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Journal JoVE Immunologie et infection
Double Labeling Immunofluorescence using Antibodies from the Same Species to Study Host-Pathogen Interactions

Imunofluorescência de rotulagem dupla usando anticorpos da mesma espécie para estudar interações hospedeiro-patógeno

DOI:
10.3791/62219-v

•

07:35 min

•

July 10, 2021

•

, ,
1Laboratory of Cell and Molecular Biology of Trypanosomatids, Department of Cellular and Molecular Biology and Pathogenic Bioagents, Ribeirao Preto Medical School,University of Sao Paulo, Ribeirao Preto, SP, Brazil

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 01:21Parasite Cultures
  • 02:00Control Immunofluorescence Protocol
  • 03:23Double Labeling Immunofluorescence ProtocolUsing Monoclonal and Polyclonal Antibodies Raised in the Same Host
  • 04:18Triple Labeling Immunofluorescence Protocol with the Addition of the Third Polyclonal Antibody from Different Host Species
  • 05:16Confocal Imaging Acquisition
  • 05:39Results: Host-pathogen Interactions Studies Using Double Labeling Immunofluorescence
  • 06:51Conclusion

Summary

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Aqui, o protocolo descreve como realizar a dupla rotulagem de imunofluorescência usando anticorpos primários criados na mesma espécie para estudar interações hospedeiro-patógeno. Além disso, ele pode incluir o terceiro anticorpo de um host diferente neste protocolo. Esta abordagem pode ser feita em qualquer tipo de célula e patógenos.

Tags

Double LabelingImmunofluorescenceAntibodiesSame SpeciesHost-pathogen InteractionsTrypanosoma CruziLLC-MK2 CellsPolyclonal AntibodyMonoclonal AntibodyPhalloidinActin Filaments

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