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Método avançado da imunoprecipitação da reticulação (eCLIP) para a identificação eficiente do RNA proteína-ligado no testis do rato
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Journal JoVE Biologie
Enhanced Crosslinking Immunoprecipitation (eCLIP) Method for Efficient Identification of Protein-bound RNA in Mouse Testis

Método avançado da imunoprecipitação da reticulação (eCLIP) para a identificação eficiente do RNA proteína-ligado no testis do rato

DOI:
10.3791/59681-v

•

10:31 min

•

May 10, 2019

•

, , , , , , , ,
1State Key Laboratory of Reproductive Medicine,Nanjing Medical University

Chapitres

  • 00:04Titre
  • 01:14Tissue Harvesting and UV Crosslinking
  • 02:37Beads Preparation
  • 03:20Tissue Lysis and Partial RNA Digestion
  • 04:30Immunoprecipitation
  • 05:09RNA Adapter Ligation to RNA 3’ Ends
  • 06:48SDS-PAGE and Membrane Transfer
  • 08:24Results: Analysis of the eCLIP Method
  • 10:08Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Aqui, nós apresentamos um protocolo de eCLIP para determinar alvos principais do RNA de candidatos do RBP no testis.

Tags

Keywords: ECLIPProtein-bound RNAMouse TestisRNA-binding ProteinsSpermatogenesisNon-radioactiveSize-matched InputSmall-scale SequencingCrosslinkingImmunoprecipitationMagnetic Beads

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