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Eine Schritt-für-Schritt-Verfahren zur Rekonstitution eines ABC-Transporter in Nanodisc Lipid Particles

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Biologie

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Journal JoVE Biologie

A Step-by-step Method for the Reconstitution of an ABC Transporter into Nanodisc Lipid Particles

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Eine Schritt-für-Schritt-Verfahren zur Rekonstitution eines ABC-Transporter in Nanodisc Lipid Particles

DOI:

•

12:25 min

•

August 31, 2012

•

Huan Bao, Franck Duong, Catherine S. Chan

¹Department of Biochemistry and Molecular Biology,University of British Columbia

Chapitres

00:05Titre
02:08Preparation of the Membrane Scaffold Protein, MSP
03:53Preparation of the MalFGK₂ Complex
05:09Preparation of Phospholipids
06:07Preparation of Bio-Beads & Nanodisc Reconstitution
07:59Nanodisc Analysis: Native Gel Electrophoresis
08:26Nanodisc Analysis: Dynamic Light Scattering (DLS)
09:11Nanodisc Analysis: ATPase Measurements
09:47Results: Activity of the maltose Transporter Reconstituted into Nanodiscs
11:15Conclusion

Summary

Traduction automatique

Nanoscheiben sind kleine scheibenförmige Partikel, die Membranproteine in einem kleinen Fleckchen Phospholipiddoppelschicht integrieren. Wir stellen eine visuelle Protokoll, das die Schritt-für-Schritt Einarbeitung des MalFGK2 Transporters zu einer Scheibe zeigt.

Tags

Nanodisc Lipid Particles Reconstitution Method ABC Transporter Membrane Proteins Ligand-receptor Interactions Amphipathic Properties Apolipoprotein A1 Hydrophobic Interactions Detergent Removal Protein-to-lipid Ratio

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