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Procesamiento de imagen protocolo para el análisis de la difusión y del tamaño del clúster de receptores de membrana por microscopía de fluorescencia
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Journal JoVE Immunologie et infection
Image Processing Protocol for the Analysis of the Diffusion and Cluster Size of Membrane Receptors by Fluorescence Microscopy
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Procesamiento de imagen protocolo para el análisis de la difusión y del tamaño del clúster de receptores de membrana por microscopía de fluorescencia

DOI:
10.3791/59314-v

•

12:15 min

•

April 09, 2019

•

, , , , , ,
1Department of Macromolecular Structures, Centro Nacional de Biotecnología,Campus Univ. Autónoma de Madrid, 2Campus Urb. Montepríncipe s/n,Univ. San Pablo CEU, 3Department of Immunology and Oncology, Centro Nacional de Biotecnología,Campus Univ. Autónoma de Madrid, 4Department of Cell Signaling,Centro Andaluz de Biología Molecular y Medicina Regenerativa (CSIC), 5Meyer Cancer Center, 6Department of Anatomy and Cell Biology,McGill Univ.

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:37Preparation of Biological Samples and Image Acquisition
  • 02:57Selection of Images and Creation of Masks
  • 05:45Tracking Particles
  • 08:09Calculation of the Diffusion Coefficients and Classification of Trajectories
  • 09:10Calculation of Cluster Size
  • 09:50Results: Analysis of Dynamic Fluorescence Particle Characteristics
  • 11:24Conclusion

Summary

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Aquí, presentamos un protocolo para la sola partícula seguimiento análisis de imagen que permite la evaluación cuantitativa de los coeficientes de difusión, tipos de movimiento y racimo de tamaños de partículas solo detectados por microscopía de fluorescencia.

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Keywords: Image ProcessingSingle-molecule TrackingLateral DiffusionSpot SizeMembrane ReceptorsFluorescence MicroscopyTIRF MicroscopyJurkat CellsChemokine ReceptorCXCL12

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