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Entfernung und Ersatz endogener Liganden aus lipidgebundenen Proteinen und Allergenen
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Removal and Replacement of Endogenous Ligands from Lipid-Bound Proteins and Allergens
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Entfernung und Ersatz endogener Liganden aus lipidgebundenen Proteinen und Allergenen

DOI:
10.3791/61780-v

•

09:09 min

•

February 24, 2021

•

, ,
1Nuclear Magnetic Resonance Group,National Institute of Environmental Health Sciences

Chapitres

  • 00:04Introduciton
  • 01:13Endogenous Lipid Removal
  • 02:42Reconstitution of Apo- and Cargo-loaded Bla g 1
  • 05:07Phospholipid Cargo Removal/Loading Confirmation
  • 06:22Results: Representative Bla g 1 Purification, Lipid Removal Verification, and Recovery
  • 08:18Conclusion

Summary

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Dieses Protokoll beschreibt die Entfernung endogener Lipide aus Allergenen und deren Ersatz durch benutzerdefinierte Liganden durch Umkehrphasen-HPLC in Verbindung mit thermischem Glühen. 31 P-NMR und zirkulärer Dichroismus ermöglichen die schnelle Bestätigung der Ligandenentfernung/-belastung und die Wiederherstellung der nativen Allergenstruktur.

Tags

Endogenous LigandsLipid-bound ProteinsAllergensReverse-phase HPLCThermal AnnealingSolubilizationBla G 1De-lipidationLyophilizationProtein Yield

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