Journal
/
Génétique
/
Disrupção do Gene altamente eficiente de células progenitoras hematopoiéticas murino e humano por CRISPR/Cas9
Journal JoVE
Génétique
This content is Free Access.
Journal JoVE Génétique
Highly Efficient Gene Disruption of Murine and Human Hematopoietic Progenitor Cells by CRISPR/Cas9

Disrupção do Gene altamente eficiente de células progenitoras hematopoiéticas murino e humano por CRISPR/Cas9

DOI:
10.3791/57278-v

•

08:27 min

•

April 10, 2018

•

, , , ,
1Stem Cells & Regenerative Medicine Center,Baylor College of Medicine, 2Center for Cell and Gene Therapy,Baylor College of Medicine, 3Centro di Ricerca Emato-Oncologica (CREO),University of Perugia, 4Department of Molecular & Human Genetics,Baylor College of Medicine, 5Texas Children’s Hospital & Houston Methodist Hospital

Chapitres

  • 00:05Titre
  • 01:05sgRNA Fwd Primer Design, DNA Template Synthesis, and ln Vitro Transcription of sgRNA
  • 03:38Cas9-sgRNA Complexing and Electroporation
  • 05:45Results: Use of Cas9-sgRNA Electroporation Protocol to Study Efficient Knockout of Target Gene
  • 07:48Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Um protocolo para rápido CRISPR/Cas9-mediada disrupção do gene no mouse e células hematopoiéticas primárias humanas é descrito neste artigo. Ribonucleoproteínas Cas9-sgRNA são introduzidas através de eletroporação com sgRNAs gerados através da transcrição em vitro e Cas9 comercial. Alta eficiência de edição é obtida com tempo limitado e custo financeiro.

Tags

Keywords: CRISPR/Cas9Gene DisruptionHematopoietic Progenitor CellsRibonucleoproteinSingle-guide RNAPCRT7 RNA PolymeraseGene KnockoutPrimary CellsHigh EfficiencyFast TurnaroundCost-effectiveNormal And Malignant HematopoiesisPrimary T-cellsHematopoietic Cell LinesPrimary Leukemia Samples

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/57278?article_type=v

Mapeamento QTL e edição CRISPR / Cas9 para identificar um gene de resistência a medicamentos em<em> Toxoplasma gondii</em
check_url/fr/57278?article_type=v

Geração independente dependente da seleção e de genes independentes de CRISPR / Cas9 em células de mamíferos
check_url/fr/57278?article_type=v

Uma metodologia padrão para examinar a mutagenicidade no local como uma função de ponto de mutação reparação catalisada por CRISPR/Cas9 e SsODN em células humanas
check_url/fr/57278?article_type=v

Microinjeção de proteína CRISPR/Cas9 em bagre do canal, Ictalurus punctatus, embriões para Gene Editing
check_url/fr/57278?article_type=v

Um protocolo para a produção de Lentivirus vetores Integrase deficiente CRISPR/Cas9-mediada Gene nocaute em dividir células
check_url/fr/57278?article_type=v

Produção eficiente e identificação de CRISPR/Cas9 gerado pelo Gene nocautes no sistema modelo Danio rerio
check_url/fr/57278?article_type=v

CRISPR/Cas9 Gene edição para fazer condicional mutantes de humano parasita da malária por p. falciparum
check_url/fr/57278?article_type=v

Proteína endógena de marcação em humanos induzida por células-tronco pluripotentes usando CRISPR/Cas9
check_url/fr/57278?article_type=v

Preparação e modificação genética de primatas não humanos tronco hematopoiéticas e células progenitoras
check_url/fr/57278?article_type=v

CRISPR/Cas9 Ribonucleoproteína-mediada por Gene preciso de edição por tubo Electroporation

Read Article