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체외 분석, 풀다운 및 샤프롱 분석을 사용한 히스톤 샤페론의 특성 분석
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In Vitro Characterization of Histone Chaperones using Analytical, Pull-Down and Chaperoning Assays
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체외 분석, 풀다운 및 샤프롱 분석을 사용한 히스톤 샤페론의 특성 분석

DOI:
10.3791/63218-v

•

08:16 min

•

December 29, 2021

•

, , , , , , , , ,
1Institute of Life Sciences, 2Regional Centre for Biotechnology, 3School of Biotechnology,KIIT University, 4Department of Molecular Biophysics and Biochemistry,Yale University, 5Department of Pharmacology,University of Vermont College of Medicine

Chapitres

  • 00:05Introduction
  • 01:04Competitive Pull-Down Assay
  • 02:06Analytical Ultracentrifugation-Sedimentation Velocity (AUC-SV) Experiments
  • 04:29Plasmid Supercoiling Assay to Confirm Histone Chaperoning Function
  • 06:11Results: Characterization of Histone Chaperones Using Analytical, Pull-Down, and Chaperoning Assays
  • 07:41Conclusion

Summary

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이 프로토콜은 히스톤 샤페론 올리고머화 및 안정성을 연구하기 위한 분석 크기 배제 크로마토그래피, 히스톤 샤페론-히스톤 상호작용을 밝히기 위한 풀다운 분석, 단백질 복합체의 화학량론을 분석하기 위한 AUC, 추정 히스톤 샤페론을 시험 관 내에서 기능적으로 특성화하기 위한 히스톤 샤페로닝 분석을 포함하는 일련의 방법을 설명합니다.

Tags

Keywords: Histone ChaperonesPull-down AssaysAnalytical Size Exclusion ChromatographyAnalytical Ultra-centrifugationHistone Chaperoning AssayChromatin ResearchH2A/H2B DimerH3/H4 TetramerSDS-PAGECoomassie Brilliant Blue R250Dialysis BufferAnalytical Ultra Centrifuge

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