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Cell Fractionation of U937 Cells in the Absence of High-speed Centrifugation

Fracionamento celular de células U937, na ausência de centrifugação de alta velocidade

DOI:
10.3791/59022-v

•

06:53 min

•

January 18, 2019

•

, , , , ,
1Department of Basic and Clinical Sciences,Albany College of Pharmacy and Health Sciences

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:35PBS Wash
  • 01:01Cytosolic Protein Isolation
  • 02:21Cell Homogenization
  • 03:32Differential Centrifugation
  • 04:58Results: Undifferentiated U937 Cells Successfully Fractionated
  • 06:15Conclusion

Summary

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Aqui, apresentamos um protocolo para isolar a membrana plasmática, citoplasma e mitocôndrias de células U937 sem o uso de centrifugação de alta velocidade. Esta técnica pode ser usada para purificar as fracções subcelulares para posterior exame de localização de proteínas através de immunoblotting.

Tags

Cell FractionationU937 CellsHigh-speed CentrifugationProtocolSubcellular FractionsCytoplasmMitochondriaPlasma MembraneHypotonic BuffersDigitoninMechanical LysisDifferential CentrifugationProtein LocalizationInexpensiveStraightforward

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