Journal
/
Biochimie
/
Interrogatorio paralelo del reclutamiento de la serie 2 para la detección de ligandos a escala de GPCR a escala mediante el ensayo PRESTO-Tango
Journal JoVE
Biochimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biochimie
Parallel Interrogation of β-Arrestin2 Recruitment for Ligand Screening on a GPCR-Wide Scale using PRESTO-Tango Assay
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Interrogatorio paralelo del reclutamiento de la serie 2 para la detección de ligandos a escala de GPCR a escala mediante el ensayo PRESTO-Tango

DOI:
10.3791/60823-v

•

09:03 min

•

March 10, 2020

•

, ,
1Department of Biochemistry, Microbiology and Immunology,University of Ottawa, 2Brain and Mind Research Institute,University of Ottawa

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:43Primary Screening: Poly-L-Lysine Plate Preparation
  • 01:25Primary Screening: Cell Culture and Plate Seeding
  • 02:22Primary Screening: DNA Plate Preparation and Transfections
  • 03:35Primary Screening: Cell Stimulation and Luminescence Reading
  • 04:26Secondary Screening: Cell Seeding and Transfections
  • 05:59Secondary Screening: Half Log Dose-Curve Drug Plate Preparation and Luminescence Reading
  • 07:16Results: Representative Primary Screening Hit Identification and Secondary Screening Dose-Curve Responses
  • 08:23Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Dado que los GPCR son objetivos atractivos para drogarse, el cribado de ligando GPCR es por lo tanto indispensable para la identificación de compuestos de plomo y para estudios de desorfanización. Hacia estos esfuerzos, describimos PRESTO-Tango, una plataforma de recursos de código abierto utilizada para la elaboración simultánea de perfiles de reclutamiento transitorio de é-arrestin2 en aproximadamente 300 GPCRs utilizando un ensayo de reportero basado en TEV.

Tags

GPCRBeta-arrestin 2Presto-Tango AssayParallel InterrogationLigand ScreeningOrphan TargetsG Protein-independentCell SeedingDNA Transfection384-well PlateHTLA Cells

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

La selección de alto rendimiento de los hidratos de carbono-El uso de enzimas que degradan la novela insoluble cromogénico sustrato de ensayo Kits

Visualización interior de la membrana bacteriana para la selección de una biblioteca de fragmentos de anticuerpos

Un método Simple para la detección química de alto rendimiento en Caenorhabditis Elegans

Método para Refolding eficiente y la purificación del quimioreceptor ligando vinculante dominio

Producción a gran escala de ARN recombinante en un andamio Circular utilizando un sistema derivado de Viroide en Escherichia coli

Uso en transferencia de energía de resonancia de la fluorescencia de Vitro para el estudio de la dinámica de los complejos de la proteína en una escala de tiempo de milisegundos

Examen cinético de la actividad de nucleasa utilizando sondas de ácido nucleico

Una adaptación de semi-alto rendimiento del ensayo ATPase acoplado a NADH para la detección de inhibidores de moléculas pequeñas

Detección de fitoestrógenos usando un ensayo de receptores de estrógeno a base de células β Reporter

Cribado de fragmentos basado en RMN en una muestra mínima pero en modo de automatización máxima

Read Article