Journal
/
Biochimie
/
PCR Mutagenese, Klonen, Expressie, Snelle Eiwitzuiveringsprotocollen en Kristallisatie van het Wilde Type en Mutante Vormen van Tryptofaan Synthase
Journal JoVE
Biochimie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biochimie
PCR Mutagenesis, Cloning, Expression, Fast Protein Purification Protocols and Crystallization of the Wild Type and Mutant Forms of Tryptophan Synthase
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

PCR Mutagenese, Klonen, Expressie, Snelle Eiwitzuiveringsprotocollen en Kristallisatie van het Wilde Type en Mutante Vormen van Tryptofaan Synthase

DOI:
10.3791/61839-v

•

09:31 min

•

September 26, 2020

•

, , ,
1Department of Chemistry,University of California-Riverside, 2Department of Biochemistry,University of California-Riverside

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:44Purification of Wild Type or Mutant Form of α2β2 StTS Complex
  • 03:53Optimized Crystallization for Wild Type and Mutant Form of the α2β2 StTS Comple
  • 06:49Results: Purification of the α- and β -Subunits of the Tryptophan Synthase and the Wild Type and Mutant α2β2 StTS Complexes
  • 08:50Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Dit artikel presenteert een reeks opeenvolgende methoden voor de expressie en zuivering van Salmonella typhimurium tryptofaan synthase comp dit protocol een snel systeem om het eiwitcomplex in een dag te zuiveren. Behandelde methoden zijn site-gerichte mutagenese, eiwitexpressie in Escherichia coli,affiniteitschromatografie, gelfiltratiechromatografie en kristallisatie.

Tags

PCR MutagenesisCloningExpressionProtein PurificationTryptophan SynthaseSalmonella TyphimuriumAmmonium Sulfate FractionationSize Exclusion ChromatographySDS-PAGEProtein ConcentrationCrystallization

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

Thermostabilization, expressie, zuivering en kristallisatie van het Human serotonine transporter Gebonden aan<em> S</em> citalopram

Expressie, zuivering en antimicrobiële activiteit van S100A12

Recombinant Proteïne Expressie, Kristallisatie en Biofysische Studies van a<em> Bacillus</em> -conserveerd nucleotide pyrophosphorylase, BcMazG

Geautomatiseerd protocollen voor macromoleculaire kristallisatie bij het MRC Laboratory of Molecular Biology

Meningsuiting en zuivering van zoogdier Bestrophin ionenkanalen

Cafeïne-extractie, enzymatische activiteit en genexpressie van cafeïne Synthase uit plantaardige cel schorsingen

Meningsuiting, solubilisatie en zuivering van eukaryotische boraat Transporters

Expressie en zuivering van Nuclease-vrije zuurstof Scavenger Protocatechuate 3, 4-dioxygenase

Expressie, zuivering, kristallisatie, en enzym assays van Fumarylacetoacetate hydrolase domein-bevattende eiwitten

High-throughput screening om kristalhits te verkrijgen voor eiwitkristallografie

Read Article