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Découvrir interactions des protéines et caractérisation de protéines de fonction utilisant la technologie HaloTag
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Discovering Protein Interactions and Characterizing Protein Function Using HaloTag Technology
DOI:

11:16 min

July 12, 2014

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:23Protein Pulldowns: Preparation of Transiently Transfected Cells
  • 02:50Equilibration of the HaloLink Resin
  • 04:01Binding and Washing of Fusion Complexes
  • 06:21SDS Elution for Denaturing Gels, Western Blots, or Mass Spectrometry
  • 07:07Cellular Imaging of Fluorescently Labeled Fusion Proteins Using a Cytoplasmic and Nuclear Permeable Ligand
  • 08:48Results: Using HaloTag Technology to Determine Protein Interactions and Localization
  • 10:47Conclusion

Summary

Traduction automatique

Technologie HaloTag est une technologie multifonctionnelle qui a remporté un succès important dans l'isolement de petits et de grands complexes de protéines à partir de cellules de mammifères. Ici, nous mettons en évidence les avantages de cette technologie par rapport aux alternatives existantes et de démontrer son utilité pour étudier de nombreux aspects de la fonction des protéines dans les cellules eucaryotes.

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