Journal
/
Biologie
/
Valutazione delle interazioni proteiche nelle cellule vive con emissione sensibilizzata alla FRET
Journal JoVE
Biologie
Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu.  Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Journal JoVE Biologie
Assessing Protein Interactions in Live-Cells with FRET-Sensitized Emission
Please note that all translations are automatically generated. Click here for the English version.

Valutazione delle interazioni proteiche nelle cellule vive con emissione sensibilizzata alla FRET

DOI:
10.3791/62241-v

•

09:15 min

•

April 22, 2021

•

, , , , ,
1Department of Biophysics and Cell Biology, Faculty of Medicine,University of Debrecen, 2Gynecologic Oncology Division,Stanford University School of Medicine

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 01:12Plasmid Construction
  • 01:52Cell Culture and Transfection
  • 02:41FRET Imaging
  • 05:42Image Analysis for Detecting Absolute FRET Efficiencies Using Donor Quenching and Sensitized Emission
  • 07:01Results: Quantification of FRET Images
  • 08:28Conclusion

Summary

Traduction automatique

Traduction automatique

Il trasferimento di energia di risonanza di Förster (FRET) tra due molecole di fluorofori può essere utilizzato per studiare le interazioni proteiche nella cellula vivente. Qui, viene fornito un protocollo su come misurare la FRET nelle cellule vive rilevando l'emissione sensibilizzata dell'accettore e la tempra della molecola donatrice utilizzando la microscopia a scansione laser confocale.

Tags

Keywords: FRETFRET-sensitized EmissionProtein InteractionsLive-cell ImagingDonor QuenchingAcceptor Sensitized EmissionCrosstalkFluorescent ProteinsDetection EfficiencyDonor-acceptor Fusion ProteinEGFP-mCherryCell TransfectionConfocal MicroscopyEnvironmental Chamber

Article

Embed

AJOUTER À LA PLAYLIST

Usage Statistics

Vidéos Connexes

check_url/fr/62241?article_type=v

La colorazione delle proteine ​​in gel con Coomassie G-250, senza solventi organici acido acetico e
check_url/fr/62241?article_type=v

Utilizzando il sistema GELFREE 8100 Frazionamento per peso molecolare basata su Frazionamento con recupero della fase liquida
check_url/fr/62241?article_type=v

In vivo di rilevamento di interazioni proteina-proteina su disegno micro, Superfici
check_url/fr/62241?article_type=v

Imaging interazioni proteina-proteina In vivo</em
check_url/fr/62241?article_type=v

iClip - trascrittoma livello Mappatura delle interazioni proteina-RNA con risoluzione individuale Nucleotide
check_url/fr/62241?article_type=v

4D Imaging di aggregazione proteica in cellule vive
check_url/fr/62241?article_type=v

Il MultiBac Protein Complex Piattaforma di produzione al EMBL
check_url/fr/62241?article_type=v

Interazioni proteina-proteina visualizzati tramite bimolecular complementazione fluorescenza in protoplasti di tabacco e foglie
check_url/fr/62241?article_type=v

Indagare interazioni proteina-proteina in cellule vive utilizzando il trasferimento bioluminescenza Resonance Energy
check_url/fr/62241?article_type=v

Probing ad alta densità di microarrays della proteina funzionali per rilevare le interazioni proteina-proteina

Read Article