착력과 성장을 향상시키기 위해 폴리오르니틴과 라미닌으로 코팅된 유리 커버슬립을 제조하는 방법을 설명합니다. 이 기술은 순차적인 배양 및 세척을 포함하며, 뉴런에서 발견되는 구조를 모방하여 뉴런 세포 성장 및 분화를 촉진하는 지지 매트릭스의 형성을 촉진합니다.

인간 신경 줄기 세포에서 피질 피라미드 뉴런 생성

성인의 뇌에서 수확 한 신경 줄기 세포는 신경 시스템 개발의 기초 연구에서 재생 의학의 잠재적 인 임상 응용 프로그램을 탐험에 이르기까지 다양한 애플리케이션에 활용 증가하고있다. 이 실험 결과를 소리를하는 것이 중요합니다 이러한 세포를 성장하는 데 사용되는 분리 및 배양 조건에서 엄격한 통제를한다.

성인 쥐의 뇌의 기존 및 비 인습적 인 지역에서 신경 줄기 세포 성장

이 프로토콜은 단일 세포 현탁액 분해없이 구형 신경 줄기 및 전구 세포 응집체의 확장을 허용 신규 기계적 자르고 방법을 설명한다. 세포 / 세포의 접촉을 유지하는 것은 40 구절에 대한 신속하고 안정적​​인 성장을 할 수 있습니다.

인간의 신경의 집계의 cGMP-해당 확장 방법은 줄기 및 전구 세포는 다 능성 줄기 세포 또는 태아 뇌 조직에서 파생 된

직접 방법 말초 혈 세포로부터 농축 조혈 전구 세포로부터 인간 신경 줄기 세포를 유도하기 위해 개발되었다.

말초 혈액 조혈 전구 세포에서 인간 신경 줄기 세포의 직접 유도

다 자란 포유류의 척수에는 배양에서 분리 및 확장될 수 있는 신경줄기세포/전구세포(NSPC)가 포함되어 있습니다. 이 프로토콜은 쥐와 인간 장기 이식 기증자로부터 성인 척수의 뇌실 주위 영역에서 생성된 NSPC의 수확, 분리, 배양 및 전달을 설명합니다.

뇌실 주위 백질 성인 쥐의 지역 및 인간의 척수에서 신경 줄기 / 전구 세포의 분리

유도 만능 줄기 세포의 생성은자가 이식의 유도에 대한 매혹적인 전망을 제공합니다. 그러나, 만능 상태와 힘든 다시 차별화를 통해 진행은 여전히​​ 임상 번역을 방해한다. 여기에서 우리는 성인 인간 섬유 아세포의 유도와 유도 된 신경 전구 세포에 자신의 직접 변환과 신경 계통에 후속 차별화를 설명합니다.

성인 인간 섬유 아세포의 유도 및 확장 신경 전구 세포에 자신의 직접 변환

여기, 전자13 마우스 배아 절 예 하에서 신경 줄기 세포의 분리에 대 한 새로운 microsurgical 기술을 소개합니다.

절연 및 마우스 배아 신경 줄기 세포의 문화

이 프로토콜은 센다이 바이러스 감염에 의해 신경 줄기 세포를 유도하는 말초 혈액 단핵 세포의 재프로그래밍을 제시, 도파민성 뉴런으로 iNC의 분화, 일방적으로 병변에 DA 전구체의 이식 파킨슨병 마우스 모델, PD 치료를 위한 iNSC 유래 DA 전구체의 안전성 및 효능에 대한 평가.

말초 단핵 세포에서 유도 된 신경 줄기 세포의 생성 및 이식 연구에 대 한 도파민성 신경 전구체로 분화

우리는 유전자 변형되지 않은 (GM 무료) 방법을 제시하여 재프로그래밍 된 말초 혈액 세포에서 신경 표현형을 가진 세포를 얻습니다. 새로운 인간 GPI 연결 단백질에 연결 된 신호 경로의 활성화 인간의 다능 한 줄기 세포를 얻기 위한 효율적인 GM 무료 방법을 밝혀.

혈액 유래 신경 세포의 GM 무료 생성

배우세요 인간 태아 전두엽 피질 조직에서 신경 줄기 세포를 분리하고 배양하는 방법을. 이 기술은 신경 질환의 병리학적 과정을 연구하고 약물 효능을 평가하는 데 활용됩니다.

폐기 인간 태아 두피 조직에서 신경 줄기 세포의 생성

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