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A identificação fiável de Vida neurônios dopaminérgicos em culturas mesencéfalo Usando RNA Sequenciamento e TH-driven-promotor eGFP Expression
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Journal JoVE Neurosciences
Reliable Identification of Living Dopaminergic Neurons in Midbrain Cultures Using RNA Sequencing and TH-promoter-driven eGFP Expression

A identificação fiável de Vida neurônios dopaminérgicos em culturas mesencéfalo Usando RNA Sequenciamento e TH-driven-promotor eGFP Expression

DOI:
10.3791/54981-v

•

10:54 min

•

February 10, 2017

•

, , , , , , ,
1Division of Biology and Biological Engineering,California Institute of Technology (Caltech)

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:59Isolation of Embryonic Midbrain
  • 02:55Dissociation and Plating of Cells
  • 05:34Harvesting Cultured Dopaminergic Neurons for RNA Sequencing
  • 07:04Generation, Purification and Amplification of First-strand cDNA
  • 09:13Results: RNA-seq Detection of Expressed Transcripts in Single Dopaminergic Neurons
  • 09:39Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Na doença de Parkinson (PD), substância negra (SNC) neurónios dopaminérgicos degenerar, conduzindo a disfunção motora. Aqui nós relatamos um protocolo para a cultura de neurônios do mesencéfalo ventral de um ratinho expressando eGFP impulsionado por uma sequência de promotor de tirosina hidroxilase (TH), a colheita neurônios fluorescentes individuais das culturas, e medir o seu transcriptoma usando RNA-seq.

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Keywords: RNA SequencingTyrosine HydroxylaseEGFPDopaminergic NeuronsMidbrain CulturesParkinson’s DiseaseDrug AddictionVentral MesencephalonVentral Tegmental AreaSubstantia NigraDissection

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