Les injections intraveineuses de souriceaux nouveau-nés

L’objectif global de cette procédure est d’administrer par voie intraveineuse un article de test à une souris nouveau-née. Pour ce faire, il faut d’abord identifier les souris âgées d’un à deux jours à traiter. La deuxième étape consiste à préparer les matériaux d’injection.

Ensuite, l’injection est effectuée. La dernière étape consiste à rendre les souris traitées et réveillées à leur mère. En fin de compte, un test en aval est nécessaire pour déterminer si l’article testé a l’effet souhaité.

En général, les personnes qui ne connaissent pas cette méthode ont le plus de mal à identifier et à cibler la veine appropriée. Pour commencer, rassemblez tout le matériel nécessaire à la procédure d’injection. De plus, préparez un colorant bleu Evans à 1 % dans du PBS et une seringue à insuline avec une aiguille de calibre 30 par animal à injecter.

Ensuite, retirez la digue dans une cage séparée tout en manipulant les chiots. Quand vous êtes prêt. Placez un seul petit directement sur de la glace humide pendant 30 à 60 secondes.

Pour anesthésier. Ne laissez pas l’animal sur la glace trop longtemps en raison du risque de complications liées à l’hypothermie pendant que l’animal est sur la glace. Seringue Lotus avec 30 microlitres de colorant bleu d’Evan.

Lorsque l’animal est complètement anesthésié, ce qui est confirmé par l’absence de mouvement sur la glace tout en respirant, passez-le au microscope pour une injection de la main droite, placez le museau de l’animal au bon endroit. L’index gauche sur le museau et le majeur gauche dorlotés contre l’écouteur de sorte que l’écouteur se trouve entre l’index et le majeur. Examinez juste à l’avant de l’écouteur pour un capillaire superficiel qui se déplace lorsque la peau est manipulée.

Ce capillaire n’est pas la cible. Cependant, l’identification est importante pour l’identification de la veine temporale. Ensuite, localisez une veine sombre et ombragée inférieure au capillaire qui reste fixe quelle que soit la position de la peau.

La veine temporale apparaît ombragée, s’étend du dos au ventral et alimente la veine jugulaire. Entrez dans la veine temporale avec le biseau de l’aiguille vers le haut. S’il est correctement inséré.

Il est possible de voir le biseau de l’aiguille se remplir de sang à travers la peau. Ensuite, appuyez lentement sur le piston et notez le blanchiment de la veine sur le côté du visage. Laissez l’aiguille rester dans la veine pendant 10 à 15 secondes supplémentaires pour éviter le reflux de l’injection.

Après une bonne injection, le chiot devrait devenir bleu. Presque immédiatement. Retirez l’aiguille et appliquez une force douce sur le site d’injection avec un coton-tige jusqu’à ce que le sang coagule.

Laissez le chiot récupérer et se réchauffer. Confirmez que le chiot est conscient, droit et en mouvement. Avant de retourner dans la cage, les chiots peuvent être mis en coupe dans les mains gantées de l’enquêteur pour fournir une chaleur appropriée pour aider à la récupération.

Vous pouvez également placer un coussin chauffant sous la cage de la maison pour faciliter le réchauffement du chiot injecté. Remettez le chiot dans la cage de la maison et couvrez-le de litière. Pour assurer l’acceptation finale par la mère, utilisez une nouvelle seringue et un coton-tige pour chaque petit afin de maintenir la stérilité après l’injection intraveineuse d’un nouveau-né L’expression du transgène A V nine Inod GFP est observée dans tout le cerveau, y compris le striatum antérieur, ainsi que le pont et le cervelet.

L’expression de la GFP est également détectée dans la moelle épinière et est observée dans les motoneurones de la colonne vertébrale et les neurones des ganglions de la racine dorsale. L’immunofluorescence de la GFP est détectable chez la souris adulte, le cœur et le foie après injection intraveineuse néonatale d’une GFP auto-complémentaire A A V neuf. En comparaison, l’expression de la GFP est absente dans le cœur et le foie des souris injectées une fois maîtrisées.

Cette technique devrait prendre de trois à cinq minutes par animal. Après avoir regardé cette vidéo, vous devriez avoir une bonne compréhension de la façon d’effectuer des injections intraveineuses chez des souris nouveau-nées.