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Confección de ensayos de citotoxicidad in vivo para estudiar inmunodominancia en respuestas de células T CD8+ específicas de tumores
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Journal JoVE Immunologie et infection
Tailoring In Vivo Cytotoxicity Assays to Study Immunodominance in Tumor-specific CD8+ T Cell Responses
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Confección de ensayos de citotoxicidad in vivo para estudiar inmunodominancia en respuestas de células T CD8+ específicas de tumores

DOI:
10.3791/59531-v

•

10:13 min

•

May 06, 2019

•

, ,
1Department of Microbiology and Immunology,Western University, 2Department of Medicine, Division of Clinical Immunology and Allergy,Western University, 3Department of Surgery, Division of General Surgery,Western University, 4Lawson Health Research Institute

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:14T Antigen (Ag)-Expressing Tumor Cell Inoculation
  • 02:29Target Splenocyte Preparation
  • 04:10Target Splenocyte Coating with Irrelevant and Cognate Peptides and Carboxyfluorescein Succinimidyl Ester (CFSE) Labeling
  • 05:44CFSE-Labeling Evaluation
  • 06:50CFSE-Labelled Target Cell Injection into Nave and T-Ag-Primed Recipients
  • 07:31Data Acquisition
  • 08:21Results: Representative Analyses of CD8+ T Cell-Mediated Cytotoxicity
  • 09:36Conclusion

Summary

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Describimos aquí un ensayo de matanza in vivo basado en citometría de flujo que permite el examen de inmunodominancia en las respuestas de linfocitos T citotóxicos (CTL) a un antígeno tumoral modelo. Proporcionamos ejemplos de cómo este ensayo elegante se puede emplear para estudios mecaniísticos y para pruebas de eficacia de fármacos.

Tags

In Vivo Cytotoxicity AssayTumor-specific CD8+ T Cell ResponsesImmunodominanceTumor AntigensCytotoxic T Cell ResponsesNK CellsInnate-like T LymphocytesAdherent Tumor Cell LineTarget Splenocyte PreparationC57BL/6 Mice

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