/

/

라이브 셀의 형성 FRET 바이오 센서를 사용하여 오로라 키나아제 활성화의 실시간 모니터링

Journal JoVE
Biologie

This content is Free Access.

Journal JoVE Biologie

Real-Time Monitoring of Aurora kinase A Activation using Conformational FRET Biosensors in Live Cells

Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

라이브 셀의 형성 FRET 바이오 센서를 사용하여 오로라 키나아제 활성화의 실시간 모니터링

DOI:

10.3791/61611-v

•

06:29 min

•

July 30, 2020

•

Giulia Bertolin, Gilles Le Marchand, Marc Tramier

¹Univ Rennes, CNRS, IGDR (Genetics and Development Institute of Rennes), UMR 6290, F-35000 Rennes, France

Chapitres

00:04Introduction
00:36Donor/Acceptor Förster Resonance Energy Transfer (FRET) Pair Selection
01:13Cell Synchronization
01:42FRET/Fluorescence Lifetime Imaging Microscopy (FLIM) Acquisitions
02:50Donor/Acceptor Pair Delta Lifetime Calculation and FLIM Value Comparison
03:53Results: Representative Aurora Kinase A (AURKA) FRET Biosensor and Negative Control Images
05:52Conclusion

Summary

Traduction automatique

다기능 Ser/Th 키나아제 AURKA의 활성화는 Thr288에 대한 자가포스포틸화로 특징지입니다. 여기에서는 프로브 엔지니어링을 위한 몇 가지 전략과 미토시스 전반에 걸쳐 키나아제 활성화를 따르는 빠른 FRET 프로토콜을 설명합니다.

Tags

Real-time Monitoring Aurora Kinase A Conformational FRET Biosensors Live Cells FRET-FLIM Fluorescent Protein Donor-acceptor Pair Cell Synchronization Microscopy Lifetime Mapping Mitotic Spindle

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

결합 QD - 걱정과 Microfluidics 실시간으로 DNA의 Nanocomplex 자체 어셈블리를 모니터하기 위해

안달 Ratiometric하여 세포주기를 통해 키나제와 인산 가수 분해 효소 활동을 모니터링

형광 공명 에너지 전송과 리간드 - 수용체 상호 작용의 실시간 모니터링

Unimolecular 바이오 센서를 사용하여 라이브 세포에서 이벤트를 신호의 실시간 모니터링을위한 현미경을 안달

세포 독성의 지속적인 실시간 모니터링을위한 자율적으로 바이오 루미 네 센트 포유 동물 세포

비례 생체 분자 비콘을 사용하여 살아있는 세포의 단일 엔지니어링 RNA 성적 증명서의 실시간 영상

높은 처리량 검열을 사용 키나제 기판 쌍의 식별

형광 표지 된 나노 입자를 사용하여 쥐, 인간과 돼지 유래의 살아있는 세포에서 세포 내 유전자 발현의 검출

G 단백질 선택적 GPCR의 입체는 라이브 셀 서스펜션 형광 분석에서 FRET 센서를 사용하여 측정

동적 세포 돌출부에서 소프트웨어를 이용한 단백질 농도 추적을위한 그래픽 사용자 인터페이스

Read Article