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近接ライゲーションアッセイを用いた異流体せん断応力条件下でのTGFβ/BMP/SMADシグナル伝達の可視化と定量化

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Biochimie

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Visualization and Quantification of TGFβ/BMP/SMAD Signaling under Different Fluid Shear Stress Conditions using Proximity-Ligation-Assay

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近接ライゲーションアッセイを用いた異流体せん断応力条件下でのTGFβ/BMP/SMADシグナル伝達の可視化と定量化

DOI:

10.3791/62608-v

•

11:38 min

•

September 14, 2021

•

Paul-Lennard Mendez², Leon Obendorf, Petra Knaus

¹Institute for Chemistry and Biochemistry,Freie Universität Berlin, ²International Max-Planck Research School for Biology and Computation

Chapitres

00:05Introduction
00:40Cell Culture and Fluid Shear Stress Exposure
02:55Fixation
04:58Blocking and Incubation with Primary Antibody
06:28Incubation with PLA Probe and Ligation
07:34Amplification and Mounting
09:14Results: Effect of Shear Stress on the SMAD Protein Interactions
11:02Conclusion

Summary

Traduction automatique

ここでは、病理的および生理的な流体せん断ストレス条件に曝露した内皮細胞における近接ライゲーションアッセイ(PLA)を用いて、複数のSMAD複合体を同時に可視化・解析するプロトコルを確立する。

Tags

TGF-Î²/BMP/SMAD Signaling Proximity Ligation Assay Fluid Shear Stress Microfluidic Flow Channels HUVEC Cells Transcription Factor Complexes Vascular Biology

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