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Creación de un denso Transposon inserción biblioteca usando Conjugación bacteriana en cepas enterobacterianas tales como Escherichia Coli o Shigella flexneri
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Creation of a Dense Transposon Insertion Library Using Bacterial Conjugation in Enterobacterial Strains Such As Escherichia Coli or Shigella flexneri
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Creación de un denso Transposon inserción biblioteca usando Conjugación bacteriana en cepas enterobacterianas tales como Escherichia Coli o Shigella flexneri

DOI:
10.3791/56216-v

•

11:36 min

•

September 23, 2017

•

1Institute of Natural and Mathematical Sciences,Massey University

Chapitres

  • 00:00Titre
  • 00:44Part I: Bacterial Conjugation
  • 05:38Part II: Overview of Method
  • 08:52Part IV: Pooling Library
  • 10:25Part V: Results
  • 10:53Part VI: Conclusions

Summary

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Presentado aquí es un método simple para crear una biblioteca de inserción del transposón alta densidad en Escherichia coli o Shigella flexneri mediante Conjugación bacteriana. Este protocolo permite la creación de una colección de cientos de miles de mutantes únicos en bacterias por la inserción genómica al azar de un transposón.

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Transposon Insertion LibraryBacterial ConjugationEscherichia ColiShigella FlexneriTn10 TransposonDonor StrainRecipient StrainNitrocellulose FilterLB Agar PlateCell PelletResuspensionAseptic Technique

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