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IRE / IRP例：RNA - タンパク質相互作用の研究のための電気泳動移動度シフトアッセイ（EMSA）

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Biologie

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Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA) for the Study of RNA-Protein Interactions: The IRE/IRP Example

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IRE / IRP例：RNA - タンパク質相互作用の研究のための電気泳動移動度シフトアッセイ（EMSA）

DOI:

10.3791/52230-v

•

12:44 min

•

December 03, 2014

•

Carine Fillebeen², Nicole Wilkinson², Kostas Pantopoulos²

¹Lady Davis Institute for Medical Research,Jewish General Hospital, ²Department of Medicine,McGill University

Chapitres

00:05Titre
01:28Preparation of Protein Extracts from Cultured Cells
03:05Preparation of Protein Extracts from Mouse Liver and Spleen
04:56Synthesis of Radiolabeled IRE-containing RNA Probe
05:55Purification of Radiolabeled IRE-containing RNA Probe
07:48Electrophoretic Mobility Shift Assay (EMSA)
10:27Results: The Iron-dependence of IRE/IRP Interactions
12:17Conclusion

Summary

Traduction automatique

ここでは、RNA /タンパク質相互作用を分析するためのプロトコルを提示する。電気泳動移動度シフトアッセイ（EMSA）は、ネイティブゲル電気泳動中のRNA /タンパク質複合体および遊離RNAの差動移動に基づいている。放射性標識RNAプローブを用いて、RNA /タンパク質複合体は、オートラジオグラフィーによって可視化することができる。

Tags

RNA-protein Interactions Iron Regulatory Proteins IRP1 IRP2 Iron Responsive Elements IRE UTRs EMSA Gel Retardation Bandshift Assay RNA-binding Proteins Protein-RNA Complexes Post-transcriptional Regulation

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