Journal
/
/
تحديد الشركاء التفاعل البروتين في خلايا الثدييات عن طريق SILAC مناعي الكمي البروتيوميات
Journal JoVE
Biologie
This content is Free Access.
Journal JoVE Biologie
Identification of Protein Interaction Partners in Mammalian Cells Using SILAC-immunoprecipitation Quantitative Proteomics
DOI:

12:53 min

July 06, 2014

,

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:49Harvesting of SILAC-labeled Cell Lysates
  • 03:39Binding Lysate to Anti-GFP Beads
  • 04:45Preparation of Samples for MS Analysis
  • 06:11Data Analysis I: Understanding the Results and Removal of Low-confidence Identifications
  • 07:36Data Analysis II: Selecting High Confidence Interactions for Further Study
  • 08:58Data Analysis III: Merging Replica Datasets
  • 10:59Results: Identification of Translation Initiation Factor – Binding Proteins
  • 12:22Conclusion

Summary

Traduction automatique

تمثل التجارب SILAC مناعي وسيلة قوية لاكتشاف البروتين الرواية: تفاعلات البروتين. من خلال السماح للالكمي النسبي دقيقة من وفرة البروتين في كل من السيطرة واختبار العينات، والتفاعلات الحقيقية يمكن تمييزها بسهولة من الملوثات التجريبية، وانخفاض التفاعلات تقارب الحفاظ من خلال استخدام الظروف العازلة أقل صرامة.

Vidéos Connexes

Read Article