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Genome Editing in Mammalian Cell Lines using CRISPR-Cas

Edição do genoma em linhas de células de mamíferos usando CRISPR-Cas

DOI:
10.3791/59086-v

•

07:56 min

•

April 11, 2019

•

, , ,
1Genome Institute of Singapore,Agency for Science Technology and Research, 2School of Chemical and Biomedical Engineering,Nanyang Technological University

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 00:18Cell Passaging
  • 01:08Cell Transfection
  • 01:47Transfected Cell Fluorescence Activated Cell Sorting (FACS)
  • 02:32Individual Clone Expansion and Editing Efficiency Evaluation
  • 06:09Results: Representative Gene Editing Efficiency Analyses
  • 07:24Conclusion

Summary

Traduction automatique

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CRISPR-Cas é uma tecnologia poderosa para projetar os genomas complexos de plantas e animais. Aqui, detalhamos um protocolo eficiente editar o genoma humano usando diferentes endonucleases de Cas. Destacamos importantes considerações e parâmetros de projeto para otimizar a eficiência de edição.

Tags

Keywords: CRISPR-Cas9Genome EditingMammalian Cell LinesKnock-outKnock-inCell PassagingTrypsin-EDTATransfectionFACSFluorescent MarkerCell Culture MediumGenomic DNA Extraction

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