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Bromodeoxiuridina Labeling (BrdU) e separação de células subseqüentes Fluorescence Activated de Cultura independente de Identificação de carbono orgânico dissolvido de degradação bacterioplâncton
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Bromodeoxyuridine (BrdU) Labeling and Subsequent Fluorescence Activated Cell Sorting for Culture-independent Identification of Dissolved Organic Carbon-degrading Bacterioplankton

Bromodeoxiuridina Labeling (BrdU) e separação de células subseqüentes Fluorescence Activated de Cultura independente de Identificação de carbono orgânico dissolvido de degradação bacterioplâncton

DOI:
10.3791/2855-v

•

12:46 min

•

September 10, 2011

•

, , , ,
1Biological Sciences,Kent State University, 2Marine Sciences,University of Georgia (UGA)

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 02:12Water Sample Processing
  • 03:28Microcosm Establishment and Incubation
  • 05:13In situ Immunodetection for BrdU Incorporation and FACS
  • 08:43Filter PCR Amplification of 16S rRNA Genes
  • 10:42Representative Results
  • 12:05Conclusion

Summary

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Bacterioplâncton ambientais são incubados com um modelo de carbono orgânico dissolvido composto (DOC) e um reagente rotulagem DNA, bromodeoxiuridina (BrdU). Depois, DOC-degradante células são separadas da comunidade em massa com base em sua incorporação BrdU elevada usando separação de células ativadas por fluorescência (FACS). Estas células são então identificadas por análises subseqüentes molecular.

Tags

BromodeoxyuridineBrdU LabelingFluorescence Activated Cell SortingCulture-independent IdentificationDissolved Organic CarbonBacterioplanktonMicrobial DegradationAquatic Environments16S RRNA Gene-based Molecular AnalysisDOC CompoundsMicrocosmsImmunodetectionHI CellsLI Cells

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