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Journal JoVE Recherche en cancérologie
A Reporter Assay to Analyze Intronic microRNA Maturation in Mammalian Cells

Um ensaio repórter para analisar a maturação intronic microRNA em células mamíferas

DOI:
10.3791/63498-v

•

06:48 min

•

June 16, 2022

•

,
1Departamento de Biologia Celular e do Desenvolvimento, Instituto de Ciências Biomédicas,Universidade de São Paulo

Chapitres

  • 00:04Introduction
  • 00:52Cell Culture and HuR Overexpression
  • 02:26The Reporter Assay
  • 05:18Results: MicroRNA Biogenesis Reporter Assay Analyzing Maturation in Mammalian Cells
  • 06:17Conclusion

Summary

Traduction automatique

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Desenvolvemos um ensaio de repórter de biogênese intrônica para ser usado em células in vitro com quatro plasmídeos: um com miRNA intrônico, um com o alvo, um para superexpressar uma proteína regulatória, e outro para a luciferase renilla. O miRNA foi processado e pôde controlar a expressão da luciferase ligando-se à sequência de alvos.

Tags

Keywords: Reporter AssayMicroRNA MaturationMammalian CellsRNA-binding ProteinsMicroRNA BiogenesisCell CultureTransfectionLuciferaseHuRMiR-17-92RAB1B3’UTR

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