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Criação de um denso Transposon inserção biblioteca usando bacteriana conjugação em entérobactérienne cepas tais como Escherichia Coli ou Shigella flexneri
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Journal JoVE Immunologie et infection
Creation of a Dense Transposon Insertion Library Using Bacterial Conjugation in Enterobacterial Strains Such As Escherichia Coli or Shigella flexneri

Criação de um denso Transposon inserção biblioteca usando bacteriana conjugação em entérobactérienne cepas tais como Escherichia Coli ou Shigella flexneri

DOI:
10.3791/56216-v

•

11:36 min

•

September 23, 2017

•

1Institute of Natural and Mathematical Sciences,Massey University

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 00:44Part I: Bacterial Conjugation
  • 05:38Part II: Overview of Method
  • 08:52Part IV: Pooling Library
  • 10:25Part V: Results
  • 10:53Part VI: Conclusions

Summary

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Apresentado aqui é um método simples para criar uma biblioteca de inserção alta densidade transposon em Escherichia coli ou Shigella flexneri usando conjugação bacteriana. Este protocolo permite a criação de uma coleção de centenas de milhares de mutantes exclusivos nas bactérias através da inserção de genômica aleatória de um transposon.

Tags

Transposon Insertion LibraryBacterial ConjugationEscherichia ColiShigella FlexneriTn10 TransposonDonor StrainRecipient StrainNitrocellulose FilterLB Agar PlateCell PelletResuspensionAseptic Technique

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