Journal
/
/
-Voor-stapmodus zuivering van macromoleculaire complexen met behulp van RNA gekoppeld aan biotine en een foto-cleavable Linker
Journal JoVE
Biochimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biochimie
Single-step Purification of Macromolecular Complexes Using RNA Attached to Biotin and a Photo-cleavable Linker
DOI:

08:12 min

January 03, 2019

, ,

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:51Substrate Preparation
  • 01:28Complex Assembly
  • 02:14Immobilization of the RNA/protein Complexes on Streptavidin Beads
  • 04:00UV-Elution
  • 05:08Sample Analysis by Silver Staining Followed by Mass Spectrometry
  • 05:59Results: Analysis of UV-eluted Complexes
  • 07:36Conclusion

Summary

Traduction automatique

RNA/eiwitcomplexen gezuiverd met behulp van botin-streptavidine strategie worden geëlueerd oplossing onder denatureren voorwaarden in een vorm die ongeschikt zijn voor verdere zuivering en de functionaalanalyse. Hier beschrijven we een wijziging van deze strategie dat gebruik maakt van een foto-cleavable linker in RNA en een zachte UV-elutie stap, inheemse en volledig functionele RNA/eiwitcomplexen oplevert.

Vidéos Connexes

Read Article