Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:04Introduction
- 00:47Optical Setup
- 01:22Silica Beads Preparation
- 03:24Trap Position, Power, and Stiffness Calibration
- 04:53Sample Assembly
- 05:54Sample Measurement and Actin‐Myosin Contact Establishment
- 07:37Results: Position Recording and Force Inversion
- 08:53Conclusion
Hier wordt een uitgebreid protocol gepresenteerd om ultrasnelle krachtklemexperimenten uit te voeren op processieve myosine-5-motoren, die gemakkelijk kunnen worden uitgebreid naar de studie van andere klassen processieve motoren. Het protocol beschrijft alle noodzakelijke stappen, van de opstelling van het experimentele apparaat tot monstervoorbereiding, gegevensverzameling en analyse.
Tags
Mechanoenzymatic PropertiesProcessive MyosinsUltrafast Force-clamp SpectroscopyLaser TweezersChemomechanicsMyosin MotorsForce ProductionForce DirectionalityProcessive MotorsKinesinsDyneinsForce RegulationAcousto-optic DeflectorsIrisObjectiveLaser BeamSilica BeadsPentyl AcetateAcetoneNitrocelluloseEthanolGlass CoverslipNitrogen FlowDouble-sided Tape
