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Evaluación de las interacciones de proteínas en células vivas con emisión sensibilizada por FRET
Journal JoVE
Biologie
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Journal JoVE Biologie
Assessing Protein Interactions in Live-Cells with FRET-Sensitized Emission
DOI:

09:15 min

April 22, 2021

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Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 01:12Plasmid Construction
  • 01:52Cell Culture and Transfection
  • 02:41FRET Imaging
  • 05:42Image Analysis for Detecting Absolute FRET Efficiencies Using Donor Quenching and Sensitized Emission
  • 07:01Results: Quantification of FRET Images
  • 08:28Conclusion

Summary

Traduction automatique

La transferencia de energía de resonancia de Förster (FRET) entre dos moléculas fluoróforas se puede utilizar para estudiar las interacciones de proteínas en la célula viva. Aquí, se proporciona un protocolo sobre cómo medir FRET en células vivas mediante la detección de la emisión sensibilizada del aceptor y el enfriamiento de la molécula donante utilizando microscopía de barrido láser confocal.

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