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Visualisation et quantification de la signalisation TGFβ/BMP/SMAD dans différentes conditions de contrainte de cisaillement du fluide à l’aide du test de proximité-ligature-assay
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Visualization and Quantification of TGFβ/BMP/SMAD Signaling under Different Fluid Shear Stress Conditions using Proximity-Ligation-Assay
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Visualisation et quantification de la signalisation TGFβ/BMP/SMAD dans différentes conditions de contrainte de cisaillement du fluide à l’aide du test de proximité-ligature-assay

DOI:
10.3791/62608-v

•

11:38 min

•

September 14, 2021

•

, ,
1Institute for Chemistry and Biochemistry,Freie Universität Berlin, 2International Max-Planck Research School for Biology and Computation

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 00:40Cell Culture and Fluid Shear Stress Exposure
  • 02:55Fixation
  • 04:58Blocking and Incubation with Primary Antibody
  • 06:28Incubation with PLA Probe and Ligation
  • 07:34Amplification and Mounting
  • 09:14Results: Effect of Shear Stress on the SMAD Protein Interactions
  • 11:02Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Ici, nous établissons un protocole pour visualiser et analyser simultanément plusieurs complexes SMAD en utilisant le test de ligature de proximité (PLA) dans les cellules endothéliales exposées à des conditions pathologiques et physiologiques de stress de cisaillement des fluides.

Tags

Keywords: TGF-β/BMP/SMAD SignalingProximity Ligation AssayFluid Shear StressMicrofluidic Flow ChannelsHUVEC CellsTranscription Factor ComplexesVascular Biology

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