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Ein G-Quadruplex-DNA-Affinität Ansatz zur Reinigung von enzymatisch aktiven G4 Resolvase1
Journal JoVE
Biochimie
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Journal JoVE Biochimie
A G-quadruplex DNA-affinity Approach for Purification of Enzymatically Active G4 Resolvase1
DOI:

11:25 min

March 18, 2017

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Chapitres

  • 00:05Titre
  • 00:54Lyse Bacterial Pellets Expressing Human Recombinant G4 Resolvase1 (rG4R1)
  • 03:06Prepare G4-magnetic Beads
  • 04:07Bind Histidine-tagged rG4R1 to Cobalt Beads
  • 05:47Elute rG4R1 from Cobalt Beads
  • 07:07Bind rG4R1 to G4-bound SPB and Elute in an ATP-dependent Manner
  • 08:55Results: Analysis and Quantification of Catalytically Active, Purified rG4R1
  • 10:06Conclusion

Summary

Traduction automatique

G4 Resolvase1 bindet an G-Quadruplex (G4) Strukturen mit dem engsten berichteten Affinität für ein G4-Bindungsprotein und stellt die Mehrheit der G4-DNA Abwickeln Aktivität in HeLa-Zellen. Wir beschreiben ein neuartiges Protokoll, das die Affinität und ATP-abhängige Abwickeln Aktivität von G4-Resolvase1 nutzt gezielt katalytisch aktive rekombinante G4R1 reinigen.

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