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Synthese und Biokonjugaten der Thiol-reaktive Reagenzien für die Erstellung der Website selektiv geändert Immunokonjugate
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Journal JoVE Chimie
Synthesis and Bioconjugation of Thiol-Reactive Reagents for the Creation of Site-Selectively Modified Immunoconjugates
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Synthese und Biokonjugaten der Thiol-reaktive Reagenzien für die Erstellung der Website selektiv geändert Immunokonjugate

DOI:
10.3791/59063-v

•

08:47 min

•

March 06, 2019

•

, , ,
1Department of Chemistry,Hunter College of the City University of New York, 2Ph.D. Program in Chemistry,Graduate Center of the City University of New York, 3Department of Radiology,Memorial Sloan Kettering Cancer Center, 4Department of Radiology,Weill Cornell Medical College

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:28Synthesis of 4-[5-(methylthio)-1,3,4-oxadiazol-2-yl]-aniline (1)
  • 01:15Synthesis of Tert-butyl[18-({4-[5-(methylthio)-1,3,4-oxadiazol-2-yl]phenyl}amino)-15,18-dioxo-4,7,10-trioxa-14-azaoctadecyl] Carbamate (2)
  • 03:00Synthesis of Tert-butyl[18-({4-[5-(methylsulfonyl)-1,3,4-oxadiazol-2-yl]phenyl}amino)-15,18-dioxo-4,7,10-trioxa-14-azaoctadecyl] Carbamate (3)
  • 03:55Synthesis of N1-(3-{2-[2-(3-aminopropoxy)ethoxy]-ethoxy}propyl)-N4-{4-[5-(methylsulfonyl)-1,3,4-oxadiazol-2-yl] phenyl}Succinamide (PODS)
  • 04:47Synthesis of PODS-DOTA and Bioconjugation of PODS-DOTA to Trastuzumab
  • 06:05Results: Synthesis of PODS and PODS-DOTA and Conjugation to Trastuzumab
  • 08:01Conclusion

Summary

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In diesem Protokoll wird die Synthese von Hülsen, ein Phenyoxadiazolyl Methyl Sulfon-basierte Reagenz für die Website-selektive Befestigung der Ladungen an die Thiole von Biomolekülen, insbesondere Antikörper beschrieben. Darüber hinaus beschreiben wir die Synthese und Charakterisierung von eine Hülsen tragenden bifunktionelle Chelator und die Konjugation zu einem Modell-Antikörper.

Tags

Thiol-reactive ReagentsSite-specific BioconjugationImmunoconjugatesPODSMaleimide-thiol-based BioconjugationAminophenyl Oxadiazole ThiolDiisopropylethylamineIodomethaneBoc-protected Carboxylic AcidDichloromethaneEDCIAnilineHydrochloric AcidSodium CarbonateMagnesium SulfateEthyl AcetateCyclohexaneCarbamateM-chloroperbenzoic Acid

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