Un abonnement à JoVE est nécessaire pour voir ce contenu. Connectez-vous ou commencez votre essai gratuit.
Chapitres
- 00:04Introduction
- 00:47Optical Setup
- 01:22Silica Beads Preparation
- 03:24Trap Position, Power, and Stiffness Calibration
- 04:53Sample Assembly
- 05:54Sample Measurement and Actin‐Myosin Contact Establishment
- 07:37Results: Position Recording and Force Inversion
- 08:53Conclusion
Presentato qui è un protocollo completo per eseguire esperimenti di force-clamp ultraveloci su motori processivi miosina-5, che potrebbe essere facilmente esteso allo studio di altre classi di motori processivi. Il protocollo descrive in dettaglio tutte le fasi necessarie, dalla messa a punto dell'apparato sperimentale alla preparazione del campione, all'acquisizione dei dati e all'analisi.
Tags
Mechanoenzymatic PropertiesProcessive MyosinsUltrafast Force-clamp SpectroscopyLaser TweezersChemomechanicsMyosin MotorsForce ProductionForce DirectionalityProcessive MotorsKinesinsDyneinsForce RegulationAcousto-optic DeflectorsIrisObjectiveLaser BeamSilica BeadsPentyl AcetateAcetoneNitrocelluloseEthanolGlass CoverslipNitrogen FlowDouble-sided Tape
